检索结果-内蒙古大学图书馆

分泌性的糖蛋白Wnt5a对永生化小鼠黑素细胞系melan-a细胞产黑素的影响

现代生物医学进展 2013年第35期13卷 6848-6851,6936页

作者：李焱张杰武赟杨劲杨珂郭海英第三军医大学学员旅五队重庆400038 第三军医大学基础部细胞生物学教研室重庆400038

目的:探讨分泌性的糖蛋白Wnt5a对永生化小鼠黑素细胞系melan-a细胞产黑素的影响。方法:用带有Wnt5a基因的腺病毒及对照组腺病毒作为载体感染体外培养的melan-a黑素细胞;MTT法测定细胞增殖率;体外氧化DOPA反应法测定酪氨酸酶活性;NaOH法... 详细信息

目的:探讨分泌性的糖蛋白Wnt5a对永生化小鼠黑素细胞系melan-a细胞产黑素的影响。方法:用带有Wnt5a基因的腺病毒及对照组腺病毒作为载体感染体外培养的melan-a黑素细胞;MTT法测定细胞增殖率;体外氧化DOPA反应法测定酪氨酸酶活性;NaOH法测定黑素含量;RT-PCR方法检测melan-a细胞中MITF的表达。结果:与AdGFP对照组相比,AdWnt5a处理组melan-a细胞的增殖率明显降低(P<0.01);DOPA反应法和NaOH法检测结果发现,Wnt5a能显著降低melan-a细胞内酪氨酸酶活性(P<0.01)以及黑素含量(P<0.05);RT-PCR结果表明,Wnt5a显著下调melan-a细胞内MITF的表达(P<0.01)。结论:以上结果显示,AdWnt5a处理组melan-a细胞的增殖率、酪氨酸酶活性、产黑素的量及MITF的表达均有所下降。实验结果提示,Wnt5a能有效抑制melan-a细胞产黑素的能力,并且其作用机制可能与下调MITF的表达有关。

关键词： Wnt5a 黑素细胞黑素

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人Sox10基因启动子区高甲基化的预测和验证

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第三军医大学学报 2013年第20期35卷 2168-2171页

作者：李文英余鸿陈兴书肖岚第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 自贡市第三人民医院病理科四川643020 泸州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室四川646000

目的运用生物信息学方法预测人Sox10基因启动子区甲基化情况并进行实验验证。方法从GenBank获取人Sox10基因序列,利用Methyprimer 11.0软件、Li lab、CpG Island Searcher预测其启动子区CpG岛。进一步运用甲基化特异性PCR(methylation s... 详细信息

目的运用生物信息学方法预测人Sox10基因启动子区甲基化情况并进行实验验证。方法从GenBank获取人Sox10基因序列,利用Methyprimer 11.0软件、Li lab、CpG Island Searcher预测其启动子区CpG岛。进一步运用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)和重亚硫酸盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)方法检测人Sox10基因启动子区CpG岛在多形性胶质母细胞瘤和瘤周组织中的甲基化情况。结果经过生物信息学分析发现,人Sox10基因启动子区存在2个CpG岛,分别为165(1 241～1 405)bp和105(1 478～1 582)bp。针对这两个CpG岛设计引物行MSP和BSP实验,研究发现,在人多形性胶质母细胞瘤和瘤周组织中Sox10基因启动子区CpG岛均出现部分甲基化,其中在多形性胶质母细胞瘤中的甲基化率为90.5%,在瘤周组织中的甲基化率为28.5%。结论本研究证实了人Sox10基因启动子区CpG岛在多形性胶质母细胞瘤中出现高甲基化,提示其表达下调可能受甲基化调节。

关键词：人Sox10基因启动子区甲基化生物信息学分析 MSP BSP 人多形性胶质母细胞瘤

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流体剪切应力对人骨肉瘤MG-63细胞基因表达的影响

流体剪切应力对人骨肉瘤MG-63细胞基因表达的影响

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第十四届国际骨质疏松研讨会暨第十二届国际骨矿研究学术会议

作者：张连昌张舒曹新生第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室

目的:近期研究表明,骨骼细胞所受到力学刺激因素在骨的生长和吸收过程中起着十分重要的作用。骨细胞如成骨细胞、破骨细胞和骨衬细胞都是力学敏感细胞。力学敏感细胞可以感受力学信号刺激,将其转化为特定的生物化学信号,并通过细胞间隙... 详细信息

目的:近期研究表明,骨骼细胞所受到力学刺激因素在骨的生长和吸收过程中起着十分重要的作用。骨细胞如成骨细胞、破骨细胞和骨衬细胞都是力学敏感细胞。力学敏感细胞可以感受力学信号刺激,将其转化为特定的生物化学信号,并通过细胞间隙连接或者旁分泌作用传导至相邻骨骼细胞,进而导致骨的结构发生改变,这就是骨骼细胞的力学信号转导功能。然而,骨骼细胞的力学信号转导功能的分子机制尚未阐明。因此,我们对人骨肉瘤MG-63细胞的基因表达谱进行了芯片分析。方法:MG-63细胞常规培养72 h。随后,将MG-63细胞随机分为流体剪切应力(FSS)组和对照组。流体剪切应力组置于流体剪切系统中进行实验,FSS为1.5 Pa,作用时间为60 min。同时取对照组细胞置于含培养基的培养皿中,作为无FSS作用组。暴露结束后提取总RNA,并用Affymetrix基因芯片进行芯片分析,最后对两组间基因表达差异进行统计学分析。结果:与对照组相比,剪切应力组中有数千个基因的表达变化具有统计学意义。根据基因功能分析,我们发现大部分上调基因与细胞增殖、分化和蛋白合成相关;大部分下调基因与细胞的凋亡相关。结论:已有研究证明,流体剪切应力可以刺激成骨细胞的增殖。本研究所发现的剪切应力作用后差异表达的基因将有助于深入探讨骨骼细胞力学信号转导功能的机制。这些基因在骨骼细胞的力学信号转导功能中的确切作用还需要进一步的研究。

关键词：流体剪切应力 MG-63细胞基因芯片

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用于转换国际标准的BCR-ABL（P210）转录本水平的转换系数多中心确认研究

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中华血液学杂志 2014年第2期35卷 134-137页

作者：秦亚溱林振兴岑建农李小青李庆华程辉耿素霞王云贵马道新乔纯李金兰李玲娣黄晓军北京大学人民医院、北京大学血液病研究所 100044 福建医科大学附属协和医院、福建省血液病研究所苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所华中科技大学同济医学院附属协和医院中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院第二军医大学附属长海医院广东省人民医院浙江大学医学院附属第一医院山东大学齐鲁医院南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院

目的确认用于转换国际标准的慢性髓性白血病的BCR-ABL（P2lO）转录本水平的转换系数（CF）的有效性。方法2012年澳大利亚医学与兽医科学研究所（IMVS）国】际参比实验室寄送2批各30份RNA样本至北京大学人民医院（简称人民医院），通过双... 详细信息

目的确认用于转换国际标准的慢性髓性白血病的BCR-ABL（P2lO）转录本水平的转换系数（CF）的有效性。方法2012年澳大利亚医学与兽医科学研究所（IMVS）国】际参比实验室寄送2批各30份RNA样本至北京大学人民医院（简称人民医院），通过双方BCR-ABL（P21O）转录本水平检测值的比较，人民医院计算并确认用于转换国际标准的***（P210）转录本水平的CF。2013年人民医院统一制备用于确认9家医院之前已计算出的CF的比对样品，即用新鲜的BCR-ABL（一）患者骨髓有核细胞稀释BCR-ABL（P210）（＋）细胞制备出22种不同BCR-ABL水平的样本，每种样本各制备10份平行样本，加入TRIzol中。每家医院各检测1套样品。各医院的检测值分别与人民医院的检测值比较，进行Bland-Altman一致性分析。结果通过IMVS的确认，人民医院成功获得有效的CF，偏倚为1．1倍，95％一致性界限为-4．7～4．9倍。9家医院中，6家医院达到偏倚≤±1．4倍并且95％一致性界限介于士6．0倍之间的标准，说明已计算出的CF有效。结论CF的确认检验了***（P210）转录本水平检测的稳定性，对获得有效的转换国际标准的CF是必要的。

关键词：融合蛋白质类 BCR ABL 实时聚合酶链反应转换系数确认

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神经病理性疼痛中细胞外三磷酸腺苷来源的研究进展

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医学研究生学报 2013年第9期26卷 988-992页

作者：崔剑阮怀珍第三军医大学基础部神经生物学教研室(重庆市神经科学重点实验室) 重庆医学博士400038

神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)是外周神经损伤或炎症后产生的一种以顽固性疼痛为主要症状的临床顽疾,其发生机制不清。三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)致痛理论是目前国内外关于NPP研究的热点之一,其基本观点认为异常... 详细信息

神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)是外周神经损伤或炎症后产生的一种以顽固性疼痛为主要症状的临床顽疾,其发生机制不清。三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)致痛理论是目前国内外关于NPP研究的热点之一,其基本观点认为异常增多的细胞外ATP(extracellular adenosine triphosphate,excATP)作为神经递质或调质,通过细胞膜上嘌呤能受体的介导引起胶质细胞激活并传递疼痛信号。但是关于excATP来源及其扩散的过程仍未能给出清晰的思路,文中就NPP产生和维持过程中excATP的产生及代谢改变进行综述。

关键词：神经病理性疼痛三磷酸腺苷嘌呤能受体

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Wnt3诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1166-1170页

作者：胡代曦张锡峰张超钟沁冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定... 详细信息

目的探讨wnt3对小鼠肝前体细胞(14-19)发生上皮-间质转化的影响。方法分别将空载体Ad-GFP和表达wnt3的腺病毒Ad-GFP-wnt3转入小鼠肝前体细胞中,显微镜下观察细胞形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察14-19细胞迁移能力。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析分别检测14-19细胞中上皮标记物和间质标记物的表达改变。结果显微镜下可见高表达wnt3的14-19细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验和细胞迁移实验结果显示,高表达wnt3的14-19细胞迁移能力明显提高,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,间质标记物N-cadherin、vimentin和twist1的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标记物E-cadherin的mRNA水平和蛋白水平表达下调,与空载体转染细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Wnt3能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。

关键词： wnt3 肝前体细胞上皮-间质转化肝硬化

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MicroRNA-181通过靶向组蛋白精氨酸甲基化酶CARM1调控人胚胎干细胞多能性

MicroRNA-181通过靶向组蛋白精氨酸甲基化酶CARM1调控人胚胎干细...

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中国解剖学会2013年年会

作者：王越许震宇蒋俊锋徐辰刘厚奇第二军医大学组织胚胎学教研室

人胚胎干细胞(hESC)对于再生医学具有重要的意义,其多能性维持机制是当前科学界普遍关注的焦点。目前认为胚胎干细胞多能性受到染色质表观遗传修饰、核心转录因子Oct4、Nanog和Sox2等,非编码RNA介导的转录后调控等多重机制的控制,但对... 详细信息

人胚胎干细胞(hESC)对于再生医学具有重要的意义,其多能性维持机制是当前科学界普遍关注的焦点。目前认为胚胎干细胞多能性受到染色质表观遗传修饰、核心转录因子Oct4、Nanog和Sox2等,非编码RNA介导的转录后调控等多重机制的控制,但对于这些不同层次机制之间发生相互调控作用的机制尚未完全阐明。我们研究发现了一种共刺激因子相关精

关键词：多能性人胚胎干细胞 CARM1 MicroRNA-181 组蛋白精氨酸甲基化

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多样性、多态性与争鸣

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医学争鸣 2013年第3期4卷 F0002-F0002页

作者：刘宏颀第四军医大学基础医学院细胞生物学教研室陕西西安710032

多样性和多态性是近些年来出现频次较高的一个热词，尤其在生命科学领域。多样性（diversity）是指同一属性事物或现象的不同类型或式样。多态件（polymorphism）是指同一属性事物或现象的多种存在形态或状态。两个词汇的差别在于，前... 详细信息

多样性和多态性是近些年来出现频次较高的一个热词，尤其在生命科学领域。多样性（diversity）是指同一属性事物或现象的不同类型或式样。多态件（polymorphism）是指同一属性事物或现象的多种存在形态或状态。两个词汇的差别在于，前者强调类型差异，后者突出存在状态。

关键词：多样性多态性存在状态生命科学存在形态同类型事物

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mmu-miR-294调控MMP3靶基因对LLC细胞侵袭迁移的影响

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第三军医大学学报 2013年第12期35卷 1200-1204页

作者：金俊余孙建国张岸梅王欣欣廖荣霞邱钧马虎陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所重庆400037 第三军医大学基础医学部医学英语教研室重庆400038 解放军第174医院肿瘤科厦门361003 遵义医学院附属医院肿瘤科贵州遵义563003

目的预测并验证小鼠mmu-miR-294调控的靶基因,探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能。方法生物信息学预测mmu-miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶(MMP3),双荧光素酶检测验证mmu-miR-294调控MMP3的真实性;脂质体2000介导转染mmu-miR-294... 详细信息

目的预测并验证小鼠mmu-miR-294调控的靶基因,探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能。方法生物信息学预测mmu-miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶(MMP3),双荧光素酶检测验证mmu-miR-294调控MMP3的真实性;脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物进入Lewis(LLC)细胞株,通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变。结果重组质粒经XbaⅠ单酶切能获得约5 000 bp和100 bp的酶切片段,阳性克隆测序,双荧光素酶报告基因检测证明合成寡核苷酸链序列插入正确;脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物,过表达实验组MMP3蛋白水平较对照组明显降低。转染mmu-miR-294模拟物后LLC细胞的侵袭迁移能力显著降低(P<0.01)。结论低表达mmu-miR-294有助于维持LLC的侵袭转移特性,增加其表达水平可以有效抑制LLC的侵袭迁移能力。mmu-miR-294可能通过调控其靶基因MMP3表达而发挥功能。

关键词： mmu—miR-294 肺癌干细胞肺癌 MMP3

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人多能性干细胞的调控机制及临床应用

人多能性干细胞的调控机制及临床应用

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中国解剖学会2013年年会

作者：刘厚奇第二军医大学组织胚胎学教研室

人多能性干细胞是一大类在体内外均具有良好的自我更新和多向分化的能力的细胞,因而在发育生物学和再生医学领域具有重要的意义。我们的研究主要聚焦于两大类人多能性干细胞:人ESC和人MAPC。在人ESC的自我更新和多能性维持机制方面,我... 详细信息

人多能性干细胞是一大类在体内外均具有良好的自我更新和多向分化的能力的细胞,因而在发育生物学和再生医学领域具有重要的意义。我们的研究主要聚焦于两大类人多能性干细胞:人ESC和人MAPC。在人ESC的自我更新和多能性维持机制方面,我们发现了非编码RNA,包括长链非编码RNA(lincRNA)和microRNA,可以协调参与人胚胎干细胞的多能性调控机制。miR-181可以靶向调控多能性相关的组蛋白精氨酸甲基转移酶1

关键词：多能性干细胞 ESC RNA

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