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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：范秋领黄才国缪辉南焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海 200237 中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

海洋是一个低温、高盐、高压、缺氧、缺少光照的特殊环境，在这样的环境中生存的生物能代谢产生与陆地生物不同的新颖的生命活性物质，它们具有抗肿瘤、抗菌、抗真菌、抗病毒、抗心脑血管疾病、抗艾滋病等作用，借助于各种药物筛选、分... 详细信息

海洋是一个低温、高盐、高压、缺氧、缺少光照的特殊环境，在这样的环境中生存的生物能代谢产生与陆地生物不同的新颖的生命活性物质，它们具有抗肿瘤、抗菌、抗真菌、抗病毒、抗心脑血管疾病、抗艾滋病等作用，借助于各种药物筛选、分离手段，目前已从海洋生物中发现具有重要生理及药理活性的化合物上千种，这些化合物包括甾醇、萜类、皂甙、聚醚、大环内酯、脂肪酸、多糖、生物碱、环肽、蛋白质等类型，其中Bryostatin 1、Dolastatin 10等已进入临床试验。我国浙江舟山群岛有丰富的海洋资源，本文从舟山采集到12种海洋动物，利用多种活性筛选模型对其粗提物进行活性筛选，从中筛选出几种具有不同生物活性的物种，为进一步分离提取奠定了基础。

关键词：海洋动物活性物质生命活性药理活性海洋资源

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鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗急性肝损伤作用

鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗急性肝损伤作用

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：范秋领金艳黄才国魏善建焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海 200237 中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

鲨鱼是海洋生物资源中重要的物种，鲨鱼软骨中抗肿瘤活性物质在美国己进入临床试验，鲨鱼免疫球蛋白基因及其产物的结构与人类存在一定的同源性，表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况。我们用LaBrecque等的提取方... 详细信息

鲨鱼是海洋生物资源中重要的物种，鲨鱼软骨中抗肿瘤活性物质在美国己进入临床试验，鲨鱼免疫球蛋白基因及其产物的结构与人类存在一定的同源性，表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况。我们用LaBrecque等的提取方法从幼鲨肝脏中提取了一种活性蛋白，通过研究证明其能够促进肝癌细胞HepG 2的增值，促进其DNA的合成，我们认为这是存在于幼鲨肝脏中的肝刺激物(sHSS)。为了进一步证实其功能，本文探讨了其对小鼠急性肝损伤的保护作用。

关键词：鲨鱼肝刺激物肝细胞细胞增殖抗急性肝损伤海洋生物

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镉暴露大鼠睾丸支持细胞金属硫蛋白表达的时相研究

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 965-968页

作者：任绪义周雍张建鹏仲燕冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸... 详细信息

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成。

关键词：金属硫蛋白镉睾丸支持细胞睾丸组织镉损伤

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电镜技术在病理学诊断中的应用

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 628-628,649页

作者：颜永碧陆月良王英第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

为摸索出适合临床超微结构病理诊断的电镜技术，更好地发挥其对疾病诊断的作用，现根据多年工作积累并结合临床实际，介绍本实验室在疾病诊断中电镜技术的应用情况。

关键词：病理学诊断电镜技术临床应用疾病诊断

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肾小球诊断样品由光镜的冰冻切片补做电镜制样的方法

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 60-60,69页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球病诊断的常规，尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而，有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺（肾穿）标本中找不到肾小球，但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光... 详细信息

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球病诊断的常规，尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而，有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺（肾穿）标本中找不到肾小球，但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光镜常规石蜡包埋的肾小球组织经脱蜡后改做电镜制样进行补救，但标本因固定和脱蜡等因素，效果并不太理想。我们通过摸索和比较几种补救措施，现介绍一种用冰冻切片的肾小球经光镜检测后再进行电镜制样的方法

关键词：肾小球冰冻切片电镜制样肾脏病诊断

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游离细胞内抗原的免疫电镜胶金标记方法

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 10-10,17页

作者：颜永碧王英陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大... 详细信息

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大量的工作积累，将游离细胞内免疫最镜标记方法的应用体会总结如下，以便与同道们相互交流。

关键词：游离细胞内抗原胶体金显微镜检查免疫组织化学

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硝酸银耳蜗光镜制片改做透射电镜样品的方法

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 936-936,940页

作者：张琰敏刁明芳颜永碧第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

耳蜗标本的电镜制备难度较大，很难做出理想的标本。有关显示和制作耳蜗电镜标本方面的文章虽有很多，但大疗分资料是描述如何修正耳蜗螺旋器方向的定向、定位。本文介绍了同一份耳蜗标本，光镜观察与电镜观察相结合的样品制备方法。

关键词：硝酸银耳蜗光镜制片透射电镜

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敲除PKD1基因的小鼠胚胎干细胞的建立(英文)

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 5-10页

作者：郁胜强梅长林胡以平王新民第二军医大学长征医院肾内科上海200003 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,... 详细信息

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,并用 G4 18进行筛选培养 ,得到阳性克隆后 ,进一步扩大培养 ,抽提胚胎干细胞的基因组 DNA ,采用 DNA印迹法进行分子鉴定。结果 :经 G4 18筛选培养得到 192个阳性克隆 ,分子鉴定获得 2个发生同源重组的胚胎干细胞克隆。结论 :鉴定得到的 2个同源重组胚胎干细胞克隆 ,为进一步建立 PK

关键词：胚胎干细胞多囊肾病基因敲除

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N-硝基-L-精氨酸抗阿片类精神依赖作用

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中国药学杂志 2003年第1期38卷 25-28页

作者：万兴旺黄矛何雅琴李万亥万莉路长林第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成中的作用。方法　采用小鼠腹腔注射吗啡、二氢埃托啡的方法建立小鼠精神依赖的条件性位置偏爱模型 ;采用荧光内过滤法测定小鼠脑内NO的含量 ;小鼠脑内cAMP/cGMP含... 详细信息

目的　研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成中的作用。方法　采用小鼠腹腔注射吗啡、二氢埃托啡的方法建立小鼠精神依赖的条件性位置偏爱模型 ;采用荧光内过滤法测定小鼠脑内NO的含量 ;小鼠脑内cAMP/cGMP含量采用放射免疫法测定。结果　小鼠吗啡、二氢埃托啡精神依赖形成过程中脑内NO ,cAMP ,cGMP的含量显著上升 ;腹腔注射NO2 Arg 5mg·kg- 1 可抑制吗啡、二氢埃托啡精神依赖升高小鼠脑内NO ,cAMP ,cGMP含量的作用。结论　NO在易化阿片类药物精神依赖形成中可能有一定作用 ;NO2 Arg抑制吗啡。

关键词：吗啡二氢埃托啡精神依赖一氧化氮

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用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 145-147页

作者：胡火珍李丹李小玉姚玉成胡以平四川大学华西基础医学与法医学院细胞生物学教研室成都610041 上海第二军医大学细胞生物学教研室

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ... 详细信息

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ,与雌鼠交配 ,用 PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源 DNA和肝组织中表达的 p X蛋白。结果　测序结果与文献报道一致 ,并且 X基因在 Hela细胞中表达 ;共产仔鼠 16只 ,其中 1只为阳性仔鼠 ,阳性率为 6 .2 5 %。结论　初步证明用精原干细胞介导法制备

关键词：乙肝病毒X基因转基因小鼠精原细胞

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