检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2002年第4期23卷 353-354页

作者：孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于... 详细信息

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗,这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原,刺激机体产生特异而有效的免疫应答,尤其是能诱导产生具细胞毒杀伤性功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生细菌和寄生虫所引起的传染病.核酸疫苗由于具有可诱发全面的免疫应答、提供同种异株交叉保护作用、能制备抗多种病原体的多价疫苗、兼有预防和治疗的作用等优点,且制备简单、成本较低、容易储存运输,自上世纪90年代初问世以来,已在多种疾病[1～3]的防治研究中显示出巨大的应用潜力.在美国,目前乙肝病毒、HIV 核酸疫苗、流感DNA疫苗、单纯疱疹病毒DNA疫苗已进入Ⅱ期临床研究,疟疾DNA 疫苗已进入Ⅲ期临床研究.在我国,某些兽用疫苗也已进入应用研究阶段.然而核酸疫苗是一个新生事物,围绕着增强核酸疫苗的免疫效果和安全性、改善纯化工艺等国际热点问题,在理论上还没有真正得到解决.这些问题大大限制了核酸疫苗的推广应用.

关键词：核酸疫苗免疫应答安全性应用研究免疫效果

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Annexin32的酵母表达及免疫原性分析

引用

第二军医大学学报 2002年第8期23卷 822-824页

作者：杨湘越张毅颜宏利陈蕊雯武圣明孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :在毕赤酵母中表达 Annexin32并研究其功能。方法 :用 G4 18法快速筛选出的 9个高拷贝转化子 ,经平板培养法 (MD和 MM)及 PCR鉴定表型后 ,分别在 BMMY、BMM、MM 3种培养基中以甲醇诱导表达 ,培养上清行 SDS- PAGE和Western印迹鉴... 详细信息

目的 :在毕赤酵母中表达 Annexin32并研究其功能。方法 :用 G4 18法快速筛选出的 9个高拷贝转化子 ,经平板培养法 (MD和 MM)及 PCR鉴定表型后 ,分别在 BMMY、BMM、MM 3种培养基中以甲醇诱导表达 ,培养上清行 SDS- PAGE和Western印迹鉴定 ,用 (NH4 ) 2 SO4 +PI法沉淀 ,过 FPL C- Superdex75分子筛纯化蛋白并以此免疫小鼠。结果 :有两个表型为Muts的高拷贝转化菌表达量较高 ,以 BMMY为优 ,表达产物有两条带 ,相对分子质量分别约为 3.8万和 4万 ,占分泌总蛋白的 80 %以上 ,产物浓度为 2 0 0～ 35 0 m g/ L。Western印迹证实两条表达产物均具有天然 Annexin32分子的免疫原性。动物实验证明 ,酵母表达的 Annexin32的免疫原性明显高于原核表达者。结论 :在毕赤酵母中成功表达了 Annexin32 。

关键词： Annexin32 酵母表达免疫原性毕赤酵母基因表达膜联蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

绿色荧光蛋白基因在小鼠胚胎干细胞中表达效率的影响因素分析

引用

第二军医大学学报 2001年第4期22卷 319-321页

作者：杨桦戴建新戴旭明傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因在小鼠胚胎干细胞系 R1中表达的影响因素。方法 :构建 3个不同的 GFP真核表达载体 ,并从转录、蛋白表达水平比较了它们整合于宿主细胞染色体中的表达效率。结果 :在 GFP蛋白表达水平上 ,含肽链延长因子... 详细信息

目的 :研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因在小鼠胚胎干细胞系 R1中表达的影响因素。方法 :构建 3个不同的 GFP真核表达载体 ,并从转录、蛋白表达水平比较了它们整合于宿主细胞染色体中的表达效率。结果 :在 GFP蛋白表达水平上 ,含肽链延长因子 (EF)启动子的表达载体和所转染的克隆明显高于含 CMV启动子及含双拷贝 CMV - GFP表达单元的表达载体 ;而p CMV- GFP和 pd CMV - GFP所转染的克隆之间无显著差别 ;NIH3T3和 ES细胞之间比较 ,GFP的表达水平无显著差异。转录水平与蛋白质水平的测定结果相一致。结论 :(1)在 NIH 3T3和 R1胚胎干细胞系中 ,EF启动子引导下的 GFP基因表达效率明显高于 CMV启动子 ;(2 )外源基因表达单元的拷贝数在染色体中的少量增加 ,不能明显提高表达效率 ;(3)获得了在 R1胚胎干细胞系中稳定、高效表达 GFP的载体 ,为后续工作奠定了基础。

关键词：绿色荧光蛋白胚胎干细胞基因表达影响因素小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高密度培养大肠杆菌生产重组钩端螺旋体DNA疫苗

引用

第二军医大学学报 2002年第8期23卷 828-829页

作者：林懿陈祖欢郭瀛军孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :高密度、高质粒拷贝数培养大肠杆菌生产重组 DNA疫苗 pc D- fla B。方法 :应用 FU S- 5 L自控发酵罐 ,采用补料分批培养技术 ,控制补料的补加使溶氧控制在 30 %～ 6 0 % ,p H控制在 7左右 ,培养中后期采用 4 2℃培养以提高质粒... 详细信息

目的 :高密度、高质粒拷贝数培养大肠杆菌生产重组 DNA疫苗 pc D- fla B。方法 :应用 FU S- 5 L自控发酵罐 ,采用补料分批培养技术 ,控制补料的补加使溶氧控制在 30 %～ 6 0 % ,p H控制在 7左右 ,培养中后期采用 4 2℃培养以提高质粒拷贝数。结果 :重组菌 *** DH5α/ pc DNA 3- fla B发酵液光密度 (D6 0 0 )达到 4 5。经纯化后最终质粒 DNA得率为 5 0 m g/ L。质粒没有发生丢失现象。结论 :本实验为钩端螺旋体 DNA疫苗的大规模生产奠定了基础。

关键词：钩端螺旋体 DNA疫苗大肠杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙肝表面抗原核酸疫苗的构建及其与宿主染色体整合的可能性分析

引用

第二军医大学学报 2002年第8期23卷 816-818页

作者：周凤娟胡振林戴建新孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :构建乙肝表面抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内整合到宿主细胞基因组上的可能性。方法 :采用PCR法扩增乙肝病毒的 S基因片段后装入 p VAX载体 ,并以此为候选疫苗免疫 (BAL B/c)小鼠 ,在不同时间、不同部位取其组织抽提基因... 详细信息

目的 :构建乙肝表面抗原 DNA疫苗 ,并探讨其在实验动物体内整合到宿主细胞基因组上的可能性。方法 :采用PCR法扩增乙肝病毒的 S基因片段后装入 p VAX载体 ,并以此为候选疫苗免疫 (BAL B/c)小鼠 ,在不同时间、不同部位取其组织抽提基因组 DNA,用 PCR检测 DNA整合情况。结果 :构建了乙肝核酸疫苗 p VAX- HBs Ag。免疫接种该疫苗第 3周时在小鼠肌肉、肝脏、脾脏、胸腺均有不同量的游离质粒存在 ;第 6周除在股四头肌可检测到外 ,其余组织中均为阴性 ;第 12、18周时检测所有组织中均为阴性。结论 :构建的 p VAX- HBs Ag DNA疫苗在小鼠体内无染色体整合。

关键词：乙型肝炎表面抗原核酸疫苗 DNA疫苗宿主染色体整合

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白

引用

第二军医大学学报 2001年第6期22卷 542-545,T002页

作者：胡振林孙树汉戴建新周凤娟第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性... 详细信息

目的 :寻找与 Cp G免疫激活序列 (imm unostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白 ,以进一步探讨其分子作用机制。方法 :采用酵母单杂交系统 ,以 4重复的 ISS为“诱饵”,对人骨髓细胞 c DNA文库进行初步筛选 ,并对部分阳性克隆以电泳迁移率变动分析 (EMSA )进行验证。结果 :已获得 4个双阳性克隆 ,其中两个编码功能未知的蛋白 ,而另外两个均属抗体轻链 ,分别与抗 DNA抗体和抗乙肝表面抗原抗体 (HBs Ab)高度同源 ;EMSA发现 HBs Ab可在偏酸 p H条件下 (p H6 .4和 5 .8时 )特异性地与含 ISS的寡核苷酸 (Cp G- ODN)结合。结论 :HBs Ab可与

关键词： CpG免疫激活序列酶母单杂交系统免疫球蛋白特异性结合蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SARS相关冠状病毒S1融合蛋白的原核表达与纯化

引用

第二军医大学学报 2003年第7期24卷 704-706页

作者：张术王开宇郭瀛军黄力陈祖欢朱维佳孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :克隆严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 (SARS- Co V) S1蛋白编码 DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 5 T/ S1,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白。方法 :采用 PCR方法扩增合成 S1片段 ,并克隆入载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把S1序... 详细信息

目的 :克隆严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 (SARS- Co V) S1蛋白编码 DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 5 T/ S1,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白。方法 :采用 PCR方法扩增合成 S1片段 ,并克隆入载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把S1序列定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T的多克隆位点 ,转化大肠杆菌 K80 2 ,将纯化后的融合蛋白用于 SARS- Co V抗体阳性血清的检测。结果 :GST- S1融合蛋白以可溶形式表达 ,纯化后的蛋白用 EL ISA法检测 ,结果与对照相符。结论 :成功诱导原核表达并纯化出融合蛋白 S1,为将其应用于 SARS- Co

关键词：严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 S1融合蛋白原核表达纯化 SARS

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤基因治疗研究若干新进展

引用

第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1258-1260页

作者：贺艳王水良孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病,在其发病的分子机制逐渐被人们认识以及基因治疗的措施日趋可行的同时, 肿瘤基因治疗吸引了越来越多的注意。本文就肿瘤免疫基因治疗、抑癌基因治疗、诱导凋亡基因治疗及载体靶向性研究等方面的研究... 详细信息

肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病,在其发病的分子机制逐渐被人们认识以及基因治疗的措施日趋可行的同时, 肿瘤基因治疗吸引了越来越多的注意。本文就肿瘤免疫基因治疗、抑癌基因治疗、诱导凋亡基因治疗及载体靶向性研究等方面的研究进展作一综述。

关键词：肿瘤基因治疗病毒载体综述文献

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核酸疫苗及其在疾病免疫防治中的应用

引用

第二军医大学学报 2000年第6期21卷 519-521页

作者：孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

自从发现质粒载体携带的基因能在小鼠肌细胞中表达 ,核酸免疫技术已愈来愈受到人们重视 ,并被看作是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗。仅在短短的几年时间内 ,有关的实验报道已涉及包括细菌、病毒、寄生虫等感染性疾病... 详细信息

自从发现质粒载体携带的基因能在小鼠肌细胞中表达 ,核酸免疫技术已愈来愈受到人们重视 ,并被看作是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗。仅在短短的几年时间内 ,有关的实验报道已涉及包括细菌、病毒、寄生虫等感染性疾病以及肿瘤等预防和治疗的研究。本文就核酸疫苗的免疫机制、优越性、安全性 ,以及目前的研究进展状况作一综述。

关键词：核酸类疫苗免疫机制免疫疗法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪白细胞介素4的基因克隆及其在囊尾蚴DNA疫苗中的应用

引用

第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1192-1194页

作者：吴丹郭瀛军王庆敏孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的:克隆猪白细胞介素4(IL-4)cDNA,观察其在抗囊尾蚴免疫中的疫苗佐剂作用。方法:通过RT-PCR法获得带有5'AUG侧翼翻译优化突变序列的猪IL-4 cDNA,测序后重组入真核表达载体pcDNA,在体外瞬时表达的基础上与囊尾蚴保护性抗原DNA疫苗... 详细信息

目的:克隆猪白细胞介素4(IL-4)cDNA,观察其在抗囊尾蚴免疫中的疫苗佐剂作用。方法:通过RT-PCR法获得带有5'AUG侧翼翻译优化突变序列的猪IL-4 cDNA,测序后重组入真核表达载体pcDNA,在体外瞬时表达的基础上与囊尾蚴保护性抗原DNA疫苗联合免疫仔猪。结果:获得的猪IL-4 cDNA序列与文献报道的完全一致,在体外瞬时表达中获得了有生物学活性的猪IL-4。其与囊尾蚴保护性抗原DNA疫苗联合应用可有效提高个体体液免疫应答水平。结论:构建了一高效表达猪IL-4的真核表达质粒,初步实验证实了其在抗囊尾蚴DNA疫苗中的佐剂效应。

关键词：猪白细胞介素4 基因克隆囊尾蚴 DNA疫苗佐剂作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：