检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第1期25卷 25-28页

作者：曹毅张冬梅李树玲潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的:通过转染含有绿色荧光蛋白(GFP)和PbfMSP1片段的重组质粒,建立伯氏疟原虫转染技术和表达恶性疟原虫MSP-1 19 000片段(PfMSP1-19)的转基因伯氏疟原虫.方法:构建重组转染质粒PyrFlu/PbfMSP1.伯氏疟原虫ANKA株经培养和分离后用电转化... 详细信息

目的:通过转染含有绿色荧光蛋白(GFP)和PbfMSP1片段的重组质粒,建立伯氏疟原虫转染技术和表达恶性疟原虫MSP-1 19 000片段(PfMSP1-19)的转基因伯氏疟原虫.方法:构建重组转染质粒PyrFlu/PbfMSP1.伯氏疟原虫ANKA株经培养和分离后用电转化方法转入重组转染质粒,药物筛选转化原虫后进行PCR检测,并于荧光显微镜下检测报告基因GFP的表达.结果:构建了重组转染质粒PyrFlu/PbfMSP1.荧光显微镜下观察到呈绿色荧光的伯氏疟原虫.PCR检测显示转染伯氏疟原虫存在GFP和PbfMSP1基因.结论:重组质粒已成功转染伯氏疟原虫并表达了GFP报告基因,建立了伯氏疟原虫转染技术.

关键词：伯氏疟原虫转基因绿色荧光蛋白

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在减毒伤寒杆菌CVD908疫苗株中四环素诱导表达恶性疟原虫MSP1-31片段基因

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第二军医大学学报 2002年第1期23卷 51-53页

作者：钱锋潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :用含 PL tet O启动子的 p ZE11质粒在减毒伤寒杆菌 CVD90 8疫苗株中表达恶性疟原虫 MSP1- 31片段基因。方法 :构建受四环素诱导调控的重组质粒 p ZE11/ MSP1- 31,将该重组质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌 CVD90 8/ tet R... 详细信息

目的 :用含 PL tet O启动子的 p ZE11质粒在减毒伤寒杆菌 CVD90 8疫苗株中表达恶性疟原虫 MSP1- 31片段基因。方法 :构建受四环素诱导调控的重组质粒 p ZE11/ MSP1- 31,将该重组质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌 CVD90 8/ tet R疫苗株中 ,用免疫印迹反应检测 MSP1- 31在 CVD90 8/ tet R株中的四环素诱导表达。结果 :构建了重组的 p ZE11/ MSP1- 31质粒 ,免疫印迹反应显示该 MSP1- 31基因在 CVD90 8/ tet R株中得到有效表达 ,且依赖于四环素的存在。结论 :成功地构建了由四环素诱导的、表达恶性疟原虫 MSP1- 31的减毒伤寒杆菌疫苗株。

关键词：伤寒沙门氏菌恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-1 四环素基因表达 PLteto启动子

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重症脑型疟疾和促炎细胞因子

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 501-503页

作者：宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

在全世界感染性疾病中，疟疾发病率仅次于急性肺炎球菌呼吸道感染（3.5%）和结核病（2.8%），居第三位(2.3%)。全世界99个国家和地区的21.7亿人（占世界人口的40%以上）生活在不同程度的疟疾威胁之中。估计全世界每年有3 ～5亿疟疾临床... 详细信息

在全世界感染性疾病中，疟疾发病率仅次于急性肺炎球菌呼吸道感染（3.5%）和结核病（2.8%），居第三位(2.3%)。全世界99个国家和地区的21.7亿人（占世界人口的40%以上）生活在不同程度的疟疾威胁之中。估计全世界每年有3 ～5亿疟疾临床患者，每年有约150～270万患者死于疟疾。非洲每年约有100万人因疟疾死亡，其中大多数是婴儿和5岁以下儿童。在感染人的恶性疟原虫(Plasmodium falciparum) 、间日疟原虫（P. vivax）、三日疟原虫(P. malariae)和卵形疟原虫（P. ovale）中，恶性疟原虫对人的生命威胁最大。恶性疟原虫感染可迅速地引起多个重要脏器功能障碍，发生重症恶性疟疾。重症恶性疟疾患者的预后很差，即使用有效的抗疟药物和合理的临床治疗，病死率仍可达15%～2 0%。疟疾死亡患者几乎都是恶性疟原虫引起的重症恶性疟疾。重症恶性疟疾的临床表现很复杂，常见的有全身衰竭、意识障碍、呼吸窘迫、多发性惊厥、循环性虚脱、肺水肿、异常出血、黄疸、血红蛋白尿、恶性贫血等。在不同疟疾流行区和不同的人群中，重症恶性疟疾的高发人群和临床表现都很不同。脑型疟疾在所有的年龄组都可发生。

关键词：脑型疟疾炎性细胞因子临床表现红细胞滞留

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恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因的构建及其高效表达

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 22-24页

作者：张青锋潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的:构建一个恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因(PfCP-TCL),并在毕氏酵母中进行高效分泌表达.方法:选取了疟原虫红外期疫苗候选抗原CSP、TRAP和LSA-1中的一些重要T、B细胞表位,按一定的次序加以串联连接,并全合成该融合基因.在毕氏... 详细信息

目的:构建一个恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因(PfCP-TCL),并在毕氏酵母中进行高效分泌表达.方法:选取了疟原虫红外期疫苗候选抗原CSP、TRAP和LSA-1中的一些重要T、B细胞表位,按一定的次序加以串联连接,并全合成该融合基因.在毕氏酵母中进行分泌表达,并纯化表达产物.结果:合成的基因在毕氏酵母中高水平分泌表达,产量达1 g/L以上.经离子交换和凝胶过滤2步纯化过程,获得纯度在95%以上的重组蛋白.结论:全合成的多表位融合抗原基因能在毕氏酵母中高水平分泌表达,并产生一种工艺简易的纯化方法.大量获得该重组蛋白为探讨其免疫学功能及作为多价联合疫苗的成分提供了基础.

关键词：恶性疟原虫红前期多表位融合抗原基因表达

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抑郁症大鼠海马和顶叶皮质神经元NGF含量及其mRNA的表达

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 590-592,I006页

作者：王雪琦由振东赵小林王勇姿路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :观察实验性抑郁症大鼠脑内神经生长因子含量及其 m RNA表达的变化。方法 :采用长期不可预见性中等强度应激造成大鼠抑郁症模型。运用 openfield法观察大鼠行为学变化 ,运用免疫组化和原位杂交法观察神经元 NGF含量及其m RNA表达... 详细信息

目的 :观察实验性抑郁症大鼠脑内神经生长因子含量及其 m RNA表达的变化。方法 :采用长期不可预见性中等强度应激造成大鼠抑郁症模型。运用 openfield法观察大鼠行为学变化 ,运用免疫组化和原位杂交法观察神经元 NGF含量及其m RNA表达的变化。结果 :与对照组相比 ,抑郁组大鼠海马和顶叶皮质神经元 NGF免疫阳性颗粒数目减少 ,着色浅淡 ;NGFm RNA杂交阳性信号减少。结论 :实验性抑郁症大鼠海马和顶叶皮质神经元 NGF含量下降 ,NGF m RNA表达水平降低。

关键词：抑郁症大鼠海马顶叶皮质神经元 NGF 含量 mRNA 神经生长因子

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胶质细胞源性神经营养因子受体α1定点突变体制备及其稳定转染细胞株的构建及鉴定

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第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1082-1085页

作者：朱伟张勇陈哲宇王丽梅路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :制备胶质细胞源性神经营养因子受体 α1(GFRα1)的突变体质粒 ,并建立 r GFRα1各突变体和 RET基因双转染的稳定 RCE细胞株。方法 :通过 Fugene6脂质体转染试剂 ,将 PCR法快速制备的 pc DNA3- r GFRα1突变体质粒分别与带潮霉素 ... 详细信息

目的 :制备胶质细胞源性神经营养因子受体 α1(GFRα1)的突变体质粒 ,并建立 r GFRα1各突变体和 RET基因双转染的稳定 RCE细胞株。方法 :通过 Fugene6脂质体转染试剂 ,将 PCR法快速制备的 pc DNA3- r GFRα1突变体质粒分别与带潮霉素 B抗性筛选标记的 pc DNA3.1- RET质粒共转染野生型 PC12细胞 ,建立 r GFRα1各突变体和 RET基因双转染的稳定PC12细胞株。经 Western印迹和细胞免疫荧光化学方法对转染入 PC12细胞中的各 r GFRα1突变体基因和 RET基因的表达进行鉴定。结果 :Western印迹和细胞免疫荧光化学方法检测均证实了所构建的细胞株中有转入基因的正确表达。结论 :成功构建了 r GFRα1各突变体基因和 RET基因同时转入表达的稳定细胞株 ,为研究 r GFRα1中关键氨基酸的位点参与胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)信号转导的作用奠定基础。

关键词：胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1) RET PC12细胞

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Dok1与表皮生长因子受体之间相互作用的酵母双杂交研究

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第二军医大学学报 2004年第7期25卷 755-758页

作者：张勇刘秀杰张骐阎志勇矫力刘翾路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :研究 downstream of kinases(dok1 )与表皮生长因子受体 (EGFR)之间的相互作用 ,寻找 EGFR的可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 EGFR下游信号转导机制。方法 :将 EGFR胞内域与 L ex A蛋白融合作为 DNA结合蛋白 ,分别将dok1、dok1 ... 详细信息

目的 :研究 downstream of kinases(dok1 )与表皮生长因子受体 (EGFR)之间的相互作用 ,寻找 EGFR的可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 EGFR下游信号转导机制。方法 :将 EGFR胞内域与 L ex A蛋白融合作为 DNA结合蛋白 ,分别将dok1、dok1 PTB及 dok1 ΔPTB与 B4 2 AD蛋白融合作为激活域蛋白 ,共转化酵母菌后 ,通过 β-半乳糖苷酶活性检测、生长实验以及免疫共沉淀实验分析它们之间的相互作用。结果 :dok1及 dok1 PTB与 EGFR之间在酵母中存在结合 ,而 dok1Δ PTB不与 EGFR结合。结论 :首次证实 EGFR与 dok1之间具有相互作用 ,dok 1的

关键词：表皮生长因子受体 dok1 PTB 酵母双杂交

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SNT1与RET之间相互作用的酵母双杂交研究

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第二军医大学学报 2006年第6期27卷 617-619页

作者：矫力张勇刘翾刘秀杰张照环王永刚朱伟何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的:研究suc1-binding neurotrophic target(SNT1)与RET之间的相互作用,寻找RET受体下游的结合蛋白,以深入认识RET下游信号转导机制。方法:将RET胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将SNT1、SNT1PTB及SNT1ΔPTB与B42AD蛋白融合... 详细信息

目的:研究suc1-binding neurotrophic target(SNT1)与RET之间的相互作用,寻找RET受体下游的结合蛋白,以深入认识RET下游信号转导机制。方法:将RET胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将SNT1、SNT1PTB及SNT1ΔPTB与B42AD蛋白融合作为激活域蛋白,共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测以及氨基酸营养缺陷生长实验分析它们之间的相互作用。结果:SNT1及SNT1PTB与RET之间在酵母中存在结合,而SNT1ΔPTB不与RET结合。结论:证实RET与SNT1之间具有相互作用,SNT1的PTB结构域在介导此相互作用的过程中非常重要。

关键词： RET SNT1 PTB 酵母双杂交蛋白相互作用

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酵母双杂交方法筛选与NGF受体TrkA相互作用的新蛋白质

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 586-589页

作者：张勇黄爱军曹莉阎志勇刘秀杰张骐路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :寻找新的 Trk A可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 Trk A下游信号转导机制。方法 :将 Trk A胞内域与 L ex A蛋白融合作为诱饵蛋白 ,应用酵母双杂交方法筛选人脑 L ex A c DNA文库 ,经β-半乳糖苷酶活性鉴定和测序分析进一步鉴别 ,... 详细信息

目的 :寻找新的 Trk A可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 Trk A下游信号转导机制。方法 :将 Trk A胞内域与 L ex A蛋白融合作为诱饵蛋白 ,应用酵母双杂交方法筛选人脑 L ex A c DNA文库 ,经β-半乳糖苷酶活性鉴定和测序分析进一步鉴别 ,获得阳性克隆。结果 :明确阳性克隆中的 Trk AIC- BP1为一种新的 Trk A结合蛋白。免疫共沉淀实验证实了 Trk AIC- BP1和Trk A在酵母中的相互作用。结论 :首次筛选到 Trk A结合蛋白—— Trk AIC- BP1,它可能在 Trk

关键词：酵母杂交方法 NGF受体 TrkA 相互作用蛋白质 TrkA^IC-BP1

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伯氏疟原虫氯喹抗性株红内期虫体在肝内的清除

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 512-514页

作者：严继舟宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸... 详细信息

目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸润 ,感染 RC株小鼠肝脏的门管区和血窦内可见大量单核 -巨噬细胞和少量淋巴细胞及中性粒细胞增生、浸润 ,并伴有大量感染疟原虫的红细胞滞留。活化的单核 -巨噬细胞和感染疟原虫红细胞的表膜相互粘附 ,大量与吞噬细胞直接接触或未接触的感染疟原虫红细胞内的虫体出现危机状态 (crisis form )。偶见巨噬细胞吞噬游离的裂殖子 ,但未见吞噬整个感染疟原虫红细胞。结论 :宿主可能主要通过活化单核 -巨噬细胞诱导疟原虫发生危机状态 ,清除 RC株红内期疟原虫 ,而并非依赖白细胞直接吞噬。

关键词：伯氏疟原虫氯喹清除单核-巨噬细胞危机状态

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