检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第6期24卷 I0001-I0003页

作者：曲乐丁劲陈程吴震杰刘冰高轶陈伟刘峰孙文李晓峰王雪王越徐振宇高莉杨庆徐斌李耀明方梓宇徐志鹏鲍一吴登爽缪雄孙海洋孙颖浩王红阳王林辉第二军医大学长征医院泌尿外科上海200003 第二军医大学东方肝胆医院信号转导研究中心上海200433 南京大学临床医学院金陵医院肿瘤科南京210002 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433 第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433 第二军医大学长海医院骨科上海200433 浙江大学医学院第二附属医院骨科浙江杭州310009

近年来，在世界范围内肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）的发生率逐年上升。约20％的肾癌患者在疾病诊断时已经发生肿瘤的进展转移，而且近30％的局限性肾癌患者在肿瘤切除后会发生复发转移。受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼（Suniti... 详细信息

近年来，在世界范围内肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）的发生率逐年上升。约20％的肾癌患者在疾病诊断时已经发生肿瘤的进展转移，而且近30％的局限性肾癌患者在肿瘤切除后会发生复发转移。受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼（Sunitinib，Sutent）被作为进展性肾癌患者的一线治疗方案。但是10％-20％的进展性肾癌患者在初次治疗时就对舒尼替尼先天耐药，其余的患者往往在接受舒尼替尼治疗6至15个月后出现耐药和疾病进展，这些现状使得舒尼替尼并不能有效延长肾癌患者的生存期。

关键词：舒尼替尼耐药性肾癌受体酪氨酸激酶抑制剂外泌体 carcinoma 复发转移治疗方案

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胎肝特异性癌胚RNA——AK003710的筛选及功能研究

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第二军医大学学报 2015年第3期36卷 233-240页

作者：王少冰孙树汉王芳第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的筛选胎肝特异性癌胚RNA,探讨其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法对小鼠肝发育和肝再生的长链非编码RNA(lncRNA)芯片数据进行生物信息学分析,筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的候选lncRNA,利用实时定量PCR在小鼠肝癌组织中... 详细信息

目的筛选胎肝特异性癌胚RNA,探讨其对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法对小鼠肝发育和肝再生的长链非编码RNA(lncRNA)芯片数据进行生物信息学分析,筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的候选lncRNA,利用实时定量PCR在小鼠肝癌组织中对候选lncRNA进行表达水平检测,综合芯片分析及实时定量PCR结果,选择表达差异最明显的lncRNA行进一步研究。首先在胎肝和肝再生模型中验证该lncRNA的表达,然后利用siRNA技术干扰该lncRNA,再通过EdU标记技术和Transwell实验分别检测细胞的增殖能力和侵袭能力。结果生物信息学分析筛选得到在胎肝和再生肝脏中均高表达的7条lncRNA,其中3条在小鼠肝癌组织中较正常肝组织高表达,3条表达无差异,1条无表达;高表达的3条lncRNA中,lncRNA-AK003710在小鼠肝发育和肝再生芯片中的差异表达倍数最高,可作为进一步研究对象。进一步验证显示lncRNA-AK003710在胎肝及多种肝损伤修复模型中表达上调;功能实验表明对lncRNA-AK003710靶向干扰后能降低小鼠肝癌细胞Hepa1-6的增殖和侵袭能力。结论 lncRNA-A003710在胎肝、再生肝组织及肝癌组织中均高表达,是胎肝特异性癌胚RNA,可调控肝癌细胞的增殖及侵袭过程,有望成为肝癌治疗的潜在靶点。

关键词：长链非编码RNA 肝发育肝再生肝损伤肝肿瘤

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LncARSI通过外泌体播散肾癌舒尼替尼耐药性

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第5期24卷插1-插3页

作者：曲乐丁劲陈程吴震杰刘冰高轶陈伟刘峰孙文李晓峰王雪王越徐振宇高莉杨庆徐赋李耀明方梓宇徐志鹏鲍一吴登爽缪雄孙海洋孙颖浩王红阳王林辉第二军医大学长征医院泌尿外科第二军医大学东方肝胆医院信号转导研究中心南京大学临床医学院金陵医院肿瘤科第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室第二军医大学长海医院病理科第二军医大学长海医院泌尿外科第二军医大学长海医院骨科浙江大学医学院第二附属医院骨科

关键词：舒尼替尼耐药性肾癌受体酪氨酸激酶抑制剂外泌体 CARCINOMA 复发转移治疗方案

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胃癌BGC-823细胞增殖与NOTCH1和HES1表达的关系

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宁夏医科大学学报 2015年第8期37卷 906-909,封4页

作者：张竞文徐方胡以平秦憬张建中宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系生育力保持教育部重点实验室银川750004 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433 宁夏医科大学总医院病理科银川750004

目的探讨HES1蛋白在胃癌细胞增殖中的作用。方法在5%CO2、37℃、饱和湿度条件下培养胃癌BGC-823细胞和肝干细胞系(LEPC),MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学检测HES1和NOTCH1表达。结果培养48h时,BGC-823和LEPC细胞生长良好,MTT比色法... 详细信息

目的探讨HES1蛋白在胃癌细胞增殖中的作用。方法在5%CO2、37℃、饱和湿度条件下培养胃癌BGC-823细胞和肝干细胞系(LEPC),MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学检测HES1和NOTCH1表达。结果培养48h时,BGC-823和LEPC细胞生长良好,MTT比色法检测显示,BGC-823细胞组增殖能力明显强于LEPC组,BGC-823组培养24、48和72h的OD值(分别为0.67±0.17、1.02±0.14和1.22±0.24)均明显高于LEPC组(分别为0.36±0.16、0.35±0.07和0.38±0.14)(P均<0.05)。免疫细胞化学染色可见,少数BGC-823细胞核HES1阳性,比较多的BGC-823细胞核周胞质呈HES1阳性,少数细胞阳性着色见于细胞质和细胞核;HES1阳性以弥漫性表达为主,细胞质表达明显多于细胞核,巨细胞表达更加明显。LEPC组部分细胞HES1免疫组化染色阳性,阳性着色主要见于细胞核。在培养48和72h,BGC-823组HES1蛋白免疫细胞化学染色平均光密度值(OD)均明显高于LEPC组(P<0.05)。BGC-823大多数细胞NOTCH1阴性,少数阳性。LEPC组可见部分细胞NOTCH1免疫组化染色阳性。在培养24、48和72h,BGC-823组NOTCH1平均OD值与LEPC组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HES1高表达与BGC-823细胞增殖能力较强有关。

关键词： HES1,Notch信号通路 BGC-823细胞肝干细胞系,增殖

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子宫内膜异位症相关的表观遗传学研究进展

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发育医学电子杂志 2014年第4期2卷 248-252页

作者：胡月阳王芳王俊霞河北省实验动物实验室河北医科大学分子生物学研究室石家庄050017 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

子宫内膜异位症(endometriosis，EMT)是指具有活性的子宫内膜组织（腺体和间质）出现在子宫腔被覆内膜以外的部位。本病在病理上呈良性形态学表现，但具有类似恶性肿瘤的种植、侵蚀及远处转移能力。其在育龄妇女中发病率为10%～15%,且... 详细信息

子宫内膜异位症(endometriosis，EMT)是指具有活性的子宫内膜组织（腺体和间质）出现在子宫腔被覆内膜以外的部位。本病在病理上呈良性形态学表现，但具有类似恶性肿瘤的种植、侵蚀及远处转移能力。其在育龄妇女中发病率为10%～15%,且有明显上升趋势。持续加重的盆腔黏连、疼痛及不孕是其主要临床表现。异位子宫内膜来源至今尚未阐明，1921年由Sampson提出的经血逆流种植学说成为主导理论，然而却无法解释多数（约90%）育龄女性存在经血逆流，但仅少数（10%～15%）发病。经研究发现，子宫内膜异位症的发生与发展是遗传易感性与环境因素相互作用的结果，同时伴随着表观遗传学的改变。

关键词：异位内膜 EMT 高甲基化启动子区基因启动子子宫内膜异位症子宫内膜异位在位内膜表观遗传

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长链非编码RNA PVT1对MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响

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发育医学电子杂志 2013年第4期1卷 205-209页

作者：王少冰王芳第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的探讨长链非编码RNA PVT1(lncRNA-PVT1)对于乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和侵袭的影响。方法构建pcDNA3.1-PVT1表达载体,并将其转染入MDA-MB-231细胞,用实时定量PCR方法检测转染细胞中lncRNA-PVT1的表达,用Edu标记技术检测转染细胞的... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA PVT1(lncRNA-PVT1)对于乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和侵袭的影响。方法构建pcDNA3.1-PVT1表达载体,并将其转染入MDA-MB-231细胞,用实时定量PCR方法检测转染细胞中lncRNA-PVT1的表达,用Edu标记技术检测转染细胞的增殖能力,用Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力。结果构建成功的pcDNA3.1-PVT1重组质粒转染入MDAMB-231细胞后lncRNA-PVT1表达增加;转染细胞的增殖能力增强;转染细胞的侵袭能力增强。结论 lncRNA-PVT1能增强MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力。

关键词：长链非编码RNA PVT1 乳腺癌

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受DNA甲基化调控的IncRNA-AY927547在原发性肝癌中作用机制研究

受DNA甲基化调控的IncRNA-AY927547在原发性肝癌中作用机制研究

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：赵晨曦郭瀛军黄金风孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的研究在原发性肝癌发生过程中受DNA甲基化调控的lncRNAs对肿瘤形成的影响及其分子机制.方法甲基化相关的lncRNAs芯片数据进行分析,筛选潜在受DNA甲基化调控异常表达的lncRNAs.在多种肝细胞系与肝癌肿瘤样本中通过实时定量PCR技术... 详细信息

目的研究在原发性肝癌发生过程中受DNA甲基化调控的lncRNAs对肿瘤形成的影响及其分子机制.方法甲基化相关的lncRNAs芯片数据进行分析,筛选潜在受DNA甲基化调控异常表达的lncRNAs.在多种肝细胞系与肝癌肿瘤样本中通过实时定量PCR技术检测这些lncRNAs的表达量改变;亚硫酸氢盐修饰与甲基化测序技术检测甲基化水平改变.进而通过siRNA干扰及全长载体质粒的构建在细胞水平对lncRNAs进行干扰及过表达后分析肿瘤表型：利用CCK-8法检测细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞的迁移、侵袭能力;Annexin-FITC荧光法检测细胞凋亡.利用UCSC基因组数据库分析lncRNAs的全长序列、结构位置、启动子区CpG岛、DNA甲基化相关转录因子等信息,继而通过双荧光素酶报告技术检测目的基因与转录因子的相互关系及结合方式.利用RNA pull-down技术筛选与lncRNAs相结合的靶蛋白分子,分析其与lncRNAs的作用方式.结果筛选出了lncRNA-AY927547,其在肝癌细胞系及肝癌组织中的表达量较之正常肝细胞系及癌旁组织呈明显下调,且甲基化程度明显增高.干扰lncRNA-AY927547后,肿瘤细胞增殖能力受到促进,迁移及侵袭能力受到明显促进,凋亡差异不明显.过表达IncRNA-AY927547后,肿瘤细胞增殖能力受到抑制,迁移及侵袭能力受到明显抑制,凋亡差异不明显.结构位置分析显示lncRNA-AY927547位于基因LMTK3的反义链上,在干扰及过表达IncRNA-AY927547后,其表达量水平与基因LMTK3呈明显负相关,提示两者之间的相互抑制,且与lncRNA-AY927547正义链及反义链相结合的蛋白谱呈明显差异.生物信息学分析提示lncRNA-AY927547的甲基化改变与转录因子Sp1、MEF-2有关.结论 IncRNA-AY927547能够受到与转录因子相关的DNA甲基化的调控,在原发性肝癌的发生及转移过程中通过其反义链基因LMTK3及其他结合蛋白发挥抑癌基因的作用,为发展表观遗传学药物治疗原发性肝癌提供了新的思路和靶向.

关键词：表观遗传学原发性肝癌 DNA甲基化长链非编码RNA

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靶向抗肿瘤药物AnxB1-MLT的基因构建及诱导表达条件优化

靶向抗肿瘤药物AnxB1-MLT的基因构建及诱导表达条件优化

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：王玉招颜宏利唐冠楠林恒荣章意亮孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

背景靶向药物治疗(targeted drug therapy)逐渐成为是目前肿瘤治疗的重要手段.近年来的研究发现,磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)是抗肿瘤治疗的重要靶点之一.膜联蛋白B1(annexin B1)是孙树汉教授克隆的一个新的膜联蛋白(Annexins... 详细信息

背景靶向药物治疗(targeted drug therapy)逐渐成为是目前肿瘤治疗的重要手段.近年来的研究发现,磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)是抗肿瘤治疗的重要靶点之一.膜联蛋白B1(annexin B1)是孙树汉教授克隆的一个新的膜联蛋白(Annexins)亚家族成员,对PS的结合具有很高的亲和力和特异性.蜂毒肽(melittin,MLT)是蜂毒的主要成分,具有很强的抗肿瘤作用.目的以肿瘤内皮细胞暴露的磷脂酰丝氨酸为"靶",以AnxB1为"导向分子",以蜂毒素为"抗肿瘤分子",构建基因工程靶向抗肿瘤药物mAnxB1-MLT.方法利用PCR重叠区延伸法连接AnxB1-MLT,融合基因克隆至pGEX5T融合表达载体和pET-28a表达载体,转染大肠杆菌,分别就IPTG浓度、利福平、表达温度等条件进行优化.结果融合蛋白AnxB1-MLT在pET-28a表达载体中无明显表达条带.37℃条件下,pGEX-5T表达质粒中高效表达,表达产物占菌体总蛋白的40％以上;IPTG、利福平对表达影响较小,但表达产物均为包涵体,不利于纯化.在22-25℃条件下诱导表达,虽然大肠杆菌生长较慢,但表达产物均为可溶性表达,且占菌体蛋白30％以上.利用GST亲和层析柱纯化,蛋白纯度大于90％.结论成功构建了融合表达蛋白AnxB1-MLT的表达质粒,优化了诱导表达条件,获得了重组蛋白,为进一步通过动物模型研究其靶向抗肿瘤活性奠定了基础.

关键词：膜联蛋白B1 蜂毒素靶向抗肿瘤药物

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The"c-Myc/miR-15-16/FGF2"axis plays an important role in hypoxia-induced distant tumor metastasis

The"c-Myc/miR-15-16/FGF2"axis plays an important role in hyp...

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：薛赓颜宏利张毅单石孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

Previous studies have established the link between aberrant microRNA(miRNA)level and hypoxia in various ***,how these aberrant miRNAs induced by hypoxia modulate tumor progression is still *** this study,the miRNA patterns of colorectal carcinoma(CRC)cells in hypoxia were screened by a high-resolution miRNA microarray and the hypoxia-induced repression of miR-15-16 was *** repression was associated with higher tumor stage and poor prognosis in *** was further disclosed that the hypoxia-induced repression of miR-15-16 promoted angiogenesis and metastasis by the loss of post-transcriptional inhibition of fibroblast growth factor-2(FGF2),Moreover,the promoter of the host gene (deleted in lymphocytic leukemia 2,DLEU2)of the miR-15-16 cluster was mapped and three Myc/Max binding sites responding in hypoxia were ***,the transcriptional repression of c-Myc to miR-15-16 via these Myc/Max binding sites in hypoxia was ***,we verified that the functional "c-Myc/miR-15-16/FGF2"pathway would play an important role in hypoxia-induced distant tumor *** a word,c-Myc-mediated repression of the miR-15-16 cluster in hypoxia promotes tumor angiogenesis and distant metastasis by upregulating *** study provides a better understanding of the coping mechanisms of microRNAs in response to hypoxia and may be helpful in developing more effective prognostic markers or treatment targets for solid tumors.

关键词： c-Myc fibroblast growth factor-2 hypoxia metastasis miR-15-1

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Hepatitis C-induced upregulation of miR-155promotes hepatocarcinogenesis by activating Wnt signaling

Hepatitis C-induced upregulation of miR-155promotes hepatoca...

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：章意亮孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

Hepatitis C virus(HCV)infection induces chronic hepatic inflammation,which usually favors the initiation and progression of *** is also increasing clearly that microRNA-155 (miR-155)plays an important role in regulating both inflammation and ***,little is known about whether and how miR-155 provides the link between inflammation and *** we found that miR-155 levels were markedly increased after HCV infection and in hepatitis ***-155 expression was transcribed by NF-κB,and p300/CBP increased NF-κB-dependent miR-155 *** of miR-155 significantly inhibited hepatocytes apoptosis and promoted cells growth,whereas miR-155 inhibition induced G0/G1 *** miR-155 resulted in nuclear accumulation of β-catenin and a concomitant increase in cyclin D1,c-myc and ***-of-function and loss-of-function studies demonstrated that miR-155 promoted hepatocytes proliferation and tumorigenesis by increasing Wnt signaling in vitro and in vivo,and DKK1(Wnt pathway inhibitor)overexpression inhibited the biological role of miR-155 in ***,adenomatous polyposis coli(APC),which negatively regulates Wnt signaling,was identified as the direct and functional target of ***:Hepatitis C-induced upregulation of miR-155 promotes hepatocytes proliferation and tumorigenesis by activating Wnt *** present study provides a better understanding of the relationship between inflammation and tumor,and thus may be helpful in developing effective diagnosis and treatment strategies against HCV-HCC.

关键词： miR-155 wnt HCV HCC

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