检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 328-332页

作者：邹鲁峰杨雨善姜关祥陈志游冬青第二军医大学基础医学部生物化学教研室第二军医大学海军医学系放射医学研究室

目的：建立兔乳酸脱氢酶Ｃ４（ＬＤＨ－Ｃ４）分离纯化的新方法，研究该酶的动力学特性。方法：采用ＢｌｕｅＤｅｘｔｒａｎ和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ交联制成ＢｌｕｅＤｅｘｔｒａｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ染料配体亲和层析柱，结合... 详细信息

目的：建立兔乳酸脱氢酶Ｃ４（ＬＤＨ－Ｃ４）分离纯化的新方法，研究该酶的动力学特性。方法：采用ＢｌｕｅＤｅｘｔｒａｎ和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ交联制成ＢｌｕｅＤｅｘｔｒａｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ染料配体亲和层析柱，结合ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子交换层析分离提纯兔ＬＤＨ－Ｃ４，以作图法测定该酶动力学数据。结果：纯化的ＬＤＨ－Ｃ４经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及琼脂糖凝胶电泳证明为单一组分，相对分子质量１３６０００。纯化得率４５．５％，纯化倍数３１６倍。兔ＬＤＨ－Ｃ４动力学测定，其对底物乳酸、丙酮酸的Ｋｍ值分别为１．１１ｍｍｏｌ／Ｌ、０．２３ｍｍｏｌ／Ｌ；产物乳酸、丙酮酸对其均有非竞争性抑制作用，Ｋｉ值分别为９．１１ｍｍｏｌ／Ｌ、０．０２７ｍｍｏｌ／Ｌ。结论：本法是一种简便、快速、高效的分离纯化免ＬＤＨ－Ｃ４新方法；动力学性质表明该酶对丙酮酸的亲和力大于乳酸，且易受产物丙酮酸的抑制。

关键词：乳酸脱氢酶同工酶亲和层析纯化分离

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差别显示mRNA法的改良

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 383-385页

作者：戴建新王易伦刘宇健郭嘉陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

差别显示ｍＲＮＡ法的改良戴建新，王易伦，刘宇健，郭嘉，陆德如分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异，是分子生物学研究领域的热点之一。目前，研究方法主要是：递减杂交［１］和差示杂交［２］；但这些方法技术难度大、重... 详细信息

差别显示ｍＲＮＡ法的改良戴建新，王易伦，刘宇健，郭嘉，陆德如分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异，是分子生物学研究领域的热点之一。目前，研究方法主要是：递减杂交［１］和差示杂交［２］；但这些方法技术难度大、重复率低且工作量大。差别显示ｍＲＮＡ...

关键词： mRNA 基因筛选聚合酶链反应

来源：评论

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携带HSV－tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 101-104页

作者：高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（... 详细信息

构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶ－ｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ＰＭＮｐ－ｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７Ｚ－ＡＦＰｅ质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮｐ－ｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰ－ｔｋ逆转录病毒载体。结论：该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。

关键词：肝肿瘤基因治疗逆转录病毒载体 HSV-tk

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脑梗塞及脑动脉硬化患者红细胞膜ATP酶活性、膜脂质及血液流变学改变

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 133-137页

作者：曲伸徐伟郭述苏第二军医大学基础医学部神经生物学教研室济南军区总医院

研究急性脑梗塞、脑动脉硬化患者红细胞膜ＡＴＰ酶活性、脂质含量以及红细胞成分、血液流变学指标及其相关性。方法：采用微滤筛法和锥板式粘度计分别测定红细胞变形能力和多切变粘度，分光光度计比色法测定ＡＴＰ酶活性和膜磷脂、胆固... 详细信息

研究急性脑梗塞、脑动脉硬化患者红细胞膜ＡＴＰ酶活性、脂质含量以及红细胞成分、血液流变学指标及其相关性。方法：采用微滤筛法和锥板式粘度计分别测定红细胞变形能力和多切变粘度，分光光度计比色法测定ＡＴＰ酶活性和膜磷脂、胆固醇含量及其比值。结果：发现中风患者存在红细胞膜ＡＴＰ酶活性降低，脂质成分改变，红细胞变形能力下降，且在发病前就有不同程度的改变。结论：临床上对中风前期病变进行针对性的预防治疗和发病后采取适当的改善微循环，纠正离子转运障碍等措施有一定的实际意义。

关键词：脑梗塞脑动脉硬化红细胞膜 ATP酶血液流变学

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逆转录病毒介导的人肝癌特异性HSV－tk／ACV的体外抗肝癌作用

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 505-508页

作者：高军曹广文戚中田吴宗娣杜平仇小芳崔龙杨文国第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，... 详细信息

目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论：该ＡＦＰｅ／ＨＳＶ－ｔｋ／前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。

关键词：肝肿瘤胸苷激酶甲胎蛋白增强子基因治疗

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无创性微血管内皮细胞分离法

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 578-580页

作者：陈思锋纪晓峰姜远英李忆东第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学药学院药理学教研室

无创性微血管内皮细胞分离法陈思锋，纪晓峰，姜远英，李忆东内皮细胞是组织与血液进行物质交换的必经之路，也是组织细胞通过体液因子与其他器官组织进行对话的必由之路。内皮细胞不仅是一种被动屏障，而且还通过表达和释放酶、受体、... 详细信息

无创性微血管内皮细胞分离法陈思锋，纪晓峰，姜远英，李忆东内皮细胞是组织与血液进行物质交换的必经之路，也是组织细胞通过体液因子与其他器官组织进行对话的必由之路。内皮细胞不仅是一种被动屏障，而且还通过表达和释放酶、受体、生物活性物质等主动参与调节组织器官...

关键词：肺微血管内皮细胞分离

来源：评论

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原发性肝癌患者外周血CD44v　mRNA检测的临床意义

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第二军医大学学报 1996年第3期17卷 226-228页

作者：刘鹏飞吴孟超陈汉钱光相傅继梁第二军医大学长海医院肝胆外科研究所第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：检测原发性肝癌患者外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，探讨其能否反映肿瘤的侵袭转移潜能。方法：应用敏感的ＲＴ－ＰＣＲ方法，通过合理的ＰＣＲ引物的设计，检测了１５例原发性肝癌患者术晨的外周静脉血中Ｃ... 详细信息

目的：检测原发性肝癌患者外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，探讨其能否反映肿瘤的侵袭转移潜能。方法：应用敏感的ＲＴ－ＰＣＲ方法，通过合理的ＰＣＲ引物的设计，检测了１５例原发性肝癌患者术晨的外周静脉血中ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ，结果：从６例患者外周静脉血中选择性地检测出了游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ．结论：外周静脉血中游离肿瘤细胞表达的ＣＤ４４ｖｍＲＮＡ可能从一个侧面反映了肿瘤的侵袭转移潜能，此法有可能作为恶性肿瘤监测及诊断的辅助手段。

关键词：肝肿瘤原发性 CD44 肿瘤转移 mRNA 外周血

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原位杂交与免疫组化结合的双重标记方法的研究

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 385-387页

作者：倪灿荣戴益民第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室

原位杂交与免疫组化结合的双重标记方法的研究倪灿荣，戴益民本实验应用改进后的非同位素标记核酸探针原位杂交（ＩＳＨ）和敏感的标记链霉亲和素－生物素方法（ＬＳＡＢ）、碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）免疫组化（ＩＨ）相... 详细信息

原位杂交与免疫组化结合的双重标记方法的研究倪灿荣，戴益民本实验应用改进后的非同位素标记核酸探针原位杂交（ＩＳＨ）和敏感的标记链霉亲和素－生物素方法（ＬＳＡＢ）、碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）免疫组化（ＩＨ）相结合的双重标记方法，分别检测常规固...

关键词：癌基因原位杂交免疫组织化学石蜡切片标记

来源：评论

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含CD基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 1996年第3期17卷 289-291页

作者：崔龙曹广文王元和屠岳孟荣贵高军仇小芳吴宗娣谢苏庆第二军医大学长海医院普外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院普外科

含ＣＤ基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建崔龙，曹广文，王元和，屠岳，孟荣贵，高军，仇小芳，吴宗娣，谢苏庆关键词大肠癌；胞嘧啶脱氨酶基因；逆转录病毒载体；癌胚抗原；转录调控序列胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）是真菌及某些大肠... 详细信息

含ＣＤ基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建崔龙，曹广文，王元和，屠岳，孟荣贵，高军，仇小芳，吴宗娣，谢苏庆关键词大肠癌；胞嘧啶脱氨酶基因；逆转录病毒载体；癌胚抗原；转录调控序列胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）是真菌及某些大肠杆菌等ＤＮＡ嘧啶补救合成途径中的关...

关键词：大肠肿瘤 CD基因逆转录病毒载体病毒载体

来源：评论

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肿瘤与瘤周组织中生长抑素和巯基含量的变化

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第二军医大学学报 1996年第1期17卷 22-24页

作者：路红社赵孟尧王成海黄伟达第二军医大学长海医院神经外科第二军医大学基础医学部神经生物学教研室复旦大学生物化学系

目的：探讨肿瘤组织中生长抑素含量的变化与肿瘤的生长关系，并进一步对导致这些变化的原因进行研究。方法：采用生长抑素的放射免疫测定和巯基光吸收法，对Ｓ９１黑瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌和Ｓ１８０肉瘤等恶性肿病与瘤周组织中生长抑素与... 详细信息

目的：探讨肿瘤组织中生长抑素含量的变化与肿瘤的生长关系，并进一步对导致这些变化的原因进行研究。方法：采用生长抑素的放射免疫测定和巯基光吸收法，对Ｓ９１黑瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌和Ｓ１８０肉瘤等恶性肿病与瘤周组织中生长抑素与巯基含量进行测定。结果：发现所有肿瘤组织中的生长抑素含量均低于瘤周组织，而巯基的含量则完全相反。结论：生长抑素含量的降低参与了肿瘤的生长；生长抑素含量降低的原因，可能是含量高的巯基破坏了生长抑素分子结构中的双硫键。

关键词：生长抑素巯基肿瘤瘤周组织

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