检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1995年第1期16卷 37-40页

作者：何润昌范溥生王旭明何北平张忠义周世臣宋朝佑林葆城第二军医大学基础医学部解剖学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经... 详细信息

用ＷＱ－９Ｅ钾离子透入仪筛选出对痛刺激敏感的ＳＤ大鼠８只，随机分成对照组及针刺组，每组４只。针刺鼠用ＷＱ－９Ｅ电针仪刺激两侧＂足三里＂穴，持续３０ｍｉｎ。所有动物同时用１％戊巴比妥钠腹腔内麻醉后开胸，用Ｂｏｕｉｎ液经心灌注固定，开颅取脑，作连续冰冻切片（片厚４０μｍ），隔片取一。所有切片均按Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇｅｒ（ＰＡＰ）法进行免疫细胞化学反应，ＤＡＢ呈色，封片后直接连ＩＢＭ２８６－ＣＡＰ５３０图像分析系统对视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质作定量测定。结果显示：针刺鼠下丘脑视上核，室旁核催产素免疫反应阳性物质的总面积比对照鼠分别增加了４４．１％、４７．３％（Ｐ＜０．０１）。提示，催产素免疫反应阳性物质的增加与电针刺激足三里穴有关，催产素可能参与电针镇痛的中枢调节过程。

关键词：电针视上核室旁核催产素免疫细胞化学

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小鼠受精卵显微操作方法的改进

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第二军医大学学报 2002年第9期23卷 1032-1033页

作者：李建秀胡卫江胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学实验动物中心

目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。结果 :经改... 详细信息

目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。结果 :经改进后缩短操作时间的显微操作法与常规显微操作法相比 ,小鼠受精卵的存活率由 6 0 .3%提高至 79.5 %、假孕母鼠生产率由 35 .7%提高至 5 6 .8%、得仔率由 10 .1%提高至 14.1%,均有显著差别 (P<0 .0 1)。结论 :改进的显微操作法可推广应用于常规的转基因小鼠制备。

关键词：受精卵存活率生产率得仔率显微操作法

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乙型肝炎病毒纯合子转基因小鼠(adr 1.2)的培育

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 598-600页

作者：胡卫江戴德顺李建秀王新民孙伟郝光荣胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学实验动物中心

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的ＨＢＶ转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生ｆｏｕｎｄｅｒ小鼠以后，将正常小鼠与转基因小鼠交配，通过ＰＣＲ，Ｄｏｔｂｌｏｔｔｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈ... 详细信息

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的ＨＢＶ转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生ｆｏｕｎｄｅｒ小鼠以后，将正常小鼠与转基因小鼠交配，通过ＰＣＲ，Ｄｏｔｂｌｏｔｔｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ等方法检测ＨＢＶＤＮＡ在转基因小鼠体内的整合状况，阳性率达５０％左右后，进行近亲交配。结果：共得到了７代ＨＢＶ转基因小鼠，其中包含有整合ＨＢＶ基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，并得到了整合有ＨＢＶ基因的纯合子转基因小鼠。

关键词：小鼠转基因纯合子乙型肝炎病毒

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TT型病毒基因组的克隆与进化分析

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微生物学报 2001年第4期41卷 408-414页

作者：任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室第二军医大学长征医院感染科

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA... 详细信息

利用PCR方法从输血传播性病毒(transfusion transmitted virus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段.将PCR扩增片段克隆到pT-Adv载体中,筛选获得阳性克隆.DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列.利用DNA片段中特有的限制性内切酶位点将TTV的DNA片段首尾相连,得到近全长的基因组克隆,命名为TTV021.对TTV021的核酸序列进行分析,TFV021长3 472 nt,存在2个阅读框架ORF1和ORF2,分别编码785和146个氨基酸.将TTV021与其它已知的TTV基因组全序列进行了同源性比较,并进行进化分析.结果表明,TTV021序列与TTV分离株CHN2、BDH1的遗传距离较近,而与其它分离株相对较远.

关键词：输血传播性病毒克隆同源性进化分析

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终末期肝病细胞治疗供体细胞来源的研究进展

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中国细胞生物学学报 2015年第5期37卷 740-745页

作者：孙筱于兵陈费王敏君何志颖胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

许多因素所致的肝脏疾病都有可能发展为终末期肝病,而终末期肝病目前唯一有效的治疗方法就是原位肝移植。然而,由于受供体肝脏短缺等因素的限制,细胞治疗方法一直被临床上所期待。近年来,基于谱系重编程的诱导型肝干细胞和诱导型肝实质... 详细信息

许多因素所致的肝脏疾病都有可能发展为终末期肝病,而终末期肝病目前唯一有效的治疗方法就是原位肝移植。然而,由于受供体肝脏短缺等因素的限制,细胞治疗方法一直被临床上所期待。近年来,基于谱系重编程的诱导型肝干细胞和诱导型肝实质细胞的技术体系的出现,为解决肝脏疾病细胞治疗中细胞来源匮乏的问题提供了新的思路,也加速了肝脏疾病细胞治疗研究向临床转化的进程。该文介绍了肝脏疾病细胞治疗研究中供体细胞来源的现状,并重点介绍了谱系重编程获取肝系细胞的研究进展。

关键词：终末期肝病细胞移植肝实质细胞肝脏干细胞谱系重编程

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用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 145-147页

作者：胡火珍李丹李小玉姚玉成胡以平四川大学华西基础医学与法医学院细胞生物学教研室成都610041 上海第二军医大学细胞生物学教研室

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ... 详细信息

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ,与雌鼠交配 ,用 PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源 DNA和肝组织中表达的 p X蛋白。结果　测序结果与文献报道一致 ,并且 X基因在 Hela细胞中表达 ;共产仔鼠 16只 ,其中 1只为阳性仔鼠 ,阳性率为 6 .2 5 %。结论　初步证明用精原干细胞介导法制备

关键词：乙肝病毒X基因转基因小鼠精原细胞

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提高细胞重编程效率和安全性的策略

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中国细胞生物学学报 2016年第11期38卷 1391-1397页

作者：虞欣璐张红霞王辰于斌朱海英第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

细胞重编程是指分化的细胞在特定条件下经过去分化恢复到全能性或多能性状态,或者通过转分化将一种类型的体细胞转变成另外一种类型的细胞的过程。利用重编程技术获得的诱导型多能干细胞,谱系重编程技术获得的组织干细胞或组织细胞,具... 详细信息

细胞重编程是指分化的细胞在特定条件下经过去分化恢复到全能性或多能性状态,或者通过转分化将一种类型的体细胞转变成另外一种类型的细胞的过程。利用重编程技术获得的诱导型多能干细胞,谱系重编程技术获得的组织干细胞或组织细胞,具有患者特异性或者疾病特异性,可以显著减少免疫反应,同时也解决了临床细胞治疗的种子细胞来源问题,具有极大的临床应用价值。但是,另一方面,重编程效率低下和安全性问题却一直是其临床应用的瓶颈。近年来,人们围绕如何优化重编程方法进行了深入的研究,特别是对细胞重编程过程所涉及到的分子机制,包括表观遗传调控机制和上皮间质转化机制在这个过程中的作用有了更深入的认识。此外,采用非整合型载体和利用化学诱导方法替代转录因子的方式也提高了重编程的安全性。该文将就这一领域的研究进展作一综述。

关键词：细胞重编程诱导型多能干细胞谱系重编程化学诱导表观遗传调控

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组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 205-208页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并... 详细信息

目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶酵母双杂合系统质粒克隆

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层粘连蛋白总糖肽增强巨噬细胞肿瘤杀伤功能的机制探讨

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 222-224页

作者：刘艺萍周柔丽张莎第二军医大学基础医学部生物学教研室北京医科大学细胞生物学教研室

目的：探讨层粘连蛋白总糖肽（ＬＮ－Ｇｐｓ）增强巨噬细胞（Ｍφ）杀伤黑色素瘤Ｂ１６－ＭＢＫ细胞作用的机制。方法：将细菌脂多糖（ＬＰＳ，５ＥＵ／ｍｌ），甘露聚糖（Ｍａｎｎａｎ，１０ｍｇ／ｍｌ），ＬＮ－Ｇｐｓ（２００μｇ／... 详细信息

目的：探讨层粘连蛋白总糖肽（ＬＮ－Ｇｐｓ）增强巨噬细胞（Ｍφ）杀伤黑色素瘤Ｂ１６－ＭＢＫ细胞作用的机制。方法：将细菌脂多糖（ＬＰＳ，５ＥＵ／ｍｌ），甘露聚糖（Ｍａｎｎａｎ，１０ｍｇ／ｍｌ），ＬＮ－Ｇｐｓ（２００μｇ／ｍｌ）及ＰＢＳ（对照），１００μｌ／孔，分别刺激小鼠腹腔Ｍφ，并于持续刺激６，８，１６，２４，３２，４０ｈ后观察Ｍφ对Ｂ１６细胞的直接杀伤作用及其条件培养基对Ｂ１６细胞的杀伤作用。结果：Ｍφ经各种刺激作用１６ｈ后，对Ｂ１６细胞总的杀伤率各组无显著差异；各组在刺激后各时间里Ｍφ对Ｂ１６细胞的直接杀伤率的动态变化相似。但各种刺激时间后收集的条件培养基对Ｂ１６细胞的杀伤率动态曲线明显不同，ＬＰＳ及Ｍａｎｎａｎ刺激后，以６ｈ的条件培养基杀伤作用最强（Ｐ＜０．０５），８ｈ后回到对照水平，而ＬＮ－Ｇｐｓ组则在刺激１６ｈ后逐渐增强，４０ｈ达到高峰。结论：ＬＮ－Ｇｐｓ可刺激Ｍφ分泌一些可溶性物质杀伤Ｂ１６细胞，此作用机制与其所含高甘露糖型糖链结构无关，与ＬＰＳ的作用也明显不同。

关键词：层粘连蛋白糖肽巨噬细胞肿瘤细胞杀伤

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心理性应激引起的大鼠行为,血浆皮质酮及脑区氨基酸水平的变化

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 330-333页

作者：严进王春安陈宜张徐仁宝第二军医大学基础医学部生理学教研室第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ... 详细信息

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射性配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验（Ｏｐｅｎ－ｆｉｅｌｄｔｅｓｔ）分别测定大鼠心理应激时血浆皮质酮、脑区氨基酸水平和行为的变化。结果：在血浆皮质酮能够分化心理应激的实验参数条件下，电击刺激时，主要引起视皮质氨基酸水平的变化；而仅给予条件刺激（光）引起心理应激时，可在视皮质、海马和下丘脑３个脑区不同程度地出现谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸水平的变化，并以海马最明显。同时动物运动行为减少，类似抑郁样表现。结论：心理应激反应时，谷氨酸、γ－氨基丁酸和牛磺酸等脑内氨基酸的变化，可能与心理应激引起的抑郁样行为有关。

关键词：心理应激皮质酮氨基酸

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