检索结果-内蒙古大学图书馆

第九届全国免疫学学术大会

作者：陈涛涌俞宙杨明金曹雪涛医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所浙江大学免疫学研究所

研究背景:机体通过模式识别受体(PRR)识别微生物的多糖、蛋白和核苷酸等成分,产生炎症因子和Ⅰ型干扰素(IFNα/β),发挥抗细菌或抗病毒的免疫防御功能。TBK1(TANK binding kinase 1)及其同源分子IKKε可以活化IRF3、IRF7调节IFNα/β的... 详细信息

研究背景:机体通过模式识别受体(PRR)识别微生物的多糖、蛋白和核苷酸等成分,产生炎症因子和Ⅰ型干扰素(IFNα/β),发挥抗细菌或抗病毒的免疫防御功能。TBK1(TANK binding kinase 1)及其同源分子IKKε可以活化IRF3、IRF7调节IFNα/β的产生,在TLR、RIG-I以及dsDNA受体介导的抗感染天然免疫功能中发挥核心枢纽的作用。但是,TBK1活化的分子机制目前仍不清楚,尤其是蛋白激酶磷酸化修饰这一经典调控机制是否调节TBK1的激酶活性并调节Ⅰ型干扰素产生和抗病毒免疫反应还未有明确的结论。目的:探讨TBK1磷酸化修饰的关键位点并寻找磷酸化TBK1并活化TBK1的关键蛋白激酶。方法:首先采用蛋白质谱(MS)的方法分析TBK1在受到VSV病毒刺激后发生磷酸化修饰的潜在位点,然后借助于MS寻找能够与TBK1发生结合的蛋白激酶。采用点突变的方法突变MS发现的TBK1的磷酸化位点,结合IFNβ报告基因检测,验证TBK1发生功能性磷酸化修饰的位点;制备磷酸化位点特异性的单克隆抗体,验证VSV及HSV-1感染后TBK1发生磷酸化改变的位点。针对MS发现的蛋白激酶,使用siRNA的方法敲低其表达,通过q-PCR、ELISA和Western印迹的方法研究并寻找能够影响TBK1磷酸化并调节Ⅰ型干扰素产生的丝苏氨酸、酪氨酸蛋白激酶。借助于CRISPR-Cas9介导的基因组编辑技术删除相关蛋白激酶,验证其对TBK1磷酸化水平和激酶活性的影响。最后,使用体外激酶分析确认TBK1的上游蛋白激酶。结果:我们发现VSV刺激RAW264.7细胞后,TBK1在20余个丝/苏氨酸位点以及2个酪氨酸位点发生了磷酸化修饰。通过突变这些磷酸化位点结合报告基因分析,我们发现Ser93和Ryr179、Tyr185位点可能是TBK1的功能性磷酸化修饰位点。通过TBK1结合分子的MS分析,我们发现可能有20余种丝苏氨酸蛋白激酶和近10种酪氨酸蛋白激酶与TBK1的功能相关;通过siRNA敲低这些蛋白激酶,我们发现TAO3和c-Src可能是最为重要的促进TBK1磷酸化的上游蛋白激酶。TAO3敲低或者删除后,VSV和HSV-1诱导的TBK1的磷酸化(Ser72)显著下降,同时IFNα/β和水平显著降低,并且伴随TBK1激酶活性和IRF3磷酸化的降低;类似地敲低c-Src或删除c-Src的表达也可以显著抑制细胞抗病毒效应及TBK1的磷酸化和激酶活性。结论:磷酸化修饰是调节TBK1活性的重要调控机制,TAO3和c-Src可能是调节TBK1丝苏氨酸磷酸化以及酪氨酸磷酸化的关键激酶,这种经典的磷酸化调节模式可能在机体抗病毒过程中发挥关键的作用。

关键词： TBK1 磷酸化修饰蛋白激酶 I型干扰素抗病毒反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RasGRP3抑制巨噬细胞Toll样受体介导的炎症反应

RasGRP3抑制巨噬细胞Toll样受体介导的炎症反应

引用

第九届全国免疫学学术大会

作者：陈涛涌唐松青曹雪涛王建莉医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所浙江大学免疫学研究所

研究背景:Toll样受体(TLR)的活化是一把双刃剑,过度的活化则导致损伤性的炎症反应和继发的自身免疫病,因此TLR的信号传导必须受到严格的调控。小G蛋白(如Ras、Rap)是一种分子量较小的可以结合GTP/GDP并水解GTP的重要蛋白质家族,其与TLR... 详细信息

研究背景:Toll样受体(TLR)的活化是一把双刃剑,过度的活化则导致损伤性的炎症反应和继发的自身免疫病,因此TLR的信号传导必须受到严格的调控。小G蛋白(如Ras、Rap)是一种分子量较小的可以结合GTP/GDP并水解GTP的重要蛋白质家族,其与TLR信号传导的关系目前研究极少,尤其是小G蛋白分子的调控分子与TLR以及天然免疫的关系目前尚未见相关报导。目的:探讨Ras鸟苷酸释放蛋白(Ras guanine nucleotide-releasing protein,RasGRP)对于TLR信号传导的调控作用及其分子机制。方法:首先使用q-PCR等方法探讨巨噬细胞中RasGRP1-4分子在TLR活化后的表达水平和变化趋势,寻找巨噬细胞优势表达的RasGRP分子。采用siRNA敲低相应RasGRP分子的表达后,采用不同浓度TLR配体处理巨噬细胞,q-PCR和ELISA方法检测细胞因子的表达水平以明确RasGRP分子的效应,并通过Western印迹检测TLR信号通路的改变。通过转基因小鼠的方法,建立高表达RasGRP3和功能缺陷的RasGRP3的转基因小鼠,使用TLR配体模拟感染的模型、Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)模型以及DSS诱导的结肠炎模型探讨RasGRP3在炎症反应中的作用。最后,采用CRISPR-Cas9介导的基因组编辑技术删除RAW264 7细胞RasGRP3的表达,验证其对TLR的调节效应和机制。结果:我们发现RasGRP3是巨噬细胞中优势表达的RasGRP分子,敲低RasGRP3的表达显著促进TLR3/4/9诱导的炎症因子TNF、IL-1β、IL-6和iNOS的表达或分泌,抑制Rap1的活化,提示RasGRP3通过活化Rap1负向调节TLR的信号传导,抑制巨噬细胞炎症炎症的产生。在模拟感染的转基因小鼠模型里,我们发现过表达RasGRP3的小鼠在受到TLR3/4/9配体刺激后,IL-6的产生显著下降;在CIA模型里,过表达RasGRP3的小鼠前肢关节表现为显著减弱的软骨损伤和显著改善的临床症状;在DSS诱导结肠炎模型里,过表达RasGRP3的小鼠结肠中炎症细胞的浸润和结肠损伤也显著抑制。信号分子的研究发现,RasGRP3促进Akt的去磷酸化但抑制ERK1/2的活化。结论:RasGRP3是重要的负向调节TLR信号传导的分子,RasGRP3通过抑制ERK1/2的活化抑制炎症因子的产生,在多种炎症性疾病中发挥保护作用,可能是巨噬细胞负向调节TLR活化的重要"刹车"机制。

关键词： TLR RasGRP3 Rap1 炎症反应巨噬细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-181a对骨质疏松小鼠骨髓贴壁基质细胞体外增殖活性的影响

引用

第三军医大学学报 2015年第19期37卷 1966-1971页

作者：杨其芬邵秉一杨德琴郑玉琪重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科重庆401147 重庆医科大学附属口腔医院口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆401147 重庆医科大学附属口腔医院重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401147

目的探讨骨质疏松发生过程中miR-181a对骨髓贴壁基质细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖能力的影响。方法选用8周龄健康的20只雌性小鼠,并进行双侧卵巢切除(OVX组),建立雌性小鼠绝经后的骨质疏松模型。另选用同一周龄,体质量相近的2... 详细信息

目的探讨骨质疏松发生过程中miR-181a对骨髓贴壁基质细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖能力的影响。方法选用8周龄健康的20只雌性小鼠,并进行双侧卵巢切除(OVX组),建立雌性小鼠绝经后的骨质疏松模型。另选用同一周龄,体质量相近的20只健康小鼠行双侧卵巢附近脂肪组织部分切除,建立假手术组(Sham组)。2个月后Micro-CT检测2组小鼠松质骨中骨小梁微观结构参数及骨密度指标,MTT检测2组细胞增殖能力的差异。RT-PCR检测2组细胞中miR-181a的表达差异,上调(下调)细胞内miR-181a水平后MTT检测骨髓贴壁基质细胞增殖情况。结果 MicroCT显示Sham组与OVX组骨小梁微观结构参数及骨密度有显著差异(P<0.05)。MTT显示Sham组MSCs增殖能力高于OVX组(P<0.05)。RT-PCR显示Sham组中miR-181a较OVX组表达显著降低(P<0.05)。上调(下调)miR-181a后,MSCs增殖能力下降(上升)。成骨成脂能力检测发现OVX组MSCs成脂能力强于Sham组,而其成骨能力弱于Sham组(P<0.05)。结论雌激素缺乏所导致的骨质疏松症中,miR-181a高表达可抑制MSCs的增殖,可能是影响骨质疏松发病的重要因素之一。

关键词：雌激素增殖 miR-181a 骨髓贴壁基质细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

富集自体骨髓的自组装肽/脱钙骨基质复合物修复羊股骨临界骨缺损

富集自体骨髓的自组装肽/脱钙骨基质复合物修复羊股骨临界骨缺损

引用

第十一届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第七届全国组织工程与再生医学大会

作者：侯天勇李志强罗飞邓墨渊吴雪晖许建中第三军医大学附属西南医院骨科全军矫形外科中心国家和地方联合重点组织工程实验室重庆400038 重庆市组织工程实验室重庆400038

目的：研究在选择性细胞滞留(selective cell retention,SCR)技术下,用纳米自组装肽RADA16-Ⅰ修饰脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix,DBM),然后富集构建自体骨髓复合物(SAP/DBM),验证修复重建羊股骨临界骨缺损的效果. 方法：通... 详细信息

目的：研究在选择性细胞滞留(selective cell retention,SCR)技术下,用纳米自组装肽RADA16-Ⅰ修饰脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix,DBM),然后富集构建自体骨髓复合物(SAP/DBM),验证修复重建羊股骨临界骨缺损的效果. 方法：通过纳米肽RADA16-Ⅰ的自组装特性修饰脱钙骨基质,形成复合支架SAP/DBM,体外通过激光共聚焦显微镜观察此复合支架对羊骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的形态变化,通过定量聚合酶链反应(PCR)检测成骨基因的表达水平.利用选择性细胞滞留技术,将骨髓中利于成骨的细胞及生长因子富集于SAP/DBM,形成复合物,体内通过影像学和组织学评价此复合物对羊股骨中段2cm临界骨缺损的修复重建效果. 结果：自组装肽可在DBM的大网孔内形成三维纳米网状纤维.MSCs在SAP/DBM复合材料上增殖更快,细胞形态铺展更好,相关成骨基因如碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)及成骨转录因子2(Runx2)的表达显著高于DBM对照组(P＜0.05).体内的成骨评价中,对比富集有自体骨髓的DBM材料,SAP/DBM复合物在羊骨缺损修复区形成的新生骨骨量显著提高(P＜0.05). 结论：本研究不仅为组织工程骨的构建提供了一种新的思路,而且还为临床临界骨缺损的修复重建提供了一种快速、简便、高效的方法.

关键词：股骨临界骨缺损肽脱钙骨自体骨髓复合物修复效果

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RACK1对食管鳞癌细胞侵袭转移能力的抑制作用

引用

现代肿瘤医学 2014年第12期22卷 2792-2796页

作者：王小娟徐光辉薛琳刘丽娟王飙落梁树辉丁杰第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的:探讨RACK1表达水平与食管鳞状细胞癌不同转移潜能细胞侵袭转移能力的关系。方法:Transwell实验检测食管鳞癌EC9706-H、EC9706-L和EC109-H、EC109-L细胞的转移潜能;利用RT-PCR和Western blot方法,检测食管鳞癌高低转移细胞系EC9706-... 详细信息

目的:探讨RACK1表达水平与食管鳞状细胞癌不同转移潜能细胞侵袭转移能力的关系。方法:Transwell实验检测食管鳞癌EC9706-H、EC9706-L和EC109-H、EC109-L细胞的转移潜能;利用RT-PCR和Western blot方法,检测食管鳞癌高低转移细胞系EC9706-H、EC9706-L和EC109-H、EC109-L中RACK1的mRNA和蛋白表达水平。利用慢病毒转染技术上调RACK1低表达细胞中RACK1的表达后,采用Transwell实验检测其侵袭和迁移能力的变化。结果:EC9706-H细胞和EC109-H细胞的体外侵袭和迁移能力显著高于EC9706-L和EC109-L细胞系。RT-PCR和Western blot实验结果显示,RACK1在EC9706-H细胞和EC109-H细胞中呈低表达;而在EC9706-L细胞和EC109-L细胞中呈高表达。通过慢病毒转染技术上调EC9706-H和EC109-H细胞系中RACK1的表达,二者的侵袭转移能力明显降低。结论:RACK1表达水平与食管鳞癌细胞的侵袭转移能力负相关,过表达RACK1能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭转移能力。这提示,RACK1在食管鳞癌的侵袭转移中发挥重要作用,有可能成为其诊断、治疗及预后评估的新靶点。

关键词：食管鳞癌 RACK1 侵袭转移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

AR基因CAG、GGN重复序列多态性与复发性自然流产的关联性研究

AR基因CAG、GGN重复序列多态性与复发性自然流产的关联性研究

引用

第九届全国遗传病诊断与产前诊断学术交流会暨产前诊断和医学遗传学新技术研讨会

作者：张钏党洁徐浩郭孟境裴利国闫有圣郝胜菊陆宏霍正浩甘肃省妇幼保健院医学遗传学中心宁夏医科大学基础医学院遗传与细胞生物学系、生育力保持教育部重点实验室、宁夏生殖与遗传重点实验室第四军医大学口腔医学院

目的:本研究对雄激素受体(androgen receptor,AR)基因CAG和GGN两个重复序列多态性位点进行检测,探讨AR基因这两个多态性位点与宁夏地区复发性自然流产(Recurrent SpontaneousAbortions,RSA)的关联性。方法:按照知情同意原则,选择2006年... 详细信息

目的:本研究对雄激素受体(androgen receptor,AR)基因CAG和GGN两个重复序列多态性位点进行检测,探讨AR基因这两个多态性位点与宁夏地区复发性自然流产(Recurrent SpontaneousAbortions,RSA)的关联性。方法:按照知情同意原则,选择2006年1月至2009年7月在宁夏生殖与遗传实验室进行染色体检查的患

关键词：雄激素受体基因 CAG GGN RSA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大蒜素对TGF-β_1诱导的胰腺癌细胞EMT的抑制作用及其机制

引用

山东医药 2016年第41期56卷 18-21页

作者：马笛贺川魏媛马新宇张忠良巩平石河子大学医学院第一附属医院新疆石河子832000

目的探讨大蒜素对TGF-β1诱导的胰腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的抑制作用及机制。方法常规培养胰腺癌细胞株PANC-1细胞,取对数生长期细胞,随机分为大蒜素+TGF-β1组、大蒜素组、TGF-β1组及空白对照组,前三组分别以TGF-β110 ng/m L+... 详细信息

目的探讨大蒜素对TGF-β1诱导的胰腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的抑制作用及机制。方法常规培养胰腺癌细胞株PANC-1细胞,取对数生长期细胞,随机分为大蒜素+TGF-β1组、大蒜素组、TGF-β1组及空白对照组,前三组分别以TGF-β110 ng/m L+大蒜素5μg/m L、大蒜素5μg/m L、TGF-β110 ng/m L处理PANC-1细胞,空白对照组不予干预。应用MTT法检测细胞增殖情况;划痕试验、Transwell小室试验测定胰腺癌细胞的迁移、侵袭能力。RT-PCR法检测各组E-Cadherin、Viminten及NF-κB表达。结果 MTT结果显示大蒜素干预后胰腺癌细胞增殖受到抑制,24 h与48 h的IC50分别为69.44、100.90μmol/L,呈时间和剂量依赖性;划痕试验显示空白对照组、大蒜素+TGF-β_1组、大蒜素组及TGF-β1组8 h迁移率分别为0.56±0.11、0.10±0.07、0.09±0.05、0.61±0.23;24 h迁移率分别为1.00±0.00、0.74±0.20、0.40±0.05、1.00±0.00。Transwell小室试验显示,空白对照组、大蒜素+TGF-β1组、大蒜素组及TGF-β1组的侵袭率分别为2.15±0.04、1.98±0.14、1.01±0.01、2.93±0.02,大蒜素组与其他三组比较差异有统计学意义(P均<0.05);RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin表达明显下调(P均<0.05),Vimentin表达则明显上调(P均<0.05)。与TGF-β1组相比,大蒜素+TGF-β1组及大蒜素组E-candherin表达上调,Vimentin表达下调;同时,NF-κB的表达亦明显下调(P均<0.05)。结论大蒜素能阻断TGF-β1诱导的胰腺癌EMT效应,其可能通过抑制NF-κB信号通路抑制胰腺癌细胞发生EMT。

关键词：胰腺癌大蒜素上皮间质转化核因子-κB

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠胚胎成纤维细胞对体外培养肺泡上皮Ⅱ型细胞干性的维持作用

引用

重庆医科大学学报 2014年第11期39卷 1613-1616页

作者：余静曾灵李勇邓婷婷蒋建新王继红重庆医科大学实验教学中心生物化学与分子生物学实验室、分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤、复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042

目的：探讨小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblast cell,MEF）作为滋养细胞对体外培养肺泡上皮Ⅱ型细胞（alveolar epithelial typeⅡcells,ATⅡ）干性的维持作用。方法：通过分散酶（Dispase）、分散酶/胶原酶（colleganse/d... 详细信息

目的：探讨小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblast cell,MEF）作为滋养细胞对体外培养肺泡上皮Ⅱ型细胞（alveolar epithelial typeⅡcells,ATⅡ）干性的维持作用。方法：通过分散酶（Dispase）、分散酶/胶原酶（colleganse/disapase）和脱氧核糖核酸酶（DNaseⅠ）联合消化小鼠肺组织,制备肺单细胞悬液,通过免疫黏附法纯化ATⅡ。高糖DMEM添加10%FBS、双抗（青霉素20 U/ml,链霉素20 U/ml）;将传代后的ATⅡ接种至丝裂霉素处理的MEF（inactivated MEF,i MEF）培养,并以肺泡表面活性蛋白C（surfactant protein C,SPC）和水通道蛋白5（aquaporins 5,AQP5）为标记蛋白进行鉴定。结果：平均每只成年小鼠可得到总有核细胞数为（1.7-2.0）×10^7。ATⅡ细胞传代接种于滋养细胞前3代都能维持在未分化状态,第4代分化成为肺泡上皮Ⅰ型细胞（alveolar epithelial typeⅠcells,ATⅠ）;而传代后没有接种在滋养细胞上的ATⅡ细胞在第1代就分化成ATⅠ细胞。结论：小鼠胚胎成纤维细胞在一定时段能够维持ATⅡ的干性。

关键词：滋养细胞肺泡上皮Ⅱ型细胞细胞培养

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

亦正亦邪——T淋巴细胞在脊髓损伤修复中的作用

引用

医学争鸣 2013年第1期4卷 42-44页

作者：赵湘辉郑晶晶程鹏王键鞠躬第四军医大学基础医学院神经生物学教研室陕西西安710032

脊髓损伤作为一种高致残率的疾病,一直倍受相关研究者的广泛关注。我们将近年来有关免疫反应,主要是T淋巴细胞在脊髓损伤修复中的作用进行了文献回顾。从两种针锋相对的观点入手,结合我们自己的研究,列举了T淋巴细胞在脊髓损伤修复中的... 详细信息

脊髓损伤作为一种高致残率的疾病,一直倍受相关研究者的广泛关注。我们将近年来有关免疫反应,主要是T淋巴细胞在脊髓损伤修复中的作用进行了文献回顾。从两种针锋相对的观点入手,结合我们自己的研究,列举了T淋巴细胞在脊髓损伤修复中的主要作用,并提出可能存在的新研究方向。

关键词：脊髓损伤 T淋巴细胞治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

下调IKKα表达能够抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力

引用

现代肿瘤医学 2014年第5期22卷 977-980页

作者：尚鑫刘剑张琳夏丽敏吴开春第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

目的:研究降低IKKα的表达对人胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Western blot检测胃癌细胞系中IKKα蛋白的表达水平,选择IKKα表达较高的细胞系MKN28,转染下调IKKα的慢病毒,建立稳定转染细胞株(标记为MKN28-LV-shcontrol和MKN2... 详细信息

目的:研究降低IKKα的表达对人胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Western blot检测胃癌细胞系中IKKα蛋白的表达水平,选择IKKα表达较高的细胞系MKN28,转染下调IKKα的慢病毒,建立稳定转染细胞株(标记为MKN28-LV-shcontrol和MKN28-LV-shIKKα),并利用Western blot、RT-PCR验证病毒转染效果。采用Transwell实验和划痕实验检测低表达IKKα对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:Western blot结果显示胃癌细胞系中MKN28细胞IKKα蛋白表达水平相对较高,转染慢病毒干扰载体成功后利用Western blot及RT-PCR实验证实实验组MKN28-LV-shIKKα较对照组MKN28-LV-shcontrol中IKKα蛋白及mRNA水平明显降低。利用Transwell及划痕实验证实实验组MKN28-LV-shIKKα较对照组MKN28-LV-shcontrol细胞迁移及侵袭能力明显降低。结论:IKKα与胃癌的迁移及侵袭密切相关,降低IKKα的表达水平能显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力,提示IKKα在胃癌的转移中可能发挥着重要作用。

关键词：胃癌 IKKα 侵袭转移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：