检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1995年第5期16卷 405-408页

作者：潘卫戚中田崔晓红印慨宋燕斌杜平第二军医大学基础医学部微生物学教研室

用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５＇端非编码区（５＇－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５＇－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性... 详细信息

用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５＇端非编码区（５＇－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５＇－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性丙型肝炎患者的血清标本中的阳性率为８１．８％（９／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的血液透析患者血清标本中的阳性率为６３．６％（７／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的献血员血清标本中的阳性率为２０％（４／２０），在ＨＣＶ抗体阳性的肝细胞癌标本中的阳性率为１００％（５／５），在ＨＣＶ抗体阴性的肝细胞癌标本中的阳性率为３３．３％（７／２１）。表明ＨＣＶ的体内复制情况在各高危风险人群中的情况有明显差别；提示ＨＣＶ感染也是我国肝细胞癌发生的重要风险因子之一。

关键词：丙型肝炎病毒多聚酶链反应核苷酸序列

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a的制备及纯化

引用

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 324-327页

作者：王梁华焦炳华第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：制备符合临床应用标准的高纯度重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）。方法：高效表达ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ的Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌经过超声破碎、硫酸铵分段盐析、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００层析，得到电泳... 详细信息

目的：制备符合临床应用标准的高纯度重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）。方法：高效表达ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ的Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌经过超声破碎、硫酸铵分段盐析、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００层析，得到电泳纯ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ，其比活性为１．８８×１０８ＩＵ／ｍｇ。进一步超滤浓缩，ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０纯化，比活性达２×１０８ＩＵ／ｍｇ。结果：纯度＞９８．２％，回收率约为６５％，内毒素＜２Ｅｕ·（１０６ＩＵ）－１·ｍｌ－１。结论：建立了适宜的ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ纯化方法，连续三批原料和制剂通过国家卫生部药品生物制品检定所检定，符合ＷＨＯ有关基因工程产品临床用药标准，为过渡到临床验证打下了基础。

关键词：肿瘤坏死因子衍生物纯化制备 rh-TNFαD3a

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人丙型肝炎病毒囊膜蛋白2HVR_1 cDNA的序列分析

引用

第二军医大学学报 1997年第3期18卷 208-211页

作者：方芳潘卫崔晓红宋艳斌朱诗应戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：了解中国ＨＣＶ流行株高变区１（ＨＶＲ１）的特点。方法：对来自山东（ＳＤ）、上海（ＳＨ）两地患者血清ＲＮＡ进行逆转录－巢式ＰＣＲ，扩增ＨＣＶ囊膜蛋白２基因片段，用ＰＣＲ直接测序法对该片段进行序列测定。结果：（１）... 详细信息

目的：了解中国ＨＣＶ流行株高变区１（ＨＶＲ１）的特点。方法：对来自山东（ＳＤ）、上海（ＳＨ）两地患者血清ＲＮＡ进行逆转录－巢式ＰＣＲ，扩增ＨＣＶ囊膜蛋白２基因片段，用ＰＣＲ直接测序法对该片段进行序列测定。结果：（１）扩增片段（命名为Ｐ３８８）对应于日本ＨＣＶ－Ｊ株序列核苷酸１４３９～１８２６位（氨基酸位３７１～４９８）；（２）中国人ＨＣＶＨＶＲ１位于氨基酸位３８４～４１０，与发表的ＨＣＶＩＩ型ＨＶＲ１的氨基酸位点相同；（３）与ＨＣＶ－Ｊ、美国ＨＣＶ－１及已发表的中国河北、上海株相比，ＳＤ、ＳＨ株Ｐ３８８片段与ＨＣＶ－１株的核苷酸及氨基酸的异源性最高，比较各株ＨＶＲ１核苷酸序列也与上述结果一致；（４）ＨＶＲ１基因有义突变率相当高。结论：中国ＨＣＶ流行株存在ＨＶＲ１，其基因变异程度及有义突变率高，对研究ＨＣＶ感染及进行免疫预防有重要的意义。

关键词：丙型肝炎病毒囊膜蛋白2 DNA序列基因片段

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

天然内毒素制剂中S－和R－类脂A的理化特性

引用

第二军医大学学报 1995年第2期16卷 119-122页

作者：焦炳华徐道荣王梁华朱玉平娄永华周炳荣第二军医大学基础医学部微生物学教研室

天然马流产杆菌内毒素（脂多糖）经有机溶剂萃取后分离为光滑型（Ｓ）－和粗糙型（Ｒ）－亚组分，并制备了相应的类脂Ａ。由Ｓ－亚组分衍生的类脂Ａ（Ｓ－ＬｉＰＡ）表现出极高的水溶性，而由Ｒ－亚组分衍生的类脂Ａ（Ｒ－ＬｉｐＡ）的... 详细信息

天然马流产杆菌内毒素（脂多糖）经有机溶剂萃取后分离为光滑型（Ｓ）－和粗糙型（Ｒ）－亚组分，并制备了相应的类脂Ａ。由Ｓ－亚组分衍生的类脂Ａ（Ｓ－ＬｉＰＡ）表现出极高的水溶性，而由Ｒ－亚组分衍生的类脂Ａ（Ｒ－ＬｉｐＡ）的溶解度较差。化学分析表明Ｒ－ＬｉｐＡ属于完全脂酰化的分子，其结构与天然Ｒ－突变株产生的类脂Ａ完全相同，而Ｓ－ＬｉｐＡ属低度脂酰化（６０％）的分子，并在其分子上发现有游离氨基存在。本研究对从分子水平上了解类脂Ａ结构与功能的关系具有重要的意义。

关键词：内毒素类脂A 理化特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用Fura-2测定单个巨噬细胞内游离钙的条件的优化

引用

第二军医大学学报 2002年第3期23卷 341-343页

作者：朱晓燕韩建中娄淑杰严进徐仁宝第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部基础医学部神经生物学教研室

Fura-2负载后用荧光显微镜成像系统研究单细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i)应用已十分广泛，娄淑杰等用此方法检测了PC12细胞内的[Ca~(2+)]i，我们将娄淑杰等的方法应用于腹腔巨噬细胞（PEM），发现不尽理想，因此我们实验过程中对Fur... 详细信息

Fura-2负载后用荧光显微镜成像系统研究单细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i)应用已十分广泛，娄淑杰等用此方法检测了PC12细胞内的[Ca~(2+)]i，我们将娄淑杰等的方法应用于腹腔巨噬细胞（PEM），发现不尽理想，因此我们实验过程中对Fura-2的浓度进行了调整，另外PEM作为参与炎症的非兴奋细胞，其活化对[Ca~(2+)]i有很大的影响，而细胞贴壁很可能导致活化，但测定方法又要求只能在贴壁细胞进行。因此，我们使用鼠尾胶缩短贴壁时间，并把检测用的PEM的贴壁时间控制在一定范围之内。取得了比较理想的结果。

关键词： Fura-2 巨噬细胞钙测定优化 PEM

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人白细胞介素2的抗原特性鉴定和部分氨基酸序列分析

引用

第二军医大学学报 1994年第6期15卷 525-527页

作者：郑杭民杜平戚中田曹广文杨文国第二军医大学基础医学部微生物学教研室

以包含体形式由大肠杆菌表达的基因重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２），经纯化后其纯度已达９５％以上［１］。我们采用免疫印迹法和部分氨基酸序列分析等较特异、敏感和准确的检测手段，对纯化ｒｈＩＬ－２的抗原特性和Ｎ末端１５个... 详细信息

以包含体形式由大肠杆菌表达的基因重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２），经纯化后其纯度已达９５％以上［１］。我们采用免疫印迹法和部分氨基酸序列分析等较特异、敏感和准确的检测手段，对纯化ｒｈＩＬ－２的抗原特性和Ｎ末端１５个氨基酸序列进行检测分析，获得了满意的结果。

关键词：白细胞介素2 免疫印迹法氨基酸序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RT－PCR检测HCV　RNA假阳性结果分析

引用

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 391-392页

作者：宋燕斌崔晓红潘卫王锦红戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测... 详细信息

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...

关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应假阳性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析

引用

第二军医大学学报 1997年第4期18卷 309-312页

作者：缪为民陈建鹤王梁华周丙荣娄永华焦炳华第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲... 详细信息

目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲和层析法纯化，用Ⅹａ因子酶切，去除载体多肽，然后进行Ｎ末端２０个氨基酸顺序分析。结果和结论：氨基酸序列符合预想突变序列，即发生下列氨基酸替换：８０位Ｉｌｅ→Ｓｅｒ，９０位Ｌｙｓ→Ｈｉｓ，９２位Ａｓｎ→Ｖａｌ。

关键词：肿瘤坏死因子衍生物突变氨基酸顺序

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠的表型分析

引用

第二军医大学学报 2003年第2期24卷 155-158页

作者：熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学东方肝胆外科医院病理科

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组... 详细信息

目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组织中均有表达 ,从 F0 代到 F3代小鼠 ,X蛋白在肝细胞中的分布逐渐从细胞质向细胞核转移。病理学分析显示 ,表达 X蛋白的转基因小鼠出现了皮肤组织结构异常、肝组织和肺组织轻度变性等病理学变化。结论 :乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤等组织中表达 X蛋白 ,部分转基因小鼠出现的皮肤组织、肝组织和肺组织病理性损伤可能与 X蛋白有关 ;各代转基因小鼠肝细胞中 X蛋白的分布具有规律性的变化 ,可用于研究

关键词：乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠病理学免疫组织化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

噬菌体展示protein A及protein L Ig结合单结构域随机组合文库及Ig亲和筛选

引用

生物化学与生物物理进展 2005年第6期32卷 535-543页

作者：徐容沈毅臖邓松华蔡春晓陈秋莉贾建安王锦红潘欣潘卫安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,... 详细信息

ProteinA和proteinL是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含SacⅠ位点的特定引物PCR分别扩增制备proteinA的A、B、C、D抗体结合结构域和proteinL的B3抗体结合结构域,各结构域DNA片段经SacⅠ酶切后,再随机连接形成各种不同长度的分子组合文库,将该文库呈现在噬菌体表面构建了噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库,所建组合文库容量为2.3×106个菌落形成单位,滴度为4.1×1011TU/ml,包含各种单结构域片段,并以随机方式连接.用人Ig对该文库进行4轮亲和筛选,随机挑选36个代表性的阳性克隆进行序列测定分析表明,亲和筛选获得了多种非天然形式存在的新的Ig结合分子结构,其中32个克隆具有由proteinL的单结构域和proteinA的单结构域间隔重复排列而成的特征性(MDPL-MDPA)n结构.对噬菌体展示Ig结合分子单结构域随机组合文库的体外分子进化研究的尝试,为Ig结合分子的结构和功能研究提供了一新的途径,也为Ig结合分子的定向改造打下基础.

关键词：噬菌体展示分子进化结构域组合文库 protein A protein L

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：