检索结果-内蒙古大学图书馆

供肝冷保存再灌注期间核因子 NF-κB和抑制蛋白 IκBs的变化及其意义

第二军医大学学报 2002年第5期23卷 511-514页

作者：曹云飞俞卫锋朱海英杨立群武圣明吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研究肝移植期间供肝组织中核因子 NF-κB的激活特征及其活性调控机制。方法 :改良 Kamada法建立大鼠原位肝脏移植模型 ,按供肝在 4℃乳酸林格液中的冷保存时间 ,实验分冷保存 2 h组和 6 h组 ,凝胶迁移率改变分析法 (EMSA)和 West... 详细信息

目的 :研究肝移植期间供肝组织中核因子 NF-κB的激活特征及其活性调控机制。方法 :改良 Kamada法建立大鼠原位肝脏移植模型 ,按供肝在 4℃乳酸林格液中的冷保存时间 ,实验分冷保存 2 h组和 6 h组 ,凝胶迁移率改变分析法 (EMSA)和 Western印迹法测定移植期间不同时相供肝组织中 NF-κB的活性变化及其主要抑制蛋白 IκB-α、IκB-β的表达水平。结果 :两组供肝组织在冷缺血保存期间其 NF-κB活性与正常肝组织相比无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,再灌注后 30 m in至 6 h两组的 NF-κB活性均出现显著的诱导激活 (P<0 .0 1) ,其中冷保存 2 h组供肝组织的 NF-κB活性高峰出现在再灌注 1h;而冷保存 6 h组在再灌注 30 min即达到活性高峰 ,并维持在较高的激活水平 ;供肝组织中抑制蛋白 IκB-α的含量显著高于 IκB-β,两组的 IκB-α蛋白在再灌注 30 min至 1h均有明显降解 (P<0 .0 5 ) ,而 IκB-β蛋白仅在冷保存 6 h组有较明显的降解 (再灌注 30 m in)。结论 :核因子 NF- κB仅在供肝的再灌注早期呈诱导性激活 ,其激活特征与供肝的冷保存再灌注损伤有关 ,抑制蛋白 IκB- α在供肝的 NF-

关键词：肝移植再灌注损伤抑制蛋白IкBs 活性调控机制动物实验冷保存核因子NF-к

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

缺血性急性肾衰病程中cyclinE和CDK2的作用

引用

第二军医大学学报 2002年第7期23卷 745-748页

作者：傅鹏崔若兰袁伟杰于光苏红戴建新孙树汉第二军医大学长海医院肾内科上海200433 第二军医大学长海医院基础医学部医学遗传学教研室

目的 :探讨 cyclin E和周期素依赖性激酶 2 (CDK2 )在缺血性急性肾衰大鼠肾组织中的表达及其与肾小管上皮细胞增殖之间的关系。方法 :急性肾衰大鼠分别在第 0、2、7、10、14天处死 ,取血测定肌酐值 ,免疫组化法观察肾细胞增殖程度以及 ... 详细信息

目的 :探讨 cyclin E和周期素依赖性激酶 2 (CDK2 )在缺血性急性肾衰大鼠肾组织中的表达及其与肾小管上皮细胞增殖之间的关系。方法 :急性肾衰大鼠分别在第 0、2、7、10、14天处死 ,取血测定肌酐值 ,免疫组化法观察肾细胞增殖程度以及 cyclin E和 CDK 2的分布 ,蛋白印迹法检测肾组织中 cyclin E和 CDK2蛋白表达。结果 :大鼠血清肌酐值在缺血再灌注第2天时显著增高 ,第 7天时最高 ,第 10天时开始降低 ,第 14天时基本降至正常。对照组肾组织的细胞增殖指数 (PI)为 0 .7% ,肾缺血后第 2、7、10和 14天分别为 14 .8%、30 .9%、2 3.6 %和 12 .4 %。 Cyclin E和 CDK2蛋白在肾组织内主要分布于肾小管 ,且第 2天表达弱阳性 ,第 7和 10天表达分别为强阳性和阳性 ,第 14天表达减弱 ;两种蛋白的水平与免疫组化结果一致。两种蛋白表达水平和 PI之间均呈正相关。结论 :缺血性急性肾衰大鼠肾小管上皮细胞增殖与肾组织 cyclin E和 CDK2表达上调密切相关。

关键词：急性肾功能衰竭细胞周期蛋白E 细胞周期蛋白依赖性激酶2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核因子kB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用

引用

第二军医大学学报 2002年第7期23卷 741-744页

作者：俞卫锋曹云飞朱海英杨立群武圣明第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科上海200438 基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研究 NF-κB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用。方法 :改良 Kam ada法建立同种大鼠原位肝脏移植模型 ,实验分对照组和二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,对照组供肝于 4℃乳酸林格液中保存 6 h,PDTC组供肝于乳酸林格冷保存... 详细信息

目的 :研究 NF-κB活性抑制对再灌注早期供肝损伤的保护作用。方法 :改良 Kam ada法建立同种大鼠原位肝脏移植模型 ,实验分对照组和二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,对照组供肝于 4℃乳酸林格液中保存 6 h,PDTC组供肝于乳酸林格冷保存液中加入 0 .1mol/L PDTC,于再灌注早期分析测定供肝组织中 NF-κB的结合活性 (EMSA法 )、TNF-α和 ICAM- 1的 m R-NA转录水平 (RT- PCR)以及 AL T和 L DH的活性变化。结果 :供肝组织的 NF-κB在移植后再灌注早期明显激活 ;再灌注 1h,PDTC组的 NF-κB活性较对照组显著降低 ,但 6 h后两组 NF-κB活性未见明显差异。再灌注早期 TNF-α和 ICAM- 1m RNA转录水平上调以及 AL T和 L DH活性升高 ,但 PDTC组明显低于对照组 (P<0 .0 5 )。结论 :供肝组织中 NF- κB的活性抑制可显著降低再灌注早期供肝组织中炎症介质的转录表达 ,并有效改善供肝的再灌注损伤。针对 NF- κB的靶向治疗可能是供肝保护的一条新途径。

关键词：肝移植 NF-κB 再灌注损伤保护作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胰腺癌患者外周血游离K-ras基因突变检测的临床意义

引用

第二军医大学学报 2002年第3期23卷 276-278页

作者：王文耀胡先贵曹贵松唐岩孙树汉胡育新第二军医大学长海医院普通外科上海200433 第二军医大学长海医院基础医学部医学遗传学教研室长海医院肿瘤科

目的 :通过检测胰腺癌患者外周血中游离 K- ras基因突变 ,探索无创性胰腺癌诊断的新方法。方法 :采用两步法聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 ( PCR- RFL P)技术 ,部分样本行 DNA直接测序确证 ,检测胰腺良性病变患者 ( 11例 )... 详细信息

目的 :通过检测胰腺癌患者外周血中游离 K- ras基因突变 ,探索无创性胰腺癌诊断的新方法。方法 :采用两步法聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 ( PCR- RFL P)技术 ,部分样本行 DNA直接测序确证 ,检测胰腺良性病变患者 ( 11例 )血浆、恶性病变患者 ( 3 0例 )血浆及肿瘤组织 K- ras基因的突变情况。对照组为 8例慢性胰腺炎和 3例胆石症患者。结果 :胰腺癌和慢性胰腺炎病例外周血 K- ras基因突变率分别为 60 .0 % ( 18/ 3 0 )和 12 .5 % ( 1/ 8) ,3例胆石症未见 K- ras基因突变。其中肿瘤组织 K- ras基因突变阳性病例外周血检测阳性率为 69.6% ( 16/ 2 3 )。结论 :胰腺癌患者外周血游离 K-

关键词：胰腺肿瘤血浆 K-ras基因聚合酶链反应基因突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠神经细胞p35^(nck5a)基因5′非编码区基因表达调控功能初步研究

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 147-149页

作者：朱海英周常文王秀凤傅继梁李建秀王新民胡以平第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 山东省东营市环保科研所基础医学部细胞生物学教研室

目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小... 详细信息

目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小鼠实验体系来观察该片段在体内、外基因表达调控的差异。结果 :体外培养细胞中 p35 nck5a基因 5′侧翼序列不具有决定报告基因神经特异性表达的能力 ,但在基因组中整合有相同表达载体的转基因小鼠体内却能够指导报告基因的神经限制性表达。结论 :这种差异提示进行体内。

关键词： p35^nck5a基因小鼠转基因基因表达调控神经细胞 AD病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

绿色荧光蛋白基因在小鼠胚胎干细胞中表达效率的影响因素分析

引用

第二军医大学学报 2001年第4期22卷 319-321页

作者：杨桦戴建新戴旭明傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因在小鼠胚胎干细胞系 R1中表达的影响因素。方法 :构建 3个不同的 GFP真核表达载体 ,并从转录、蛋白表达水平比较了它们整合于宿主细胞染色体中的表达效率。结果 :在 GFP蛋白表达水平上 ,含肽链延长因子... 详细信息

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因在小鼠胚胎干细胞系 R1中表达的影响因素。方法 :构建 3个不同的 GFP真核表达载体 ,并从转录、蛋白表达水平比较了它们整合于宿主细胞染色体中的表达效率。结果 :在 GFP蛋白表达水平上 ,含肽链延长因子 (EF)启动子的表达载体和所转染的克隆明显高于含 CMV启动子及含双拷贝 CMV - GFP表达单元的表达载体 ;而p CMV- GFP和 pd CMV - GFP所转染的克隆之间无显著差别 ;NIH3T3和 ES细胞之间比较 ,GFP的表达水平无显著差异。转录水平与蛋白质水平的测定结果相一致。结论 :(1)在 NIH 3T3和 R1胚胎干细胞系中 ,EF启动子引导下的 GFP基因表达效率明显高于 CMV启动子 ;(2 )外源基因表达单元的拷贝数在染色体中的少量增加 ,不能明显提高表达效率 ;(3)获得了在 R1胚胎干细胞系中稳定、高效表达 GFP的载体 ,为后续工作奠定了基础。

关键词：绿色荧光蛋白胚胎干细胞基因表达影响因素小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白

引用

第二军医大学学报 2001年第6期22卷 542-545,T002页

作者：胡振林孙树汉戴建新周凤娟第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性... 详细信息

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性克隆以电泳迁移率变动分析 (EMSA )进行验证。结果 :已获得 4个双阳性克隆 ,其中两个编码功能未知的蛋白 ,而另外两个均属抗体轻链 ,分别与抗 DNA抗体和抗乙肝表面抗原抗体 (HBs Ab)高度同源 ;EMSA发现 HBs Ab可在偏酸 p H条件下 (p H6 .4和 5 .8时 )特异性地与含 ISS的寡核苷酸 (Cp G- ODN)结合。结论 :HBs Ab可与

关键词： CpG免疫激活序列酶母单杂交系统免疫球蛋白特异性结合蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于Cre重组酶体系的小鼠HPRT定点整合打靶载体的构建及其应用

引用

第二军医大学学报 2001年第6期22卷 538-541页

作者：郑敬民李坚杨桦傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :构建带有 Cre重组酶识别位点变异体 lox6 6的针对小鼠 HPRT基因的基因打靶载体 ,并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法 :利用含 HPRT基因组 DNA片段的质粒 p MP8和人工合成含 lox6 6序列的寡核苷酸 ,构建含 Cre重组酶识别位点... 详细信息

目的 :构建带有 Cre重组酶识别位点变异体 lox6 6的针对小鼠 HPRT基因的基因打靶载体 ,并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法 :利用含 HPRT基因组 DNA片段的质粒 p MP8和人工合成含 lox6 6序列的寡核苷酸 ,构建含 Cre重组酶识别位点变异体 lox6 6的置换型打靶载体 ,经过限制性内切酶酶切鉴定其结构正确后 ,用电穿孔法对小鼠胚胎干细胞 R1株进行基因转染 ,经 G418/ 6 - TG(6 - thioguanine)分组药物筛选 ,进行 p SP- HPRT- lox6 6 - Neo载体的应用研究。结果 :得到了与设计一致的置换型打靶载体 p SP- HPRT- lox6 6 - Neo;将线性化的打靶载体导入 ES细胞后 ,能与靶位点有效地发生同源重组 ,获得了 2 0个靶基因被灭活了的 ES细胞克隆。结论 :此研究成功构建了含 Cre重组酶识别位点变异体 lox6 6针对小鼠 HPRT基因位点的置换型打靶载体。

关键词：基因打靶胚胎干细胞 HPRT基因 Cre重组酶小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系的生物学特性

引用

第二军医大学学报 2001年第4期22卷 322-324页

作者：杨桦傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)在小鼠胚胎干细胞系 R1中整合并高效稳定表达后对宿主细胞生物学特性的影响。方法 :从生长曲线、碱性磷酸酶表达水平、正常核型率及体内多向分化能力等 4个方面 ,对整合有 GFP高效表达载体的 R1ES细胞亚克... 详细信息

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)在小鼠胚胎干细胞系 R1中整合并高效稳定表达后对宿主细胞生物学特性的影响。方法 :从生长曲线、碱性磷酸酶表达水平、正常核型率及体内多向分化能力等 4个方面 ,对整合有 GFP高效表达载体的 R1ES细胞亚克隆 ,进行生物学特性的比较分析。结果 :R1ES细胞与 4个高效稳定表达 GFP的 ES细胞克隆在细胞增殖速率、分化状态及正常核型率上均无显著差异 ;将 GFP(+ ) ES细胞接种裸鼠后 ,均可有效形成含有 3个胚层细胞的畸胎瘤。结论 :外源基因 GFP在 R1ES细胞中的整合及稳定高效表达对于 ES细胞的基本生物学特性无明显影响 ,为有效利用 GFP进行 ES细胞体内的示踪研究提供了保障。

关键词：绿色荧光蛋白胚胎干细胞生物学特性小鼠基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用生物信息学发现一种新的抗凝血蛋白——Annexin 32

利用生物信息学发现一种新的抗凝血蛋白——Annexin 32

引用

中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会

作者：颜宏利孙树汉陈蕊雯第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的:cC1是孙树汉等利用免疫筛选的方法,从自行构建的猪囊尾蚴cDNA文库中克隆到的一个保护性抗原。大量的实验结果表明,以cC1cDNA为目的基因构建的核酸疫苗p3-cC1具有较好的免疫保护效果;近来还发现,共表达cC1和猪γ-IFN融合蛋白的核酸... 详细信息

目的:cC1是孙树汉等利用免疫筛选的方法,从自行构建的猪囊尾蚴cDNA文库中克隆到的一个保护性抗原。大量的实验结果表明,以cC1cDNA为目的基因构建的核酸疫苗p3-cC1具有较好的免疫保护效果;近来还发现,共表达cC1和猪γ-IFN融合蛋白的核酸疫苗pcDNA3-γ(编码猪γ干扰素和cC1)接种己感染囊尾蚴的仔猪,可以诱导部分囊尾蚴细胞的凋亡。为深入探讨cC1的结构、功能及其在上述凋亡现象中的作用,利用网上的多种生物信息学分析软件,对cC1进行了结构分析和功能预测。

关键词：联蛋白抗凝血蛋白 Annexin 32 抗凝血活性生物信息学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：