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第三军医大学学报 2019年第9期41卷 815-822页

作者：李涛陈岺曦孙梁博闫小晶连继勤何凤田陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆1400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院全军肿瘤研究所重庆400037

目的探讨三结构域蛋白21(tripartite motif 21,TRIM21)抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖的可能机制。方法采用TCGA数据库的样本数据分析TRIM21在HCC组织中的表达水平;Western blot检测HCC细胞系中TRIM21表达情况,在HepG2细胞中过表达TRIM21,并在SMMC7721细胞中敲低TRIM21;CCK-8和细胞克隆形成实验分别检测过表达和敲低TRIM21对HepG2和SMMC7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的情况;Western blot检测TRIM21对自噬相关蛋白4B(autophagy related 4B,ATG4B)水平的影响;分别在HepG2细胞中下调ATG4B表达和在SMMC7721细胞中过表达ATG4B,CCK-8检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 TRIM21在HCC组织中的表达水平较正常肝组织显著下调(n=49,P<0.05);在HepG2细胞中过表达TRIM21能显著降低细胞存活率(P<0.01)、抑制细胞增殖(P<0.01),在SMMC7721细胞中下调TRIM21的表达能显著增加细胞存活率(P<0.05)、促进细胞增殖(P<0.05)。过表达或敲低TRIM21对HCC细胞凋亡影响不明显;TRIM21在HCC细胞中可以抑制ATG4B的表达;而在HCC细胞中过表达或下调ATG4B也可以发挥促进或抑制细胞增殖的效果(P<0.05),ATG4B影响HCC细胞增殖的机制主要是改变细胞周期进程。结论 TRIM21在HCC中可通过下调ATG4B而抑制细胞增殖。

关键词：三结构域蛋白21 细胞增殖自噬相关蛋白4B 肝癌

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雷公藤红素与肿瘤代谢的关系研究进展

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2020年第1期7卷 18-21页

作者：李晔宋蒙蒙常文军缪明永潘亚敏上海中医药大学附属曙光医院内镜中心上海201203 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450052 第二军医大学热带医学与公共卫生学系环境卫生教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

雷公藤红素是一种中草药活性成分,具有广泛的治疗特性及较高的药用价值,通常用于治疗自身免疫性疾病、代谢性疾病及肿瘤.雷公藤红素可以通过多种途径抑制肿瘤的发生、发展,尤其与肿瘤代谢密切相关,对肿瘤细胞的糖代谢、脂类代谢、氨基... 详细信息

雷公藤红素是一种中草药活性成分,具有广泛的治疗特性及较高的药用价值,通常用于治疗自身免疫性疾病、代谢性疾病及肿瘤.雷公藤红素可以通过多种途径抑制肿瘤的发生、发展,尤其与肿瘤代谢密切相关,对肿瘤细胞的糖代谢、脂类代谢、氨基酸代谢及肿瘤微环境产生重要影响.雷公藤红素导致线粒体功能障碍以改变葡萄糖代谢途径,使肿瘤细胞供能不足;通过诱导肝内Sirt1的表达影响肿瘤宿主的脂类代谢;抑制吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)表达和色氨酸分解代谢来抑制结直肠癌,与IDO的抑制剂D-1MT联用控制胰腺癌;在肿瘤微环境中,雷公藤红素可通过抑制NLRP3炎性小体及重塑免疫抑制治疗黑色素瘤.根据最新研究报道,肠道菌群的高度代谢可以提高雷公藤红素在体内的功效,影响肿瘤发展.本文从代谢的角度阐述雷公藤红素对肿瘤的主要作用及机制,为其药理作用的深入研究提供科学依据.

关键词：雷公藤红素肿瘤代谢肿瘤微环境肠道菌群

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二氯乙酸盐激活ROS-JNK通路增强索拉非尼对肝癌细胞增殖的抑制作用

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第三军医大学学报 2019年第17期41卷 1627-1634页

作者：孙梁博姚洁李涛陈岺曦闫小晶何凤田连继勤陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)生物医学工程与影像医学系数字医学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院全军肿瘤诊治研究所重庆400037

目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与索拉非尼(sorafenib)联合使用对肝癌细胞Hep3B增殖抑制的效果及可能机制。方法将Hep3B细胞分为对照组(DMSO)、DCA处理组(5 mmol/L)、索拉非尼处理组(10μmol/L)和联合组(5 mmol/L DCA联合10μ... 详细信息

目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与索拉非尼(sorafenib)联合使用对肝癌细胞Hep3B增殖抑制的效果及可能机制。方法将Hep3B细胞分为对照组(DMSO)、DCA处理组(5 mmol/L)、索拉非尼处理组(10μmol/L)和联合组(5 mmol/L DCA联合10μmol/L索拉非尼)4个组,处理24 h后,在显微镜下观察各组细胞形态;采用CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;通过Western blot检测凋亡相关蛋白PARP的表达和p-JNK的水平;采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞ROS的变化;用流式细胞仪检测加入抗氧化剂和阻断JNK通路后的细胞凋亡的变化。结果 DCA和索拉非尼联合处理24 h能够显著改变细胞形态,杀伤细胞。与对照组和单独用药组比较,联合组显著增强对肝癌Hep3B细胞的增殖抑制效果(P<0.05),明显增加Hep3B细胞中PARP的剪切与JNK的磷酸化水平,胞内ROS水平也明显升高;联合使用抗氧化剂NAC可显著抑制DCA和索拉非尼处理导致的JNK磷酸化水平升高和对Hep3B细胞的增殖抑制效果。结论 DCA和索拉非尼联合使用可显著抑制肝癌细胞Hep3B的增殖,其机制可能与激活ROS-JNK通路有关。

关键词：二氯乙酸盐索拉非尼肝癌细胞增殖 ROS-JNK通路

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新型隐球菌临床菌株中CNAG＿01032基因的鉴定和功能研究

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菌物学报 2019年第8期38卷 1341-1349页

作者：邱文兰咏哲王迪黄劲廖万清康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025 第二军医大学上海长征医院真菌学研究所上海200003

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检... 详细信息

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检测突变株和野生型菌株经典毒力因子变化情况;使用API 20C AUX测试系统测试突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况;使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测。结果显示:成功构建以临床株C1、C2为背景的CNAG-01032基因敲除突变株;突变株在37℃生长、黑色素产生与野生型菌株无显著差异,但荚膜厚度分别比C1、C2减少16.4%、18.2%;两基因敲除菌株均不能分解利用纤维二糖;致病性与野生型菌株无显著差异。新型隐球菌CNAG01032基因可能参与临床来源菌株IFM56800、IFM56769的荚膜合成和纤维二糖的代谢。

关键词：病原性真菌基因敲除荚膜纤维二糖

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甘露糖抗肿瘤作用的研究进展

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2019年第3期6卷 283-286页

作者：宋蒙蒙陈哲文李晔宋春花石汉平缪明永郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450052 温州医科大学附属第二医院浙江温州325000 上海中医药大学附属曙光医院上海201203 河南省肿瘤流行病学重点实验室郑州450052 首都医科大学附属北京世纪坛医院胃肠外科/临床营养科/肿瘤代谢与营养北京市国际科技合作基地/首都医科大学肿瘤学系北京100038 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

“Warburg效应”是肿瘤细胞重要的代谢特征之一,肿瘤细胞在氧气充足的条件下仍进行糖酵解,亦称“有氧糖酵解”。愈来愈多的研究表明肿瘤是一种代谢性疾病。因此探索肿瘤代谢变化及机制,以及靶向肿瘤代谢的肿瘤治疗成为近年来肿瘤研究的... 详细信息

“Warburg效应”是肿瘤细胞重要的代谢特征之一,肿瘤细胞在氧气充足的条件下仍进行糖酵解,亦称“有氧糖酵解”。愈来愈多的研究表明肿瘤是一种代谢性疾病。因此探索肿瘤代谢变化及机制,以及靶向肿瘤代谢的肿瘤治疗成为近年来肿瘤研究的热点。目前基于肿瘤代谢的一些治疗方法(如生酮疗法、大剂量维生素C等)逐步引起基础研究和临床研究工作者的重视。最近有研究报导,甘露糖可以抑制肿瘤生长、增加阿霉素抗癌效果和延长荷瘤小鼠生存期。其主要作用机制是干扰葡萄糖代谢、促进肿瘤细胞凋亡以及增强化疗药物顺铂和阿霉素的抗肿瘤作用。此外,甘露糖还有调节免疫平衡等作用。甘露糖作为一种营养素,对人体健康无害,有望成为一种重要肿瘤代谢调节治疗的营养素,并且可与一线肿瘤治疗(化疗和放疗)配合来提高抗肿瘤治疗效果,具有重要的临床意义和应用前景。

关键词：甘露糖 Warburg效应肿瘤代谢抗肿瘤

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极地真菌Geomyces sp.3-1次级代谢产物的研究

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天然产物研究与开发 2017年第4期29卷 590-594页

作者：李云海王晓丽卢小玲于豪冰刘小宇第二军医大学海洋生物医药研究中心第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 浙江海洋大学海洋科学与技术学院舟山316022

采用硅胶柱层析、ODS反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces sp.3-1的发酵液提取物进行分离纯化,共得到8个化合物,通过波谱解析结合理化性质并比较相关文献,确定化合物为:paulownin(1)、demethylincis... 详细信息

采用硅胶柱层析、ODS反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces sp.3-1的发酵液提取物进行分离纯化,共得到8个化合物,通过波谱解析结合理化性质并比较相关文献,确定化合物为:paulownin(1)、demethylincisterol A3(2)、ergosta-7,22-dienen-3,6-dione(3)、citreoanthrasteroid B(4)、19-norergosta-5,7,9,22-tetraene-3β-ol(5)、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(6)、(3β,5α,6β,22E)-6-methoxyergosta-7,22-diene-3,5-diol(7)和ergosta-7,22-dien-3β-ol(8)。其中,化合物2~7均是首次从Geomyces属真菌中获得,化合物2有较好的抗菌和细胞毒活性。

关键词：极地真菌地丝霉属次级代谢产物生物学活性

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低糖增强肿瘤对二甲双胍的敏感度

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肿瘤防治研究 2018年第3期45卷 125-130页

作者：张杰丛明华高云简美诚徐嘉溪缪明永石汉平俞伟男徐州医科大学附属淮安医院内分泌科淮安223002 国家癌症中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 首都医科大学附属北京世纪坛医院普外四科/临床营养科北京100038

目的观察不同浓度葡萄糖对二甲双胍抗肿瘤作用的影响并探讨其作用机制。方法在含不同浓度葡萄糖的培养基中加入二甲双胍培养细胞24 h后,检测细胞增殖情况及ATP水平。构建裸鼠皮下移植瘤,随机分成四组:正常饮食(SD)组、SD+二甲双胍(Met)... 详细信息

目的观察不同浓度葡萄糖对二甲双胍抗肿瘤作用的影响并探讨其作用机制。方法在含不同浓度葡萄糖的培养基中加入二甲双胍培养细胞24 h后,检测细胞增殖情况及ATP水平。构建裸鼠皮下移植瘤,随机分成四组:正常饮食(SD)组、SD+二甲双胍(Met)组、生酮饮食(KD)组、KD+Met组,实验干预8周后,检测瘤体体积、重量以及裸鼠血糖水平。结果培养基中葡萄糖水平≥10 mmol/L时,二甲双胍对胰腺癌细胞增殖抑制不明显,但在低糖培养基(≤5 mmol/L)中,10mmol/L二甲双胍能明显抑制胰腺癌细胞增殖。同时,低糖培养基中各细胞ATP水平显著降低(P<0.01)。体内实验中,KD组血糖水平明显降低(P<0.01),肿瘤生长受到显著抑制(P<0.01)。与KD组相比,KD+Met组可进一步抑制移植瘤生长(P<0.05)。结论低糖增强肿瘤对二甲双胍的敏感度,其机制可能与减少机体ATP生成有关。

关键词：二甲双胍生酮饮食肿瘤葡萄糖

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石房蛤毒素结合靶点的研究进展

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中国生化药物杂志 2017年第8期37卷 437-442页

作者：周蓉欧阳生群王梁华焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学海洋军事医学院海洋药物中心上海200433

石房蛤毒素（saxitoxin,STX）是已知毒性最强的海洋生物毒素之一,严重威胁人类安全和健康,但也具有潜在的药用价值。本文概述了STX及其类似物的结构与性质,总结了近年来报道的STX的结合靶点及其结合的结构基础。STX既能结合Na＋、K＋、... 详细信息

石房蛤毒素（saxitoxin,STX）是已知毒性最强的海洋生物毒素之一,严重威胁人类安全和健康,但也具有潜在的药用价值。本文概述了STX及其类似物的结构与性质,总结了近年来报道的STX的结合靶点及其结合的结构基础。STX既能结合Na＋、K＋、Ca2＋通道抑制通道离子流,也能被牛蛙的Saxiphilin蛋白及河鲀STX/TTX结合蛋白结合从而使机体免于STX毒性作用。此外,除了作为STX代谢酶的底物,STX还影响机体一氧化氮合酶、抗氧化酶等的活性。本文基于这些靶标对STX发挥活性的机制进行全面探讨,对STX麻醉、镇痛等方面的药用价值和STX解毒剂的研发进行初步讨论,期望能够为后续STX的研究提供参考。

关键词：石房蛤毒素离子通道抑制剂麻痹性贝类毒素受体蛋白解毒剂

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肿瘤生酮代谢疗法敏感性依赖于酮体代谢酶水平

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2017年第4期4卷 421-429页

作者：张杰丛明华高云俞伟男缪明永石汉平徐州医科大学附属淮安医院淮安市第二人民医院内分泌科江苏淮安223002 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 首都医科大学附属北京世纪坛医院胃肠外科/临床营养科北京100038

目的基础实验及临床研究均证实KD具有一定的抗肿瘤作用,但是疗效并不一致,尚没有特异性的分子靶标或明确的适应证来衡量其抗肿瘤作用。本研究拟检测多种肿瘤细胞系酮体代谢酶的表达情况,以验证不同酮体代谢酶表达水平的肿瘤细胞对KD治... 详细信息

目的基础实验及临床研究均证实KD具有一定的抗肿瘤作用,但是疗效并不一致,尚没有特异性的分子靶标或明确的适应证来衡量其抗肿瘤作用。本研究拟检测多种肿瘤细胞系酮体代谢酶的表达情况,以验证不同酮体代谢酶表达水平的肿瘤细胞对KD治疗的敏感性。方法通过qRT-PCR检测33株肿瘤细胞系BDH1和OXCT1编码基因的表达情况。根据筛选结果选择BDH1和OXCT1高表达的HeLa细胞以及低表达PANC-1细胞进行KD敏感性的体内外验证。使用手持式细胞计数器检测含不同浓度βHB的低糖培养基中HeLa和PANC-1细胞增殖情况。然后,敲低HeLa细胞中BDH1和OXCT1的表达水平,构建HeLa和PANC-1裸鼠皮下移植瘤,体内外重新验证KD抗肿瘤治疗的敏感性。结果与对照组相比,低糖组HeLa细胞和PANC-1细胞增殖明显受抑制,但是低糖培养基加入βHB后,HeLa细胞增殖明显好转,但是PANC-1细胞增殖无显著好转。动物实验中,KD显著抑制PANC-1移植瘤的生长,但是对HeLa移植瘤的生长无抑制作用,而同时敲低BDH1和OXCT1的HeLa细胞对KD治疗敏感。结论酮体代谢关键酶BDH1和OXCT1低表达,并且无明显诱导的肿瘤对生酮代谢疗法敏感。

关键词：生酮饮食肿瘤酮体代谢

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极地海洋真菌Nectria sp. B-13次级代谢产物研究

极地海洋真菌Nectria sp. B-13次级代谢产物研究

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2016年中国药学大会暨第十六届中国药师周

作者：戴艳岑李云海卢小玲于豪冰刘小宇焦炳华第二军医大学海洋生物医药研究中心第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海海洋大学水产与生命学院

真菌微生物次级代谢产物种类多,结构新,活性强[1],是临床小分子药物的重要来源。近年来随着极地科考事业的发展,对极地真菌适应严苛气候的物质基础和药用前景的研究受到了广泛关注。丛赤壳属(Nectria)是一种分布广泛的真菌,属于子囊菌门... 详细信息

真菌微生物次级代谢产物种类多,结构新,活性强[1],是临床小分子药物的重要来源。近年来随着极地科考事业的发展,对极地真菌适应严苛气候的物质基础和药用前景的研究受到了广泛关注。丛赤壳属(Nectria)是一种分布广泛的真菌,属于子囊菌门Ascomycota、肉座菌目Hypocreales、丛赤壳科Nectriaceae、丛赤壳属Nectria。目前,从该属真菌中分离到的次级代谢产物主要有氯代酚类倍半萜、单酚类、聚酮化合物、甾醇以及生物碱类等[2],这些化合物显示了抗细菌、抗真菌、植物毒害性、β-葡萄糖醛酸酶抑制、细胞毒及乙酰胆碱酯酶抑制等生物活性[3]。其中,氯代酚类倍半萜ilicicolins系列化合物显示极强的细胞毒活性,尤其是ilicicolin E和ilicicolin F对HeLa细胞的ED50值均为0.003μg/mL[4],氯代酚类倍半萜ilicicolins系列化合物的发现对抗肿瘤药物的开发具有重要的意义。由于这类氯代化合物质谱显示特征同位素峰,经HPLC-DAD-MS质谱导向追踪含有卤代化合物的馏分,从Nectriasp.B-13发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到20个氯代酚醛倍半萜烯类结构,其中3个化合物为新化合物。对得到的单体化合物进行了抗肿瘤药理活性筛选。结果发现化合物2、3、5、6、8、9、11对肿瘤细胞株HTC-116、MCF-7、K562、22RV1都表现出有较强的抗肿瘤活性。从构效关系上分析:(1)C-6被氯原子取代后活性比未被取代活性较强,则氯原子取代对抑制肿瘤活性有一定相关性;(2)其次酚醛倍半帖烯类化合物中,结构中含有的共轭双键越多活性越强;(3)再者在C-12和C-18位上出现取代基团也会对抗肿瘤活性强弱出现不同。

关键词：极地海洋真菌 Nectria sp. 氯代酚类倍半萜细胞毒活性

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