检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2005年第3期26卷 257-262页

作者：陶欣荣李文林苏娟王新民李建秀 Joseph T Lau 胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室 The Department of Molecular and Cellular Biology Roswell Park Cancer InstituteElm and Carlton StreetsBuffaloNY 14263USA

目的:分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),建立克隆化扩增的细胞系并初步鉴定其分化特性和细胞的分子标记.方法:利用间充质干细胞贴壁生长的特性,显微镜下挑取原代单个成纤维样生长单位中的细胞,逐步扩大培养,最终得到克隆化扩增的hMSCs.选... 详细信息

目的:分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),建立克隆化扩增的细胞系并初步鉴定其分化特性和细胞的分子标记.方法:利用间充质干细胞贴壁生长的特性,显微镜下挑取原代单个成纤维样生长单位中的细胞,逐步扩大培养,最终得到克隆化扩增的hMSCs.选择有利于其生长的血清,低密度培养,传70%～80%生长汇合时传代保种.RT-PCR检测其Oct-4、SDF1、CD49a、CK19、c-met基因的表达;流式细胞术检测细胞表面抗原CD34、CD45、CD14、CD44、CD29、CD90、HLA-1和HLADR;体外向骨、软骨、脂肪细胞方向诱导分化鉴定其分化潜能.结果:建立了人骨髓间充质干细胞系并在体外实现了克隆化扩增,该细胞系在体外连续培养达60个细胞倍增时间仍保持多向分化的潜能.细胞不表达CD34、CD45、CD14、HLA-DR,但表达Oct-4、SDF-1、CD49a、CK19、c-met、CD44、CD29、CD90、HLA-1.体外能诱导出骨、软骨、脂肪细胞.结论:得到了一个可稳定传代的克隆化扩增的人骨髓间充质干细胞系,该细胞系在体外可以分化为骨、软骨、脂肪细胞,并表达Oct-4、CK19和c-met.

关键词：间充质干细胞骨髓细胞系克隆细胞分化

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新生大鼠大脑皮质神经干细胞的分离培养与胆碱能神经元的鉴定

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 139-142页

作者：毕晓莹丁素菊娄淑杰曹莉徐晓辉陶沂黎佳思第二军医大学长海医院神经内科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的:体外分离和培养新生大鼠大脑皮质神经干细胞并进行鉴定,为用于脑梗死动物模型梗死区移植细胞作准备。方法:分离新生大鼠皮质神经干细胞,进行体外培养,使用免疫细胞荧光染色技术对细胞的特性进行鉴定,并对细胞的胆碱能特征进行鉴定... 详细信息

目的:体外分离和培养新生大鼠大脑皮质神经干细胞并进行鉴定,为用于脑梗死动物模型梗死区移植细胞作准备。方法:分离新生大鼠皮质神经干细胞,进行体外培养,使用免疫细胞荧光染色技术对细胞的特性进行鉴定,并对细胞的胆碱能特征进行鉴定。结果:获得了Nestin阳性的神经干细胞,其分化后可获得MAP 2、GFAP和CNPase阳性的神经元、星形胶质细胞和寡突胶质细胞;通过胆碱能鉴定发现大脑皮质干细胞可分化为胆碱能神经元。结论:体外分离和培养的大脑皮质神经干细胞具有增殖分化的能力,并可以分化为胆碱能神经元,有望应用于皮质损伤后认知障碍及运动障碍的细胞移植治疗。

关键词：神经干细胞皮质胆碱能神经元分离培养

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睫状神经营养因子对毒胡萝卜素所致大鼠海马神经元[Ca^(2+)]_i升高的抑制作用

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 1057-1060页

作者：王宗文严进李萍路长林蒋春雷倪鑫第二军医大学护理系心理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 第二军医大学海军医学系航海医学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433

目的:观察睫状神经营养因子(CNTF)对内质网钙泵特异性抑制剂毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)引起海马神经元内胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]i)升高的抑制作用。方法:出生24 h以内SD大鼠海马神经元原代培养10~14 d备用,以活细胞内荧光探针Frua2/A... 详细信息

目的:观察睫状神经营养因子(CNTF)对内质网钙泵特异性抑制剂毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)引起海马神经元内胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]i)升高的抑制作用。方法:出生24 h以内SD大鼠海马神经元原代培养10~14 d备用,以活细胞内荧光探针Frua2/AM实时检测[Ca2+]i。实验分3组:A组(n=20),EGTA(3 mmol/L);B组(n=40),EGTA(3 mmol/L)+Tg(10μmol/L);C组(n=12),EGTA(3 mmol/L)+Tg(10μmol/L)+CNTF(500 U/μl)。结果:用足量EGTA螯合细胞外Ca2+后,测得[Ca2+]i≤(30.73±7.25)nmol/L;加入EGTA+Tg后,[Ca2+]i显著升高([Ca2+]i≥[91.55±12.24]nmol/L);加入EGTA+Tg+CNTF后,升高的[Ca2+]i明显降低([Ca2+]i≤[26.09±7.16]nmol/L,P<0.01)。结论:CNTF可明显减弱Tg的钙库质膜钙泵抑制作用,使胞质[Ca2+]i降低。提示CNTF通过增加胞内钙库对细胞内游离Ca2+的吸收作用来降低海马神经元的Ca2+负荷。

关键词：海马神经元睫状神经营养因子毒胡萝卜素钙离子

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氧化苦参碱对乙型肝炎病毒转基因小鼠乙肝抗原表达的影响

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 746-748,F003页

作者：陈小松王国俊蔡雄余宏宇胡以平第二军医大学长征医院感染科上海200003 第二军医大学长征医院病理科第二军医大学基础医学部细胞生物学教研

目的：研究氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的作用，并初步探讨其作用机制。方法：以乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠ＩＣＲ－ＴｇＮ（ＨＢＶａｄｒ１．２）ＳＭＭＵ为动物模型，运用ＥＬＩＳＡ和免疫组化的方法检测小鼠肝脏内乙肝抗原含量... 详细信息

目的：研究氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的作用，并初步探讨其作用机制。方法：以乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠ＩＣＲ－ＴｇＮ（ＨＢＶａｄｒ１．２）ＳＭＭＵ为动物模型，运用ＥＬＩＳＡ和免疫组化的方法检测小鼠肝脏内乙肝抗原含量。结果：分别予氧化苦参碱１００，２００，３００ｍｇ／ｋｇ腹腔注射，１次／ｄ，３０ｄ后，乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的含量较空白对照组（予等体积生理盐水腹腔注射）均有明显的下降，且对两者作用一致；进一步的研究表明氧化苦参碱２００ｍｇ／ｋｇ作用１０ｄ，２０ｄ时小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的含量较治疗前有明显的下降。结论：氧化苦参碱能降低乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的含量，有抗乙型肝炎病毒作用。

关键词：氧化苦参碱转基因小鼠乙型肝炎 HBsAg HBcAg

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HBV preS2-S DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 286-289页

作者：巴月訾晓渊张南熊俊张树忠李文林李建秀吴逸明胡以平郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进... 详细信息

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进行稳定表达;以此重组质粒免疫小鼠,ELISA方法检测免疫小鼠抗HBs抗体浓度。结果:构建了HBV preS2 S 基因的表达质粒pcDNAS2 S,该表达质粒可在7721 细胞中稳定高效表达;免疫接种小鼠2 周后抗HBs抗体浓度明显升高,接种后第4周布比卡因处理组小鼠抗HBs抗体的浓度达到峰值161.4 mIU/ml,布比卡因非处理组第5周抗HBs抗体的浓度可达133.7 mIU/ml。结论:所构建的pcDNAS2 S表达质粒能有效表达并诱导小鼠体液免疫应答。

关键词：肝炎病毒乙型抗原,表面免疫抗体生成

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海洋生命活性物质和海洋药物的研究与开发

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 5-7页

作者：焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

海洋是生物资源的巨大宝库,地球上约80%的物种栖息在海洋中。由于特殊的生存环境,海洋生物可合成与陆地生物结构不同的、活性不一的代谢产物,为新药的研究与开发提供了大量的先导化合物。在过去的几十年间,全球范围内已从海洋动、植物... 详细信息

海洋是生物资源的巨大宝库,地球上约80%的物种栖息在海洋中。由于特殊的生存环境,海洋生物可合成与陆地生物结构不同的、活性不一的代谢产物,为新药的研究与开发提供了大量的先导化合物。在过去的几十年间,全球范围内已从海洋动、植物及微生物中分离得到15 000多个化合物,其中头孢霉素、芋螺毒素、阿糖胞苷和阿糖腺苷等4个药物均是以海洋来源先导化合物为基础开发成功的。

关键词：海洋生物学海洋药化合物活性物质

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人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 941-943页

作者：刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏熊俊蒋正戚中田第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科基础医学部微生物学教研室

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消... 详细信息

目的:初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养.方法:体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为5种不同的方式培养后,用碱性磷酸酶标记,计数阳性克隆并进行比较.结果:酶消化法培养所获得的克隆较单纯机械分离方法多,原代培养时种植到饲养层上效果较好.将分离到的组织用0.25%胰酶消化3 min,种植到丝裂霉素C处理过的小鼠胚胎成纤维细胞上培养3 d,挑取克隆传代,在第10天形成30.7 个阳性克隆,显著高于其他方法获得的阳性克隆数.用碱性磷酸酶标记的细胞(克隆)具有多样性,细胞胞体为圆形,分为有突起和无突起两种;阳性细胞克隆呈圆球形、条带形和块形,与周围细胞分界清楚.结论:人胚胎体内的微环境限制生殖系细胞的体外扩增培养,原代培养需要在饲养层上进行且宜用酶消化法尽早传代.

关键词：胚胎生殖系细胞细胞分离体外培养碱性磷酸酶

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大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化

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第二军医大学学报 2006年第5期27卷 500-502页

作者：周运恒缪明永李洋时多黄鹤王学敏焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:研究大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化规律。方法:雄性SD大鼠70%肝切除(PH),制作肝再生模型,制备肝匀浆液,经离心后用酶标仪分别测定肝再生过程中不同时期(共8个时间点),肝细胞的凋亡酶活性。结果:Caspase-3... 详细信息

目的:研究大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化规律。方法:雄性SD大鼠70%肝切除(PH),制作肝再生模型,制备肝匀浆液,经离心后用酶标仪分别测定肝再生过程中不同时期(共8个时间点),肝细胞的凋亡酶活性。结果:Caspase-3活性,与对照组相比,在PH后3、6、72、120和168 h时显著性增高(P<0.001);而整个过程中Caspase-8的活性除了在PH后168 h时高于对照组外(P<0.05),其余时间点没有明显增高。结论:肝再生过程中肝细胞凋亡酶Caspase-3活性的升高可能主要是由内源性线粒体途径引起的。

关键词：肝再生肝细胞 caspase-3 caspase-8

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长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子的表达

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第2期17卷 102-104,T003页

作者：郑宏良周水淼李兆基陈世彩黄益灯严进由振东路长林王成海上海第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰... 详细信息

目的 :探讨长期面神经损伤后其运动神经元睫状神经营养因子 (CNTF)的表达及分布。方法 :以犬单侧面神经损伤为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定面神经核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰度、体积及数量。结果 :疑核运动神经元能自分泌CNTF ,神经损伤 3周内神经元CNTF基因表达强度及反应的胞体数明显下降 ,而CNTF蛋白表达增强 ,但表达的胞体数无改变 ;4周后前两项指标迅速增高 ,而CNTF表达强度恢复正常 ,反应的胞体数无变化 ;6周后 3指标均始终低于健侧。12～ 32周各项指标均趋向稳定。结论 :长期面神经损伤面神经核仍保持较高水平的CNTF表达。

关键词：面神经神经再生神经生长因子

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C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达模式分析

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 279-282页

作者：訾晓渊熊俊张南张树忠巴月姚玉成李建秀王新民马凤云胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转... 详细信息

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达与小鼠的月龄、性别、遗传背景的相关性.结果:转基因小鼠在出生后1～3个月时,血清中HBsAg的表达较低或甚至不表达,8个月龄左右时最高,此后逐渐降低,但肝组织中HBsAg的表达相对稳定在较高水平,能真实反映转基因小鼠中HBsAg的表达.雄性小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达量高于雌性小鼠(P＜0.05).转基因小鼠与C57BL/6品系、DAB品系和129s品系正常小鼠交配后的子代,其血清和肝组织中HBsAg表达量均未发生变化.血清阳性的小鼠中肝组织HBsAg阳性率为94.05%,两者呈正相关关系(r=0.257,P＜0.01).结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达具有发育调节和性别差异.

关键词：病毒乙型肝炎小鼠转基因 HBsAg 血清肝

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