检索结果-内蒙古大学图书馆

miR-185-5p靶向负调控TM9SF1对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响

解放军医学杂志 2025年第5期 566-574页

作者：王晓娜龚秀莹赵苗苗刘清华李勇王坤尹崇高李洪利山东第二医科大学基础医学院临床病理系山东第二医科大学人体解剖学教研室山东第二医科大学医学研究实验中心山东第二医科大学护理学院

目的探讨miR-185-5p靶向负调控跨膜9超家族蛋白1(TM9SF1)对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响。方法在基因表达综合数据库(GEO)中下载数据集GSE51853，分析miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达情况。采用在线数据库miRTargetLink、miR... 详细信息

目的探讨miR-185-5p靶向负调控跨膜9超家族蛋白1(TM9SF1)对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响。方法在基因表达综合数据库(GEO)中下载数据集GSE51853，分析miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达情况。采用在线数据库miRTargetLink、miRTarbase和DIANA-microT-CD预测miR-185-5p靶向结合的蛋白，使用HADb网站下载自噬相关蛋白，将4个数据库所得结果取交集，通过StarBase数据库分析交集结果VEGFA和TM9SF1的生存曲线。分别将TM9SF13'UTR(WT)或TM9SF1 3'UTR(MUT)报告质粒与miR-185-5p对照质粒(CON)或miR-185-5p过表达质粒(over-miR-185-5p)共转染HEK-293T细胞，采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-185-5p与TM9SF1的结合位点及荧光素酶活性。采用Western blotting检测转染miR-185-5p过表达质粒后A549细胞中TM9SF1蛋白的表达情况。将A549细胞分为3组：(1)CON+NC组，转染miR-185-5p对照质粒和TM9SF1对照质粒；(2)over-miR-185-5p+NC组，转染miR-185-5p过表达质粒和TM9SF1对照质粒；(3)over-miR-185-5p+over-TM9SF1组，转染miR-185-5p过表达质粒和TM9SF1过表达质粒。采用EdU细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验验证miR-185-5p靶向结合TM9SF1对肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。分别采用stubRFPsensGFP-LC3自噬流检测慢病毒和JC-1实验检测肺腺癌细胞自噬流和线粒体膜电位(MMP)的改变。结果 GSE51853数据集中，miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达水平明显低于正常肺组织(P<0.01);qRT-PCR检测结果显示，miR-185-5p在肺腺癌细胞NCI-H1299、A549中的表达水平低于正常肺上皮细胞BEAS-2B(P<0.01)。在线数据库miRTargetLink、miRTarbase、DIANA-microT-CD和HADb预测结果显示，miR-185-5p可靶向调控自噬相关蛋白TM9SF1。双荧光素酶报告基因实验和Western blotting检测结果分别显示，miR-185-5p可直接与TM9SF1 mRNA的3'UTR区结合，过表达miR-185-5p后靶蛋白TM9SF1的表达水平降低(P<0.05)。EdU细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示，过表达miR-185-5p可抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移能力，过表达TM9SF1能够削弱miR-185-5p对肺腺癌细胞增殖、迁移能力的抑制作用(P<0.05)。stub RFP-sens GFP-LC3自噬流检测慢病毒结果显示，过表达mi R-185-5p后A549细胞中自噬流加快，而同时过表达mi R-185-5p和TM9SF1后A549细胞中自噬流减慢；JC-1实验结果显示，过表达miR-185-5p后A549细胞中MMP水平降低，同时过表达miR-185-5p和TM9SF1后A549细胞中MMP水平升高。结论 miR-185-5p可能通过靶向负调控TM9SF1的表达影响肺腺癌细胞的增殖、迁移和自噬能力。

关键词：肺腺癌 miR-185-5p TM9SF1 增殖迁移自噬

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我国原发性肝癌的流行病学特征及精准防控

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广西医科大学学报 2024年第11期41卷 1455-1463页

作者：曹广文海军军医大学海军医学系流行病学教研室

我国原发性肝癌（PLC）的分布特点是南方高于北方，沿海高于内地，农村高于城市；男女比例3:1。近20年来，PLC一直处于我国恶性肿瘤死亡原因的第二位，在中年人群（40～65岁）中年龄标化死亡率超过老年人群（65岁以上），在居65岁以下... 详细信息

我国原发性肝癌（PLC）的分布特点是南方高于北方，沿海高于内地，农村高于城市；男女比例3:1。近20年来，PLC一直处于我国恶性肿瘤死亡原因的第二位，在中年人群（40～65岁）中年龄标化死亡率超过老年人群（65岁以上），在居65岁以下男性人群癌症死因第一位。我国PLC中肝细胞癌（HCC）和肝内胆管癌（ICC）分别占93%和3%。任何导致慢性肝损伤的因素都是PLC的原因，是Ⅰ级预防的关键。我国HCC主要原因是乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染，占84.4%。约32%男性和9%女性HBV慢性携带者将在75岁之前死于HCC。此外，黄曲霉素暴露、肝吸虫感染、大量饮酒、代谢综合征和丙肝病毒感染等大大增加了PLC风险。乙型肝炎后HCC较其它原因导致的HCC早发10年，预后更差。界定PLC高危人群是Ⅱ级预防的关键。手术切除是早期PLC的有效治疗手段，但易术后复发，术后5年生存率约30%;ICC术后5年生存率<20%。抗HBV治疗不仅可显著降低HBV携带者HCC的发生风险，也能显著改善预后。再次手术、放疗、抗血管生成、免疫疗法、免疫和靶向联合治疗、有氧运动等均可明显提升PLC的Ⅰ～Ⅲ级预防的效果。

关键词：原发性肝癌乙型肝炎病毒危险因素病毒进化三级预防

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用于汉滩病毒固有免疫应答研究的永生化人脐静脉内皮细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1057-1065页

作者：张惠贾岩靳嘉岩叶伟程林峰雷迎峰张芳琳刘赫空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员三大队十一队陕西西安710032

目的通过导入人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因构建永生化人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-hTERT),探索永生化HUVEC对汉滩病毒(HTNV)感染效率及细胞固有免疫调控的影响,评价HUVEC-hTERT作为研究HTNV细胞模型的潜能。方法将hTERT基因克隆入慢病... 详细信息

目的通过导入人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因构建永生化人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-hTERT),探索永生化HUVEC对汉滩病毒(HTNV)感染效率及细胞固有免疫调控的影响,评价HUVEC-hTERT作为研究HTNV细胞模型的潜能。方法将hTERT基因克隆入慢病毒载体,构建pCDH-CMV-hTERT-EF1-puro质粒后包装慢病毒并感染HUVEC;嘌呤霉素筛选稳定表达hTERT基因的HUVEC命名为HUVEC-hTERT;利用显微镜观察和免疫荧光细胞化学染色法对HUVEC-hTERT的形态及内皮细胞标志分子人血管性假血友病因子(vWF)、CD31和血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)进行鉴定;利用免疫荧光法检测HTNV感染后核衣壳蛋白(NP)阳性细胞百分比,观察HTNV对HUVEC和HUVEC-hTERT的感染效率差异;利用实时定量PCR和Western blot法分别检测感染HTNV后,病毒基因组小片段(S)及其编码的NP在不同时间点的复制水平,验证HTNV在细胞中的增殖效率;利用实时定量PCR检测细胞β干扰素(IFN-β)、黏病毒抗性蛋白A(MxA)、MxB、干扰素诱导蛋白2(IFIT2)、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)及炎症因子环加氧酶2(COX2)、细胞间黏附因子(ICAM)和CC趋化因子配体5(CCL5)的mRNA水平并利用Western blot法检测IFIT2、IFITM3和MxA的蛋白水平,观察细胞固有免疫对HTNV的反应是否一致。利用Western blot、实时定量PCR检测感染HTNV后细胞上述分子的表达情况,观察永生化后细胞固有免疫对HTNV的反应是否一致。结果成功筛选出永生化细胞系HUVEC-hTERT,鉴定出其与HUVEC具有相同的表型并表达内皮细胞标志分子vWF、CD31、VE-cadherin;HUVEC-hTERT和HUVEC均可被HTNV感染且感染效率基本相同;在HTNV感染过程中,HUVEC-hTERT的固有免疫分子,如IFN-β、MxA、MxB、IFIT2、IFITM3、COX2、ICAM及CCL5的表达情况与HUVEC相同,表明HUVEC-hTERT固有免疫调控未发生改变。结论HUVEC-hTERT可在一定程度上代替原代HUVEC用于HTNV感染致固有免疫应答调控的研究。

关键词：永生化人脐静脉血管内皮细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT) 汉滩病毒固有免疫

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SP94和CD47双修饰外泌体靶向递送PLK1siRNA治疗肝癌

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海军军医大学学报 2023年第12期44卷 1421-1428页

作者：贺维刘梦梦张延琴潘鹭翔何磊顾锦涛高源周月媛张阔张英起郝强西北大学生命科学学院西安710069 空军军医大学药学系生物制药学教研室西安710032 空军军医大学西京医院核医学科西安710032

目的设计一种基于外泌体高效递送的方法,将治疗性核酸递送到肝癌组织治疗原发性肝癌。方法构建靶向肝癌的融合表达SP94和CD47的质粒,转染至HEK293T细胞后提取分离外泌体。通过透射电子显微镜及纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹法等方法对... 详细信息

目的设计一种基于外泌体高效递送的方法,将治疗性核酸递送到肝癌组织治疗原发性肝癌。方法构建靶向肝癌的融合表达SP94和CD47的质粒,转染至HEK293T细胞后提取分离外泌体。通过透射电子显微镜及纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹法等方法对外泌体进行鉴定。小鼠经尾静脉分别注射200μg DiD标记的未修饰外泌体和SP94修饰的外泌体,采用小动物活体成像仪检测并分析外泌体对肝癌组织的靶向作用。将未修饰外泌体和CD47修饰的外泌体分别与巨噬细胞RAW264.7、小鼠肝癌细胞Hepa1-6共孵育,验证细胞对修饰后外泌体的吞噬情况。通过电穿孔法将Polo样激酶1(PLK1)siRNA加载到不同修饰的外泌体中,再与Hepa1-6细胞共孵育,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。原发性肝癌模型小鼠经尾静脉注射加载PLK1 siRNA的修饰外泌体,系统研究并分析其对原发性肝癌的治疗效果。结果SP94修饰增强了外泌体对肝癌组织的靶向作用,CD47修饰减少了外泌体被巨噬细胞吞噬。SP94和CD47双修饰外泌体递送PLK1 siRNA促进了肝癌细胞凋亡。在原发性肝癌模型小鼠中,SP94和CD47双修饰外泌体加载PLK1 siRNA能有效抑制小鼠肝癌结节的生长,延长小鼠生存期。结论SP94和CD47双修饰外泌体可以高效靶向肝癌递送治疗性核酸PLK1siRNA,有效抑制肝癌的生长。

关键词：原发性肝癌外泌体靶向递送 SP94 CD47 Polo样激酶1 细胞凋亡

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SQLE敲除促进黑色素瘤肿瘤微环境CD8+T细胞浸润发挥抗肿瘤效应

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安徽医科大学学报 2024年第8期59卷 1315-1322页

作者：丁瑶刘雯廖亦然雷舜张妍陈叶梓龚奕黄启钊重庆大学附属肿瘤医院一期病房重庆400030 重庆医科大学免疫创新与转化研究院重庆400016 陆军军医大学基础医学院免疫学教研室重庆400038

目的探讨黑色素瘤细胞鲨烯环氧合酶(SQLE)基因敲除调控肿瘤微环境T细胞浸润影响机体抗肿瘤效应的作用及其分子机制。方法使用SQLE敲除的B16F10细胞系分别接种免疫完全和免疫缺陷小鼠,明确基因敲除对肿瘤细胞恶性表型的自主和非自主性调... 详细信息

目的探讨黑色素瘤细胞鲨烯环氧合酶(SQLE)基因敲除调控肿瘤微环境T细胞浸润影响机体抗肿瘤效应的作用及其分子机制。方法使用SQLE敲除的B16F10细胞系分别接种免疫完全和免疫缺陷小鼠,明确基因敲除对肿瘤细胞恶性表型的自主和非自主性调控,进一步使用抗体阻断、Luminex多因子检测和流式细胞等技术探索SQLE基因敲除对细胞因子/趋化因子分泌及免疫浸润的影响,结合生物信息学分析,验证SQLE表达与免疫浸润和临床预后的相关性。结果与免疫缺陷型小鼠相比,敲除SQLE显著抑制免疫完全小鼠肿瘤增殖,延长小鼠生存期。SQLE敲除诱导肿瘤细胞分泌细胞因子和趋化因子,增加肿瘤微环境CD8+T细胞浸润从而改善机体抗肿瘤效应。生物信息学分析提示SQLE及其对应的免疫浸润标志物与黑色素瘤患者临床预后明显相关。结论SQLE通过细胞因子和趋化因子调控肿瘤微环境参与机体抗肿瘤效应,有望成为新的肿瘤免疫药物靶点和疗效预测分子指标。

关键词：鲨烯环氧合酶黑色素瘤肿瘤微环境肿瘤免疫

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膜联蛋白A6促进神经祖细胞定向少突胶质细胞分化发育的机制研究

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第三军医大学学报 2021年第21期43卷 2343-2349页

作者：乐一帆范睿诚徐扬李红丽陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院妇产科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院教学实验中心重庆400038

目的探讨膜联蛋白A6(annexin A6,AnxA6)调控神经祖细胞(neural progenitor cells,NPCs)定向少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)分化的作用机制。方法构建AnxA6基因敲减(AnxA6敲减组)和过表达(AnxA6过表达组)病毒载体,以空载体作为对照组。运用qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色、活细胞钙成像等技术,对比检测AnxA6敲减与过表达后,体外培养的NPCs胞内Ca^(2+)的动态变化差异及其对定向分化转录因子Olig2(定向OLs)、Hes1、Ascl1等表达的影响,评估AnxA6对NPCs分化过程的影响。结果与对照组相比,AnxA6敲减组未见明显AnxA6蛋白条带(P<0.05),而AnxA6过表达组阳性蛋白条带光密度值显著升高(P<0.01);NPCs分化1 d后在静息状态下,AnxA6过表达组细胞可见胞内Ca2+自发振荡的频率和振幅均高于对照组和AnxA6敲减组;在NPCs分化3 d的细胞中,可见AnxA6过表达组Olig2 mRNA表达升高,而Hes1、Ascl1 mRNA则表达减少;Olig2荧光阳性细胞的百分率升高,CNPase荧光信号代表的髓鞘分布增大;同时突起形成相关细胞骨架因子Vimentin、Fyn mRNA的表达显著上调(P<0.05)。结论过表达AnxA6不仅能增强NPCs分化早期细胞内Ca^(2+)的动力变化,还促进OLs定向转录因子的表达,加快髓鞘形成。

关键词：膜联蛋白A6 神经祖细胞少突胶质细胞钙离子细胞分化髓鞘形成

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糖酵解酶的非代谢途径：内皮细胞功能调控新机制

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心脏杂志 2025年 221-226页

作者：何雅楠晏贤春王雨生孙嘉星中国人民解放军空军军医大学第一附属医院眼科全军眼科研究所中国人民解放军空军军医大学基础医学院学员六大队中国人民解放军空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室消化系肿瘤整合防治全国重点实验室中国人民解放军空军军医大学基础医学院神经生物学教研室

糖酵解是内皮细胞（endothelial cell, EC）中葡萄糖的主要代谢途径，能够为EC生命活动提供能量和所需物质，并参与组织器官发育与多种病理进程。近年研究发现，除代谢调控作用外，糖酵解酶具有“兼职蛋白（moonlighting proteins）”... 详细信息

糖酵解是内皮细胞（endothelial cell, EC）中葡萄糖的主要代谢途径，能够为EC生命活动提供能量和所需物质，并参与组织器官发育与多种病理进程。近年研究发现，除代谢调控作用外，糖酵解酶具有“兼职蛋白（moonlighting proteins）”的特点，可通过非代谢依赖途径参与维持线粒体膜稳定性、调控细胞周期、调节基因转录和信号转导等过程，成为耦联EC代谢与分子表达调控的重要新机制。本研究综述了糖酵解酶的非代谢功能在生理和病理环境下对EC生物学行为的调控作用和机制，以期进一步揭示EC功能调控机制，寻找相关血管性疾病的潜在治疗新靶点。

关键词：内皮细胞糖酵解酶非代谢途径兼职蛋白血管

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YAP/TAZ在皮肤创面修复中的作用

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生命科学 2021年第10期33卷 1246-1251页

作者：胡守一谢苏杰张佳怡李子键仵敏娟海军军医大学基础医学院三大队海军军医大学基础医学院六大队海军军医大学基础医学院组织胚胎学教研室

YAP/TAZ作为Hippo信号通路的主要下游效应分子,在众多信号通路调节中发挥重要作用。随着对YAP/TAZ的研究不断深入,其在创面修复中扮演的角色逐渐明晰。以皮肤为例,创面愈合过程是指正常组织遭受外力作用,组织内出现断裂或缺损后的愈合过... 详细信息

YAP/TAZ作为Hippo信号通路的主要下游效应分子,在众多信号通路调节中发挥重要作用。随着对YAP/TAZ的研究不断深入,其在创面修复中扮演的角色逐渐明晰。以皮肤为例,创面愈合过程是指正常组织遭受外力作用,组织内出现断裂或缺损后的愈合过程,包括炎症期、修复期以及重构期,表现为各种过程的协同作用。在炎症期,主要由巨噬细胞、粒细胞发挥作用,清除损伤组织碎片以及伤口处的微生物。随后愈合进入下一个阶段——修复期。在此阶段,YAP/TAZ有效地促进了基底层细胞和成纤维细胞的增殖、迁移,加快了缺损组织的填补。同时肉芽组织开始生长,YAP/TAZ加快了肉芽组织中血管以及神经的重建,为成纤维细胞、表皮细胞等进行生命活动提供必需的营养物质。最终,YAP/TAZ影响了成纤维细胞的分化方向,导致组织内基质重塑,恢复了皮肤组织稳态。该综述将介绍YAP/TAZ在皮肤损伤修复中的作用。

关键词： YAP/TAZ 创面修复皮肤

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高压氧对高原脱习服小鼠脑组织病理损伤及能量代谢的影响

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空军军医大学学报 2025年第1期46卷 94-99页

作者：秦天苟小元谭嘉懿李娅空军军医大学基础医学院学员队陕西西安710032 空军军医大学航空航天医学系航空航天卫生学教研室陕西西安710032

目的探讨高压氧(HBO)治疗对高原脱习服(HADA)模型小鼠脑组织病理损伤及能量代谢的影响。方法雄性昆明小鼠36只,采用随机数字表法分为3组(n=12):正常对照组(NC组)、HADA组、HBO组,按照HBO治疗时间又分为2个亚组(1、3 d组),每个亚组6只小... 详细信息

目的探讨高压氧(HBO)治疗对高原脱习服(HADA)模型小鼠脑组织病理损伤及能量代谢的影响。方法雄性昆明小鼠36只,采用随机数字表法分为3组(n=12):正常对照组(NC组)、HADA组、HBO组,按照HBO治疗时间又分为2个亚组(1、3 d组),每个亚组6只小鼠。使用小动物低压舱模拟海拔5000 m高原环境,舱内饲养14 d出舱后进行旷场实验评价小鼠HADA模型,八臂迷宫实验评价各组小鼠的行为学改变;出舱后连续进行3 d HBO治疗;小鼠麻醉灌注后取1、3 d脑组织观察病理学改变,采用HE染色观察脑组织皮层和海马的病理学改变,Nissl染色观察脑组织神经细胞损伤情况,免疫荧光染色观察脑组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)阳性细胞的表达情况。结果脱习服模型小鼠在旷场实验中的中心区域运动距离及停留时间、穿格次数、运动总距离均较NC组小鼠显著减少(P<0.05)。八臂迷宫实验结果显示HADA组小鼠工作记忆错误、参考记忆错误、错误总数较NC组明显增高(P<0.05);HBO治疗1 d后上述指标明显降低(P<0.05)。HE染色可见HADA组小鼠脑组织皮层及海马齿状回区神经细胞出现明显的变性坏死。Nissl染色可见HADA组小鼠脑组织Nissl体数量减少甚至溶解,并且形态异常;模型小鼠脑组织1 d的病理损伤较3 d严重,HBO治疗后上述的病理损伤明显减轻;与NC组相比,HADA组1、3 d脑组织中GLUT1阳性细胞的比率显著升高(P<0.05),HBO组GLUT1阳性细胞的比率较HADA组显著降低(P<0.05);3 d较1 d各组的GLUT1阳性细胞表达均显著增加(P<0.05)。结论模型小鼠较NC组小鼠焦虑样行为增加,提示模型制备成功;HADA后短期内脑组织内的葡萄糖利用仍然是以无氧糖酵解为主,HBO治疗可以较快地恢复脑组织的能量代谢稳态;同时,脱习服小鼠HBO治疗3 d效果较1 d明显,提示HBO治疗可促进脑细胞的功能恢复,有改善脑损伤和恢复能量代谢稳态的作用。

关键词：高原脱习服高压氧行为学实验病理损伤葡萄糖转运蛋白1

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三羧酸循环相关代谢物在肿瘤发生中的作用和机制研究进展

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医学综述 2023年第5期29卷 897-901页

作者：李子萌丁兰叶菁空军军医大学基础医学院病理学教研室西安710032

线粒体是重要的细胞器,参与细胞代谢的调控,决定细胞的命运。而三羧酸循环是产生细胞能量和生物合成的枢纽。多种癌症具有三羧酸循环相关酶的突变,如异柠檬酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和富马酸水合酶,导致三羧酸循环中间代谢物含量失调,并... 详细信息

线粒体是重要的细胞器,参与细胞代谢的调控,决定细胞的命运。而三羧酸循环是产生细胞能量和生物合成的枢纽。多种癌症具有三羧酸循环相关酶的突变,如异柠檬酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和富马酸水合酶,导致三羧酸循环中间代谢物含量失调,并可能与癌症的发生有关。三羧酸循环中间代谢物作为一种信号分子,通过调节细胞活动参与调控特定转录因子、调节表观遗传、参与染色质修饰,最终通过调控基因表达决定细胞功能,影响肿瘤的发生和发展过程。

关键词：肿瘤三羧酸循环线粒体肿瘤代谢表观遗传调节

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