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空军军医大学学报 2025年

作者：魏仁吉张翔贾林涛空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的改良一种DNA 5-甲基胞嘧啶去甲基化工具，实现对高甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸（CpG）位点密集区域的去甲基化。方法基于CRISPR/Cas9系统以及SunTag系统原理，将现有质粒模板82559的不同功能元件拆分，重新整合为两个慢病毒质粒... 详细信息

目的改良一种DNA 5-甲基胞嘧啶去甲基化工具，实现对高甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸（CpG）位点密集区域的去甲基化。方法基于CRISPR/Cas9系统以及SunTag系统原理，将现有质粒模板82559的不同功能元件拆分，重新整合为两个慢病毒质粒，使用U251和PC-9细胞系建立双慢病毒感染的稳转系，从而提高表达效率；选择雷诺丁受体2（RYR2）基因启动子高甲基化CpG岛作为靶向区域，针对该区域设计单链向导RNA（sgRNA）并导入前述稳转系细胞中，通过比较对照组与实验组RYR2启动子区甲基化水平及基因表达水平，比较各处理组去甲基化程度。结果与转染82559质粒组相比，U251及PC-9双慢病毒稳转系表达dCas9和TET1CD的水平显著上升（P<0.001）；U251及PC-9双慢病毒稳转系转染RYR2-sgRNA后，其RYR2启动子区域去甲基化比例显著上升（P<0.01），RYR2基因表达水平相较于对照组及转染82559质粒组均明显上升（P<0.05、P<0.000 1）。结论改良后的慢病毒工具能有效提高dCas9及TET1CD的表达效率，并发挥去甲基化作用进而诱导目的基因表达，相较于原质粒82559具有明显的优效性，是一种有效的表观遗传编辑工具。

关键词： DNA甲基化去甲基化慢病毒质粒 CRISPR/Cas9系统表观遗传学

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有氧运动治疗慢性痛及情绪障碍共病的研究进展

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神经解剖学杂志 2024年第3期40卷 383-386页

作者：黄文烨孟凡成钟建心崔玥汪涛武胜昔薛茜徐晖西北大学生命科学学院西安710069 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室空军军医大学基础医学院五大队十九队西安710032

慢性痛与焦虑、抑郁等情绪障碍相互作用形成恶性循环。目前药物治疗慢性痛及情绪障碍效果不佳,且常伴有成瘾、大脑发育改变等副作用。近年来,针对慢性痛和情绪障碍的非药物治疗手段越来越受到关注,其中有氧运动能明显减轻慢性痛感觉,改... 详细信息

慢性痛与焦虑、抑郁等情绪障碍相互作用形成恶性循环。目前药物治疗慢性痛及情绪障碍效果不佳,且常伴有成瘾、大脑发育改变等副作用。近年来,针对慢性痛和情绪障碍的非药物治疗手段越来越受到关注,其中有氧运动能明显减轻慢性痛感觉,改善焦虑、抑郁等负性情绪,但是有氧运动如何减缓慢性痛及其情绪障碍共病的潜在神经分子机制尚不明确。有氧运动是以有氧代谢提供能量的运动,大量临床和实验研究表明有氧运动条件下神经营养因子、炎性细胞因子、神经递质、内源性阿片肽等分子可能参与缓解慢性痛及及负性情绪的发生和发展,本文综述了有氧运动治疗慢性痛及其情绪障碍共病潜在神经分子机制的研究进展。

关键词：运动慢性痛情绪障碍神经机制

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靶向抑制有氧酵解联合免疫治疗在肾细胞癌中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 74-79页

作者：张坤茹梦瑶王佳媛赵菊梅沈岚延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

肿瘤有氧酵解是肿瘤代谢重编程的主要特征之一,这种异常的糖酵解代谢途径为肿瘤生长和增殖提供生物能量和生物原材料。肿瘤细胞不仅通过有氧酵解途径为自身提供生物原材料和能量,还通过免疫微环境逃脱免疫监视,发生免疫逃逸,从而抵抗肿... 详细信息

肿瘤有氧酵解是肿瘤代谢重编程的主要特征之一,这种异常的糖酵解代谢途径为肿瘤生长和增殖提供生物能量和生物原材料。肿瘤细胞不仅通过有氧酵解途径为自身提供生物原材料和能量,还通过免疫微环境逃脱免疫监视,发生免疫逃逸,从而抵抗肿瘤免疫治疗,促进肿瘤的发生和发展。本文以肾细胞癌的发病机制为背景,阐述其有氧酵解代谢的特征、糖酵解代谢对肿瘤免疫微环境的影响、糖酵解代谢抑制剂对肾细胞癌免疫微环境的影响、糖酵解代谢抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗肾细胞癌的前景与展望。

关键词：肾细胞癌糖酵解免疫检查点抑制剂肿瘤免疫治疗综述

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靶向HER2的通用型CAR-T细胞来源的细胞外囊泡的制备及功能鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第2期40卷 121-128页

作者：蒙若彤王鹏举赵晓娟郑瑞梁思辛张依婷董昊韩玉洁杨安钢白占涛阎博路凡延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 新乡医学院医学检验学院河南新乡453003

目的利用可持续传代的T淋巴细胞系,制备携带靶向人表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的嵌合抗原受体(CAR)的细胞外囊泡(EV),并检测其对HER2^(+)肿瘤细胞的杀伤能力。方法采用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒。利用成簇的规律间隔的短回文... 详细信息

目的利用可持续传代的T淋巴细胞系,制备携带靶向人表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的嵌合抗原受体(CAR)的细胞外囊泡(EV),并检测其对HER2^(+)肿瘤细胞的杀伤能力。方法采用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒。利用成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术和慢病毒感染的方法构建底盘Jurkat细胞。流式细胞术检测底盘Jurkat细胞、嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞和CAR-Jurkat细胞的构建。通过聚乙二醇6000(PEG6000)浓缩方法和细胞挤压方法制备EV;微粒子追踪分析(NTA)和Western blot法鉴定EV。萤光素酶报告基因系统检测细胞和EV对肿瘤细胞的杀伤作用。荧光显微镜观察免疫细胞对EV的吞噬作用。结果酶切鉴定和基因测序结果表明重组质粒构建成功。流式细胞术结果显示底盘Jurkat细胞、 CAR-T细胞和CAR-Jurkat细胞顺利制备。NTA结果显示制备的EV大小正确。萤光素酶报告基因系统证明CAR-T细胞、 CAR-Jurkat细胞、 CAR-T EV和CAR-Jurkat EV对HER2+肿瘤细胞均具有靶向杀伤能力。荧光显微镜观察表明,提高CD47分子的表达水平能够减弱免疫细胞对通用型CAR-Jurkat EV的吞噬作用。结论通用型CAR-T细胞来源EV能够靶向杀伤HER2+肿瘤细胞。

关键词：嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞同种异体底盘细胞细胞外囊泡

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科研反哺在医学免疫学教学中的实践与探索

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第6期40卷 571-574页

作者：张溪洋孙元杰杨舒雅姜东伯杨琨空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 空军军医大学军事医学创新中心陕西西安710032

医学免疫学是连接基础实验与临床应用的重要纽带,更是多种前沿学科的交叉点。目前免疫学教学中仍存在教学方式单一和学生科研训练不足等局限性。空军军医大学基础医学院免疫学教研室在免疫学课程中对科研反哺教学进行实践探索,利用科研... 详细信息

医学免疫学是连接基础实验与临床应用的重要纽带,更是多种前沿学科的交叉点。目前免疫学教学中仍存在教学方式单一和学生科研训练不足等局限性。空军军医大学基础医学院免疫学教研室在免疫学课程中对科研反哺教学进行实践探索,利用科研思维引领教学活动,通过科研平台支撑教学实践,增添科研进展丰富教学内容,设置科研活动激发学生兴趣,增加学生内驱力,提升教学效果,实现教学与科研“双赢”,也为培养能够肩负国之重任的医学创新人才提供助力。

关键词：科研反哺教学实践医学免疫学创新

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长链非编码RNA SFTA1P在肺鳞状细胞癌中的表达及其对肺鳞状细胞癌细胞生物学功能的影响

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陆军军医大学学报 2024年第11期46卷 1226-1234页

作者：万围萍谢薇佳夏婷婷向颖邬娜李成英单亦凡白莉李亚斐陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的探究长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(surfactant associated 1 pseudogene,SFTA1P)在肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)中的表达水平及其对肺鳞癌细胞生物学功能的影响。方法提取癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库数... 详细信息

目的探究长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(surfactant associated 1 pseudogene,SFTA1P)在肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)中的表达水平及其对肺鳞癌细胞生物学功能的影响。方法提取癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库数据,分析SFTA1P在肺鳞癌组织及正常肺组织中的表达差异;qRT-PCR检测SFTA1P在人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和肺鳞癌细胞系(H520和SK-MES-1)中的表达;通过转染SFTA1P过表达质粒及SFTA1P小干扰RNA分别构建SFTA1P过表达及干扰细胞模型;通过CCK-8及Transwell实验检测SFTA1P对肺鳞癌细胞生物学功能的影响;通过差异分析、相关性分析和功能富集分析探讨SFTA1P影响肺鳞癌细胞生物学功能的潜在机制。结果TCGA数据库肺鳞癌样本分析结果显示,SFTA1P在肺鳞癌组织中表达较正常肺组织低(P<0.05);SFTA1P在肺鳞癌细胞中表达也较人正常肺上皮细胞低(P<0.05);在肺鳞癌细胞系中,相比于H520细胞株,SFTA1P在SK-MES-1细胞株中相对低表达(P<0.05);细胞功能实验结果发现,过表达SFTA1P可抑制肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),敲低SFTA1P可增强肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05);差异分析、相关性分析和功能富集分析结果表明,SFTA1P在肺鳞癌中可能抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路。结论SFTA1P在肺鳞癌中具有抑癌功能,其可能通过抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路影响肺鳞癌细胞的生物学功能。

关键词：长链非编码RNA SFTA1P 肺鳞癌细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

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葛根素抑制巨噬细胞NLRP3炎症小体表达减轻溃疡性结肠炎及其初步机制分析

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中国免疫学杂志 2025年第4期41卷 775-782页

作者：赵鑫陈旭涛鲁星妤但文利高国俊唐康陈丽华陕西中医药大学医学技术学院咸阳712046 空军军医大学基础医学院免疫学教研室西安710032

目的:探讨葛根素(PUE)对巨噬细胞NLRP3炎症小体表达的影响及其对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用。方法:建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型,连续7 d通过灌胃给予PUE后测定小鼠的体质量、疾病活动指数、结肠长度;HE染色观察组织病理损伤... 详细信息

目的:探讨葛根素(PUE)对巨噬细胞NLRP3炎症小体表达的影响及其对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用。方法:建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型,连续7 d通过灌胃给予PUE后测定小鼠的体质量、疾病活动指数、结肠长度;HE染色观察组织病理损伤;流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞及结肠固有层巨噬细胞比例;免疫荧光检测NLRP3炎症小体与巨噬细胞的共定位情况;qRT-PCR检测小鼠结肠组织促炎细胞因子和NLRP3炎症小体相关基因的mRNA表达水平;Western blot检测结肠组织ZO-1、Occludin、cleaved caspase-1及IL-1β蛋白表达水平;利用脂多糖(LPS)及三磷酸腺苷(ATP)构建细胞模型,qRT-PCR检测NLRP3炎症小体相关基因的mRNA表达水平;Western blot检测PUE对NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平及NF-κB信号通路的影响。结果:PUE干预显著改善DSS诱导的小鼠UC症状,包括体质量、疾病指数、结肠长度和病理损伤;PUE干预UC小鼠后,小鼠结肠固有层Ly6C+MHCⅡ-单核来源的巨噬细胞浸润减少;结肠组织中促炎细胞因子及NLRP3炎症小体相关分子表达水平降低;小鼠肠上皮细胞间ZO-1及Occludin表达水平升高;体外细胞实验证实,PUE能够降低LPS结合ATP诱导的巨噬细胞NLRP3炎症小体相关分子表达水平,同时降低p-NF-κB p65蛋白表达水平。结论:PUE可以通过减轻肠道组织炎症、修复上皮屏障显著改善UC症状。其机制可能是通过调控NF-κB信号通路,减少了巨噬细胞内NLRP3炎症小体的形成与激活。

关键词：溃疡性结肠炎葛根素巨噬细胞 NLRP3炎症小体

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低肺活量:影响脊髓损伤患者功能预后的独立危险因素

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中国康复医学杂志 2024年第8期39卷 1149-1154,1161页

作者：薛白洁何霞吴相波梁英许招娣琚芬王宏斌王薇惠琳娜张亚妮袁华孙晓龙空军军医大学第一附属医院(西京医院)康复医学科西安市710032 空军军医大学预防医学系军队卫生统计学教研室

目的:探讨基础肺功能指标与脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)患者功能预后的相关性,为临床早期精准判断预后及提高康复效果提供依据。方法:回顾性分析2018年6月至2022年5月由空军军医大学第一附属医院康复医学科收治的SCI患者398例。... 详细信息

目的:探讨基础肺功能指标与脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)患者功能预后的相关性,为临床早期精准判断预后及提高康复效果提供依据。方法:回顾性分析2018年6月至2022年5月由空军军医大学第一附属医院康复医学科收治的SCI患者398例。收集患者入院时年龄、性别、身体质量指数(body mass index,BMI)、入院距损伤时间、住院天数、ASIA(American Spinal Injury Association)分级、损伤平面、血液学指标(白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白浓度)、入院时基础肺功能指标包括潮气量(tidal volume,VT)、肺活量(vital capacity,VC)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、第一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、一秒率(forced expiratory volume in one second/forced vital capacity,FEV1/FVC)、呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)、用力呼出25%肺活量时的呼气流速(FEF25)、用力呼出50%肺活量时的呼气流速(FEF50)、用力呼出75%肺活量时的呼气流速(FEF75)、最大通气量(maximal voluntary ventilation,MVV)、最大通气量占预计值百分比(maximal voluntary ventilation/maximal predicted voluntary ventilation,MVV/MVVpre)等资料。以改良Barthel指数的平均相对功能恢复百分比(mean relative function gain,m RFG)作为因变量,利用单因素及多因素线性回归方法分析筛选出影响SCI患者预后的相关因素,尤其是基础肺功能指标。结果:单因素及多因素线性回归分析结果显示,SCI患者预后与ASIA分级(B=11.064,P=0.019)、住院天数(B=0.125,P=0.005)及VC(B=5.177,P=0.014)有显著相关性。VC判断SCI患者预后的临界值为2.39L。结论:低VC是SCI患者功能预后的独立危险因素。入院时检测基础肺功能有助于判断SCI患者功能预后,其中VC为2.39L以下患者提示预后更差,对于这类患者应予以重点关注,介入更充分地康复治疗,最大程度改善患者的日常生活能力。

关键词：脊髓损伤预后基础肺功能相关因素

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胆固醇代谢与肿瘤免疫

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四川大学学报（医学版） 2022年第2期53卷 335-341页

作者：罗娜时荣臣代荣阳缪洪明西南医科大学基础医学院泸州646000 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038

胆固醇是生物体内重要的脂质分子,参与细胞的膜性结构形成、胆汁酸代谢以及类固醇激素合成等,对细胞的结构和功能具有重要的调控作用。近年来,大量研究表明胆固醇代谢在肿瘤发生发展过程中发生了重编程。除了直接影响肿瘤细胞的生物学行... 详细信息

胆固醇是生物体内重要的脂质分子,参与细胞的膜性结构形成、胆汁酸代谢以及类固醇激素合成等,对细胞的结构和功能具有重要的调控作用。近年来,大量研究表明胆固醇代谢在肿瘤发生发展过程中发生了重编程。除了直接影响肿瘤细胞的生物学行为,胆固醇代谢重编程还可以调控肿瘤微环境中免疫细胞的抗瘤活性。本文回顾了肿瘤微环境中髓源抑制性细胞、肿瘤相关巨噬细胞、树突状细胞以及T淋巴细胞等免疫细胞的胆固醇代谢重编程及其相互作用。肿瘤微环境中胆固醇代谢与肿瘤免疫的关系呈现复杂性、多样性。肿瘤微环境中胆固醇代谢重编程在调控免疫细胞活性方面的异同以及具体调控的机制仍是一个尚未完全解决的问题。靶向干预免疫细胞的胆固醇代谢途径,有望成为胆固醇代谢在肿瘤免疫治疗的新策略。

关键词：胆固醇代谢肿瘤免疫调控肿瘤微环境

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合并慢性阻塞性肺疾病对晚期非小细胞肺癌患者免疫治疗的影响

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陆军军医大学学报 2023年第11期45卷 1189-1196页

作者：毕周奎单亦凡张文静游雅婷赵才林陈旻旻夏婷婷李亚斐白莉陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院呼吸与危重症医学科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系流行病学教研室重庆400038

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者接受免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗的疗效和免疫检查点抑制剂相关肺炎(checkpoint inhibitor pneumonitis,CIP)发生率的影响。方法采用回顾性队列研究设计方案,纳入2019年1月至2021年8月在陆军军医大学第二附属医院接受至少2次ICIs治疗的Ⅲb-Ⅳ期NSCLC患者379例,根据慢性阻塞性肺疾病全球倡议(global initiative for chronic obstructive lung disease,GOLD)2021或胸部高分辨CT诊断是否合并COPD,其中184例为NSCLC合并COPD组(NSCLC-COPD组),195例为单纯NSCLC组(NSCLC组),收集疗效终点指标包括客观缓解率(objective response rate,ORR)、无进展生存期(progression free survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)和CIP的发生率,分析COPD对晚期NSCLC患者接受ICIs治疗疗效和CIP发生率的影响。结果NSCLC-COPD组接受ICIs治疗的ORR显著优于NSCLC组(45.7%vs 35.4%,P=0.042)。调整混杂因素后的多因素Logistic分析显示,合并COPD是ORR的独立预后因素(HR=0.587,95%CI:0.379~0.909;P=0.017)。与NSCLC组相比,NSCLC-COPD组患者中位PFS更长(14.6月vs 10.9月;P=0.023)。调整混杂因素后的多因素Cox分析显示,合并COPD可能是PFS的良性预后因素(HR=0.768;95%CI:0.581~1.015;P=0.064)。COPD与OS无明显相关性。所有患者中13例患者发生CIP,其中NSCLC-COPD组9例(4.9%),NSCLC组4例(2.1%),两组发生率无统计学差异(P=0.162)。结论NSCLC合并COPD的患者接受ICIs治疗的ORR、PFS显著优于单纯NSCLC患者,提示COPD是晚期NSCLC患者接受ICIs治疗获得较好疗效的潜在预测因素。合并COPD并未增加CIP的发生风险。

关键词：非小细胞肺癌慢性阻塞性肺疾病免疫检查点抑制剂

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