检索结果-内蒙古大学图书馆

携带HuIFN－β　cDNA的重组逆转录病毒载体的构建及在人肝癌细胞中的特异表达

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 301-305页

作者：曹广文杜平杨文国戚中田孔宪涛上海第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海第二军医大学长征医院实验诊断科

目的：研究逆转录病毒介导干扰素基因转移及在肝癌细胞中特异表达作用。方法：将人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＰＬ位点，分别构建了转录受ＳＶ４０启动子驱动的载体ＭＮＳＩＦＮＢ和转录受人甲胎蛋白增强... 详细信息

目的：研究逆转录病毒介导干扰素基因转移及在肝癌细胞中特异表达作用。方法：将人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＰＬ位点，分别构建了转录受ＳＶ４０启动子驱动的载体ＭＮＳＩＦＮＢ和转录受人甲胎蛋白增强子（ＡＦＰｅ）调控的载体ＭＮＡＩＦＮＢ。用脂质体转染法将载体分别转导ＰＡ３１７包装细胞，质粒转染率为每１０５ＰＡ３１７细胞（４～２５）×１０３ＣＦＵ／μｇ，病毒感染率（４．５～５００）×１０４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌、肾癌及黑色素瘤细胞。结果：ＮｅｏＲ克隆ＲＮＡ斑点杂交及ＩＦＮ活性分析证明，人ＡＦＰｅ可促进异源启动子启动ＨｕＩＦＮ－β基因在合成ＡＦＰ的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。结论：ＡＦＰ＂持家基因＂顺式调控序列在合成ＡＦＰ的肝癌细胞中特异驱动ＩＦＮ－β基因表达，该研究为肝癌特异性免疫基因治疗提供了资料。

关键词： β干扰素逆转录病毒载体肝肿瘤基因治疗 cDNA

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小鼠Alb　e／p序列与肝癌细胞核蛋白之间的相互作用

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海军军医大学学报 1996年第4期17卷 354-357页

作者：杨文国曹广文高军吴宗娣谢苏庆崔龙潘欣杜平戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学长海医院消化内科

目的：研究肝癌组织特异性基因治疗的机理。方法：从小鼠肝细胞、肝癌细胞和黑色素瘤细胞中分别提取核蛋白组分和胞浆蛋白，分别与小鼠白蛋白增强子／启动子（Ａｌｂｅ／ｐ）、白蛋白增强子（Ａｌｂｅ）和白蛋白启动子（Ａｌｂｐ）结合... 详细信息

目的：研究肝癌组织特异性基因治疗的机理。方法：从小鼠肝细胞、肝癌细胞和黑色素瘤细胞中分别提取核蛋白组分和胞浆蛋白，分别与小鼠白蛋白增强子／启动子（Ａｌｂｅ／ｐ）、白蛋白增强子（Ａｌｂｅ）和白蛋白启动子（Ａｌｂｐ）结合。结果：Ｂａｎｄ－Ｓｈｉｆｔ试验和竞争试验发现某些肝癌细胞核蛋白组分能与Ａｌｂｅ／ｐ特异结合，其中与Ａｌｂｅ和Ａｌｂｐ特异结合的核蛋白在不同的组分中，而肝癌细胞胞浆蛋白和黑色素瘤细胞核蛋白不能与Ａｌｂｅ／ｐ结合。结论：提示肝癌细胞核中能与Ａｌｂｅ和Ａｌｂｐ作用的核蛋白是应用Ａｌｂｅ／ｐ调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的基础。

关键词：肝肿瘤核蛋白白蛋白增强子启动子

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含HSV－tk基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 1996年第3期17卷 216-218页

作者：崔龙曹广文王元和屠岳孟荣贵高军仇小芳吴宗娣第二军医大学长海医院普通外科第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院普通外科

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适... 详细信息

目的：为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法：将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出合适的酶切片段后，与来自ｐＣＥＡ４２４／２ＣＡＴ质粒的ＣＥＡ５＇转录调控序列相连接，克隆入逆转录病毒载体中。结果：经鉴定及筛选，构建成重组逆转录病毒载体Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ。结论：Ｇ１ＣＥＡｔｋＮａ的成功构建，为进一步研究大肠癌组织特异性基因治疗奠定了基础。

关键词：单纯疱疹病毒大肠肿瘤逆转录病毒病毒载体

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肝癌细胞核蛋白对白蛋白增强子／启动子序列的体外转录调控作用

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 350-353页

作者：曹广文高军谢苏庆杨文国崔龙潘欣杜平戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院消化内科第二军医大学长海医院普通外科

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分，用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细... 详细信息

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分，用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细胞核蛋白组分具有明显的转录作用，而细胞浆蛋白和其他肿瘤核蛋白组分没有转录作用，将同一肝癌细胞某些核蛋白组分合并可使转录活性增强。结论：本研究在基因转录调控水平部分解释了应用白蛋白增强子／启动子调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的机理。

关键词：肝肿瘤核蛋白转录分析白蛋白增强子启动子

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川芎嗪对肝缺血再灌注大鼠线粒体功能的保护作用

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第二军医大学学报 1996年第5期17卷 434-436页

作者：孙经建缪明永吴孟超王学敏陈汉钱光相第二军医大学长海医院东方肝胆外科研究所第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：评价川芎嗪对肝缺血再灌注后大鼠肝线粒体功能的影响，并探讨其保护作用。方法：实验动物分为３组：阻断组、阻断＋川芎嗪组和假处理组。肝线粒体分离后以氢电极法测定其呼吸活性。结果：肝缺血再灌注后大鼠肝线粒体呼吸比率、磷... 详细信息

目的：评价川芎嗪对肝缺血再灌注后大鼠肝线粒体功能的影响，并探讨其保护作用。方法：实验动物分为３组：阻断组、阻断＋川芎嗪组和假处理组。肝线粒体分离后以氢电极法测定其呼吸活性。结果：肝缺血再灌注后大鼠肝线粒体呼吸比率、磷氧比值和氧化磷酸化效率均显著降低，应用川芎嗪能保持正常的线粒体功能。结论：川芎嗪具有保护缺血再灌注肝线粒体功能的作用。

关键词：川芎嗪肝缺血再灌注线粒体川芎

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层粘连蛋白总糖肽对小鼠巨噬细胞功能的影响

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 320-323页

作者：刘艺萍周柔丽张莎第二军医大学基础医学部生物学教研室北京医科大学细胞生物学教研室

目的：观察层粘连蛋白总糖肽（Ｌａｍｉｎｉｎｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＬＮ－Ｇｐｓ）对小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍ）杀伤黑色素瘤Ｂ１６细胞及吞噬抗体包被的羊红细胞（ＥＡ）作用的影响。方法：将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔Ｍ体外培养４８... 详细信息

目的：观察层粘连蛋白总糖肽（Ｌａｍｉｎｉｎｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＬＮ－Ｇｐｓ）对小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍ）杀伤黑色素瘤Ｂ１６细胞及吞噬抗体包被的羊红细胞（ＥＡ）作用的影响。方法：将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔Ｍ体外培养４８ｈ后，再分别与０（对照），５０，１００，２００μｇ／ｍｌ终浓度的ＬＮ－Ｇｐｓ预温３０ｍｉｎ，用噻唑蓝比色法检测Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用，用联苯胺氧化比色法检测Ｍ吞噬ＥＡ的功能。结果：（１）Ｍ杀伤Ｂ１６细胞的作用呈剂量依赖性增高，其中１００μｇ／ｍｌ和２００μｇ／ｍｌ的ＬＮ－Ｇｐｓ可分别使Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用较对照组增高（１０．３±２．８）％和（２８．４±９．９）％（Ｐ均＜０．０５）。（２）Ｍ对ＥＡ吞噬作用降低，分别为对照组的（９２．２±１２．４）％（ＬＮ－Ｇｐｓ５０μｇ／ｍｌ）、（８７．０±１４．２）％（ＬＮ－Ｇｐｓ１００μｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５）和（６９．４±１８．２）％（ＬＮ－Ｇｐｓ２００μｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５）。（３）如果将Ｂ１６细胞与ＬＮ－Ｇｐｓ２００μｇ／ｍｌ先预温，则Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用较对照组（Ｂ１６细胞不与ＬＮ－Ｇｐｓ预温）明显下降，为对照组的（８４．７±７．３）％（Ｐ?

关键词：层粘连蛋白糖肽巨噬细胞吞噬作用 LN-Gps

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基因xylE编码的邻苯二酚2，3－双加氧酶在大肠杆菌中的亚克隆与高表达

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 306-312页

作者：蔡在龙王学敏毛积芳季朝能张洁董海沈仁权毛裕民上海第二军医大学基础医学部生物化学教研室上海复旦大学遗传学研究所

目的：构建ｘｙｌＥ基因高表达菌株，为快速检测芳香类化合物污染提供可能。方法和结果：通过ＰＣＲ扩增，将位于质粒ｐＴＧ４０２上的ｘｙｌＥ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并... 详细信息

目的：构建ｘｙｌＥ基因高表达菌株，为快速检测芳香类化合物污染提供可能。方法和结果：通过ＰＣＲ扩增，将位于质粒ｐＴＧ４０２上的ｘｙｌＥ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并未发生突变，然后进一步克隆于高表达载体ｐＪＬＡ５０３，转化Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１，经４２℃诱导，获得了高表达的基因产物，表达量占全菌总蛋白的３４．２％。结论：ｘｙｌＥ基因在大肠杆菌中获得了高表达。

关键词： xylE基因邻苯二酚双加氧酶大肠杆菌亚克隆

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IL－2和TNF特异性基因治疗后肝癌组织病理及免疫组化分析

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第二军医大学学报 1996年第6期17卷 509-512页

作者：曹广文余永伟沈茜杜平杨文国孔宪涛戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长海医院病理诊断科第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学长征医院临床免疫中心

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的... 详细信息

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的ＩＬ－２和ＴＮＦ基因在原位感染实验性肝癌可使肝癌逐渐缩小。ＴＮＦ基因可使肝癌组织内广泛出血坏死，Ｍａｃ－１＋炎细胞浸润为主；ＩＬ－２基因可使肝癌组织内大片坏死，Ｌｙｔ２＋炎细胞浸润，两组治疗后期均出现明显的纤维化。结论：ＩＬ－２或ＴＮＦ肝癌特异性原位基因治疗介导免疫抗肿瘤反应，但机理有所不同。

关键词：肝肿瘤基因治疗肿瘤坏死因子白细胞介素2

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中央灰质注射升压素和催产素受体拮抗剂对刺激视上核镇痛和加强电针镇痛效应的影响

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 121-124页

作者：徐慰慈由振东宋朝佑王成海林葆城第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海市杨浦区卫生学校生理组

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的... 详细信息

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的镇痛和加强电针镇痛的影响。结果：ＰＡＧ内注射Ｖ１拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ对化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛和加强电针镇痛无影响；Ｖ１Ｖ２受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｅｔ）ＤＡＶＰ可部分抑制这种效应；ＰＡＧ内注射２００ｐｇＯＴ受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）２，Ｏｒｎ８－ｖａｓｏｔｏｃｉｎ（ＯＶＴ）则可完全阻断这种效应。结论：ＰＡＧ参与刺激ＳＯＮ镇痛和加强电针镇痛的过程，ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＰＡＧ内的ＯＴ和Ｖ２受体而发挥镇痛和加强电针镇痛作用。

关键词：视上核中央灰质催产素升压素镇痛

来源：评论

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大鼠急性颅脑伤后下丘脑生长抑素神经元的变化

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第二军医大学学报 1996年第2期17卷 166-169页

作者：刘平王代学刘淑琴周其锦陈建新第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室南京海军医学专科学校解剖学教研室

应用免疫细胞化学和图像分析等技术，观察大鼠急性颅脑伤后室旁核生长抑素（Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＳ）神经元的变化。结果表明，损伤初期（伤后即刻，１ｈ）ＳＳ神经元数目和免疫反应面积均明显减少（Ｐ＜０．０１）；伤后３ｈ... 详细信息

应用免疫细胞化学和图像分析等技术，观察大鼠急性颅脑伤后室旁核生长抑素（Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＳ）神经元的变化。结果表明，损伤初期（伤后即刻，１ｈ）ＳＳ神经元数目和免疫反应面积均明显减少（Ｐ＜０．０１）；伤后３ｈ和６ｈＳＳ含量逐渐增加，恢复至正常水平（Ｐ＞０．０５）。该结果从形态学上提示，下丘脑室旁核ＳＳ可能参与了急性颅脑伤的病理生理过程。

关键词：颅脑损伤下丘脑生长抑素神经元

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