检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2004年第1期25卷 61-62页

作者：曲莉张晓莉潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

以恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9免疫兔血清为待测血清 ,将起始原虫率从 1 %降至 0 .2 %～ 0 .5 % ,采用 2种方法作对比 ,即一组每 2 4 h更换培养液、加入免疫血清 ,另一组 72 h内不更换培养液也不加免疫血清试验方法。培养至 72 h,涂... 详细信息

以恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9免疫兔血清为待测血清 ,将起始原虫率从 1 %降至 0 .2 %～ 0 .5 % ,采用 2种方法作对比 ,即一组每 2 4 h更换培养液、加入免疫血清 ,另一组 72 h内不更换培养液也不加免疫血清试验方法。培养至 72 h,涂片 ,油镜下计数 ,计算原虫感染率和抑制率。结果 2组的抑制率相近 ,经统计分析无显著差异。测定不同剂量抗原免疫血清的抑制率 ,结果显示抑制率与免疫血清中特异抗体滴度呈正相关 ,2种方法的结果无显著差异。研究表明通过降低起始原虫率可将常规体外抑制实验由需每天换液改为 72

关键词：恶性疟原虫体外抑制实验融合抗原 PfCP-2.9 免疫血清

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Dok1与TrkA之间相互作用的酵母双杂交研究

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第二军医大学学报 2006年第5期27卷 497-499页

作者：刘翾张勇矫力刘秀杰张照环王永刚朱伟何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的:研究downstream of kinases1(dok1)与TrkA之间的相互作用,寻找TrkA的可能底物或调控蛋白,以深入认识TrkA下游信号转导机制。方法:将TrkA胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将dok1、dok1PTB及dok1ΔPTB与B42AD蛋白融合作为... 详细信息

目的:研究downstream of kinases1(dok1)与TrkA之间的相互作用,寻找TrkA的可能底物或调控蛋白,以深入认识TrkA下游信号转导机制。方法:将TrkA胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将dok1、dok1PTB及dok1ΔPTB与B42AD蛋白融合作为激活域蛋白,共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测以及氨基酸营养缺陷生长实验分析它们之间的相互作用。结果:dok1及dok1PTB与TrkA之间在酵母中存在结合,而dok1ΔPTB不与TrkA结合。结论:证实TrkA与dok1之间具有相互作用,dok1的PTB结构域在介导此相互作用的过程中非常重要。

关键词： TrkA Dok1 酵母双杂交

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PC12-Mint2基因工程细胞株的构建

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 214-216页

作者：张骐张勇曹莉刘翾矫力何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒peDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,... 详细信息

目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒peDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,有血清培养并传代具有G418抗性的细胞,数代培养后获得工程细胞株;分别提取野生型PC12细胞和PC12-Mint2工程细胞的mRNA及细胞裂解液,RT-PCR方法检测Mint2基因是否整合入PC12细胞基因组,并用West-ern印迹法检测外源基因Mint2在PC12-Mint2工程细胞中是否正常表达。结果:扩增出的基因片段大小为2 253 bp;pcDNA3.1A-Mint2重组质粒酶切结果表明Mint2基因正确地插入到pcDNA3.1A载体中,测序结果正确;将peDNA3.1A-Mint2转染PC12细胞,经G418筛选获得PC12-Mint2工程细胞株;RT-PCR结果表明Mint2基因已整合入PC12细胞,Western印迹结果显示在120 000处有特异条带,大小与Mint2蛋白理论计算值一致,表明在PC12-Mint2基因工程细胞中确实有Mint2蛋白表达。结论:本试验成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-Mint2,并获得了稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株,为进一步研究Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础。

关键词：基因亚克隆 Mint2 PC12细胞转染 Western印迹法

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大鼠肺缺血再灌注损伤引起肺细胞的凋亡

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 295-297页

作者：谢东甫秦雄徐志飞第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院胸心外科上海200003

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转... 详细信息

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的 d U TP缺口末端标记技术 (TU NEL)检测缺血再灌注损伤所引起的肺细胞凋亡的变化及其与再灌注时间的相关性 ;DNA电泳进行肺组织细胞 DNA片段分析 ;电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果 :在肺缺血再灌注后早期 (30 min)发生明显的肺细胞凋亡 ,凋亡细胞数峰值位于再灌注后 2 h,再灌注后 1 2 h凋亡细胞数与对照组无显著差别 ;缺血而无再灌注的肺细胞凋亡无明显变化。结论

关键词：大鼠肺缺血再灌注损伤肺细胞细胞凋亡

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TrkA膜外域各结构域重组蛋白的制备和活性测定

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第二军医大学学报 2003年第8期24卷 853-855页

作者：郭超阎志勇由振东张勇曹莉路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的 :制备有活性的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白。方法 :用 PCR法克隆 Trk A膜外域各结构域 (分别命名为CL C、Ig1和 Ig2 )的 c DNA片段 ,然后插入融合表达载体 p ET- 2 8a(+)中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌 BL2 1中表达 ,并用亲和... 详细信息

目的 :制备有活性的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白。方法 :用 PCR法克隆 Trk A膜外域各结构域 (分别命名为CL C、Ig1和 Ig2 )的 c DNA片段 ,然后插入融合表达载体 p ET- 2 8a(+)中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌 BL2 1中表达 ,并用亲和层析法进行纯化 ,用神经生长因子 (NGF)诱导 PC12细胞株测定 Trk A与配体结合的关键结构域 (CL C、Ig1和 Ig2 )活性。结果 :成功地用大肠杆菌制备了纯度达 90 %以上的 Trk A膜外域各结构域重组蛋白 ;NGF+Ig2组 PC12细胞突起生长率明显低于 NGF组 (P<0 .0 5 ) ,NGF+CL C、NGF+Ig1组与 NGF组相比没有显著差异。结论 :Ig2能抑制经 NGF诱导的 PC12细胞的分化 ,CL C和 Ig1不能抑制

关键词： TrkA膜外域结构域重组蛋白制备活性测定融合表达载体 pET-28a(+)

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恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9在不同品系小鼠中的免疫特性(英文)

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 9-13页

作者：薛向阳张青锋邢金花潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :探讨恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9在不同品系小鼠 (BAL B/ ca、C5 7BL/ 6 J、C3H/ He、DBA/ 2 J及昆明种 )中的免疫原性和免疫反应特性。方法 :以 ISA72 0为佐剂 ,Pf CP- 2 .9抗原皮下免疫 5种品系小鼠 3次 ,间隔 3周。以 EL ... 详细信息

目的 :探讨恶性疟原虫融合抗原 Pf CP- 2 .9在不同品系小鼠 (BAL B/ ca、C5 7BL/ 6 J、C3H/ He、DBA/ 2 J及昆明种 )中的免疫原性和免疫反应特性。方法 :以 ISA72 0为佐剂 ,Pf CP- 2 .9抗原皮下免疫 5种品系小鼠 3次 ,间隔 3周。以 EL ISA检测免疫血清中特异性抗体的动态变化、Ig G抗体亚型及对融合抗原各组分的抗体水平 ,以间接荧光抗体实验分析免疫血清对恶性疟原虫天然抗原的识别情况。结果 :5种品系小鼠均能产生针对 Pf CP- 2 .9的免疫应答 ,3次免疫后血清中特异性抗体滴度达1 0 5以上。Pf CP- 2 .9所诱生的免疫血清不但能识别 MSP1 - 1 9和 AMA- 1 ( )两个主要片段 ,而且能识别恶性疟原虫天然抗原。所诱导的 4种 Ig G抗体亚型中 ,Ig G1和 Ig G2 a是免疫血清中主要的抗体类型。但特异性抗体水平及抗体亚型分布因遗传背景不同而异。结论 :融合蛋白 Pf CP- 2 .9在 5种不同品系小鼠中具有强的免疫原性。

关键词：恶性疟原虫融合抗原 PfCP-2.9 小鼠免疫特性免疫原性免疫反应

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染小鼠肝、肾、肺超微结构的比较

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第二军医大学学报 2001年第6期22卷 508-511页

作者：陈克强宋关鸿第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后... 详细信息

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。结果 :N株感染后期 ,肝血窦、肾间质和毛细血管、肺泡毛细血管含有较多的感染疟原虫红细胞 ,肺泡壁毛细血管内皮细胞有较多的突起与疟原虫感染红细胞相接触。较多的肝细胞、肾小球旁细胞、肾小管上皮细胞、肺泡型和型细胞出现膜破溃 ,细胞器和胞质流失等不可逆的坏死性病变 ,一些肝血窦、肾小管和肺泡内可见多量的细胞碎片。 RC株感染后期 ,肝血窦、肾间质充血 ,含有较多的感染疟原虫红细胞。肝细胞、肾小管上皮细胞的病变以线粒体肿胀为主的变性 ,可见肝脏部分变性肝细胞出现恢复状态 ,肾小球毛细血管内皮细胞下、基膜、系膜区可见电子致密物沉着 ,肺泡隔内可见较多的单个核细胞。结论 :N株毒力较强 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害为不可逆的坏死性病变 ,呈急性变质性炎症过程 ;而 RC株毒力明显减弱 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害以变性为主。

关键词：伯氏疟原虫氯喹病理学超微结构抗药性微生物小鼠

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重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 14-17页

作者：张冬梅潘卫庆第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

目的:全合成恶性疟原虫eba-175Ⅱf2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原PfCP-2.9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制.方法:采用不对称PCR法拼接合成eba-175Ⅱf2基因(959 bp),用电转化... 详细信息

目的:全合成恶性疟原虫eba-175Ⅱf2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原PfCP-2.9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制.方法:采用不对称PCR法拼接合成eba-175Ⅱf2基因(959 bp),用电转化方法将合成基因导入毕氏酵母中并进行诱导表达,采用离子交换层析和分子筛层析纯化EBA-175ⅡF2蛋白.结果:全合成eba-175Ⅱf2基因在毕氏酵母中高效分泌表达.重组EBA-175ⅡF2和PfCP-2.9联合免疫后,以ELISA 和IFA检测,针对2个蛋白联合免疫的抗体滴度明显高于2个蛋白单独免疫的滴度.结论:重组EBA-175ⅡF2和PfCP-2.9联合免疫时不存在竞争性免疫抑制,这2个重要的疟疾疫苗候选抗原具有潜在联合应用前景.

关键词：恶性疟原虫 175 000红细胞结合抗原免疫性

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复方甲苯咪唑乳膏对猪肠道线虫的疗效

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第二军医大学学报 2003年第12期24卷 1279-1280页

作者：刘荣兴戚丽君李翔宇第二军医大学基础医学部病原生物学教研室上海200433

本课题组选择上海宝山区长海大队养猪场,对猪体自然感染蛔虫、结节虫和鞭虫采用复方甲苯咪唑乳膏(海蜜克)皮涂和复方甲苯咪唑片(主药成分与乳膏相同)作口服治疗比较,观察复方甲苯咪唑乳膏在不同给药剂量在同一皮涂给药条件下对猪肠道线... 详细信息

本课题组选择上海宝山区长海大队养猪场,对猪体自然感染蛔虫、结节虫和鞭虫采用复方甲苯咪唑乳膏(海蜜克)皮涂和复方甲苯咪唑片(主药成分与乳膏相同)作口服治疗比较,观察复方甲苯咪唑乳膏在不同给药剂量在同一皮涂给药条件下对猪肠道线虫的疗效,同时将剂量为6mg/kg的复方甲苯咪唑乳膏皮涂组与相同药物剂量的口服组进行比较,为其用于治疗人体肠道线虫感染提供实验依据.

关键词：复方甲苯咪唑乳膏猪肠道线虫给药途径不良反应药物剂量

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常染色体显性多囊肾病Han:SPRD大鼠肾脏病理观察及其意义

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 83-86页

作者：李林戴兵孙田美颜永碧梅长林第二军医大学长征医院肾内科上海200003 基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:观察常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease, ADPKD)的Han:SPRD大鼠模型的肾脏病理变化,为揭示ADPKD发病机制提供证据与线索。方法:选取雄性2 周龄Han:SPRD纯合大鼠(cy/cy)和3 个月龄杂合大鼠(cy/+)... 详细信息

目的:观察常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease, ADPKD)的Han:SPRD大鼠模型的肾脏病理变化,为揭示ADPKD发病机制提供证据与线索。方法:选取雄性2 周龄Han:SPRD纯合大鼠(cy/cy)和3 个月龄杂合大鼠(cy/+),取其肾组织进行H E染色、PAS染色、Masson染色以及透射电镜观察。结果:光镜下发现Han:SPRD大鼠肾脏体积增大;囊肿衬里上皮细胞增殖显著;小管基膜增厚,可见灶性小管萎缩和较多蛋白管型;肾小球数目减少、体积缩小,渐趋废弃,呈明显缺血样改变,血管壁增厚。透射电镜可见肾小球毛细血管腔阻塞,基底膜薄厚不均,部分断裂;小管上皮细胞胞质脱落,微绒毛紊乱、部分缺如;细胞外间质成分稀少;囊肿衬里上皮细胞内可见大量线粒体,高尔基体、核糖体丰富。结论:Han:SPRD大鼠肾脏组织学和超微结构的改变可解释多囊肾病的部分临床表现;并观察到Han:SPRD大鼠肾小管上皮细胞微绒毛异常,为揭示疾病的发病机制提供了线索。

关键词：多囊肾病,常染色体显性动物模型 Han:SPRD大鼠

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