检索结果-内蒙古大学图书馆

海军军医大学学报 2023年第7期44卷 792-799页

作者：肖邦朱静徐莎陈国栋黄超海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)中医系中医妇科学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)转化医学研究中心干细胞与再生医学研究室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院人体解剖学教研室上海200433

细胞间的变异或异质性是干细胞群的基本和内在特征。传统的组学分析在混合细胞群体上进行,导致这些差异被掩盖。近年来,单细胞基因组、表观基因组、转录组测序等技术发展迅速,为全面解析细胞异质性和识别不同表型细胞类型提供了强有力... 详细信息

细胞间的变异或异质性是干细胞群的基本和内在特征。传统的组学分析在混合细胞群体上进行,导致这些差异被掩盖。近年来,单细胞基因组、表观基因组、转录组测序等技术发展迅速,为全面解析细胞异质性和识别不同表型细胞类型提供了强有力的工具。这些方法应用于不同类型的干细胞,包括多能干细胞和组织特异性干细胞,取得了令人兴奋的新发现。本文综述了单细胞组学测序技术的最新进展,并对单细胞组学测序的方法和应用前景进行了展望。

关键词：单细胞组学 RNA测序表观基因组测序干细胞细胞异质性

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BCG-DNA对哮喘患者外周血单个核细胞IFN-γ和IL-4产生的作用

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第二军医大学学报 2004年第7期25卷 718-720页

作者：商艳胡振林李强施柯刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室

目的 :研究免疫活性物质卡介苗基因组 DNA(BCG- DNA)对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC) IFN- γ和 IL- 4产生的影响。方法 :分离哮喘患者 PBMC,分别加入 BCG- DNA、地塞米松刺激培养 ,EL ISA检测培养上清中 IFN- γ及 IL- 4含量 ,RT- ... 详细信息

目的 :研究免疫活性物质卡介苗基因组 DNA(BCG- DNA)对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC) IFN- γ和 IL- 4产生的影响。方法 :分离哮喘患者 PBMC,分别加入 BCG- DNA、地塞米松刺激培养 ,EL ISA检测培养上清中 IFN- γ及 IL- 4含量 ,RT- PCR检测 PBMC IFN-γ m RNA及 IL - 4 m RNA的表达量 ,并与空白对照组相比较。结果 :地塞米松在体外对哮喘患者PBMC产生的 IFN-γ m RNA和蛋白、IL - 4 m RNA和蛋白均有抑制作用 ;BCG- DNA抑制哮喘患者 PBMC IL - 4 m RNA和蛋白的分泌 ,而促进 IFN -γ m RNA和蛋白的分泌 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 1 ) ,且在体外对 PBMC无毒性。结论 :BCG-DNA不仅具有和地塞米松相同的下调 IL - 4表达的作用 ,而且还具有地塞米松所没有的诱导 IFN -γ表达的作用 ,利于纠正哮喘患者体内存在的 Th1 / Th2比例失衡状态。

关键词： BCG-DNA 哮喘外周血单个核细胞 IFN-r IL-4

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基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立

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第二军医大学学报 2000年第6期21卷 537-540页

作者：卢洋黎怀星李建秀傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分... 详细信息

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分别移入 45只受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 44只 ,存活 35只 ,采用 PCR,PCR- Southern和基因组 Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠。以 4只经基因组 Southern杂交证实在基因组 DNA中整合有多拷贝结构完整的 p MTR1质粒的小鼠作Founder小鼠 ,进行转基因小鼠的建系工作。对每个 Founder小鼠已有的 F1代及 F2代转基因小鼠的基因组 DNA进行p MTR1质粒回收实验。结果 :从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的 p MTR1质粒。结论 :(1)建立了在基因组 DNA中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ;(2 )

关键词：转基因小鼠基因突变 PMTR1质粒

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人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 937-940页

作者：刘善荣王庆敏杨玲汤淑萍惠宁蒋正戚中田刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院妇产科第二军医大学基础医学部微生物学教研室

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫... 详细信息

目的 :克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4 ,并使其在大肠杆菌中表达。方法 :取 4～ 6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜 ,利用RT PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建成 pGEX5T Oct4重组质粒。β硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导使该基因在k80 2菌中表达。结果 :用PCR方法扩增获得大小约 1 .1kb条带 ;全自动测序与GenBank中登录的序列 97%同源。获得了pGEX5T Oct4重组子并在k80 2菌中获得了表达 ,SDS PAGE分析有一特异性的 6 2 0 0 0条带。结论 :扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达。

关键词：人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因 Oct4 克隆基因克隆基因表达

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缺血性急性肾功能衰竭病程进展中p27^(kip1)作用的研究

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中华肾脏病杂志 2002年第4期18卷 301-302页

作者：傅鹏崔若兰袁伟杰戴建新孙树汉第二军医大学长海医院肾内科上海200433 第二军医大学长海医院基础部医学遗传学教研室上海200433

在缺血性急性肾功能衰竭(ARF)中,肾脏能否通过受损肾小管上皮细胞的再生、增殖而实现其结构和功能的自我修复是病程转归的关键。而作为细胞增殖和分化共同途径的细胞周期,其运转过程由一系列调控因子即细胞周期调节蛋白(cellcycle regul... 详细信息

在缺血性急性肾功能衰竭(ARF)中,肾脏能否通过受损肾小管上皮细胞的再生、增殖而实现其结构和功能的自我修复是病程转归的关键。而作为细胞增殖和分化共同途径的细胞周期,其运转过程由一系列调控因子即细胞周期调节蛋白(cellcycle regulatory proteins,CCRP)所控制[1]。其中p27kip1是重要的负性CCRP,表现为p27kip1抑制细胞增殖[1],同时还可促进细胞分化成熟、诱导细胞凋亡[2]。为此,我们动态观察了缺血性ARF大鼠肾脏细胞增殖程度以及肾组织内p27kip1的表达,并探讨了p27kip1的表达量与肾小管上皮细胞增殖程度之间的关系,以明确缺血性ARF病程中p27kip1的可能作用。

关键词：缺血性急性肾功能衰竭 p27^kipl 肾小管上皮细胞细胞增殖动物实验

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原发性肝细胞癌患者血清N-糖组的表达分析

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第二军医大学学报 2007年第12期28卷 1280-1283页

作者：赵云鹏高春芳房萌孙树汉刘艳陈冬梅蔡美琳第二军医大学东方肝胆外科医院实验诊断科上海200438 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的:通过对厚发性肝细胞癌(HCC)与正常人血清N-糖组图谱比较分析,寻找异常峰,为寻求新的HCC肿瘤标志物奠定基础。方法:收集乙型肝炎病毒(HBV)感染的HCC患者(n=100)及健康献血员(n=130)血清,采用基于DNA测序仪的毛细管电泳技术,检测每... 详细信息

目的:通过对厚发性肝细胞癌(HCC)与正常人血清N-糖组图谱比较分析,寻找异常峰,为寻求新的HCC肿瘤标志物奠定基础。方法:收集乙型肝炎病毒(HBV)感染的HCC患者(n=100)及健康献血员(n=130)血清,采用基于DNA测序仪的毛细管电泳技术,检测每份标本中荧光标记的N-糖组分。结果:每份血清均得到具有11个峰的图谱,峰值经校正后量化,HCC组较对照组峰1、2、9、11升高,蜂6、8、10降低(P<0.05);且部分峰值变化与肿瘤标志物甲胎蛋白、HBV DNA载量、临床肝功能指标存在相关性。结论:HCC组血清N-糖组图谱较正常对照存在明显的差异,这种变化有望为临床疾病诊断提供依据。

关键词： N-糖组癌肝细胞电泳毛细管

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电离辐射对精子质量影响的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2017年第4期37卷 334-338页

作者：杨文军黄金凤刘岩朱怡卿王芳孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学长征医院临床遗传科上海200003

随着电离辐射渗入到人们生活中的各个领域,其对人体健康的影响也愈发显著。研究表明增殖分化旺盛的系统对电离辐射的敏感程度较高,比如男性生殖系统,其作为易受电离辐射影响的系统之一,与后代健康水平息息相关。本文就电离辐射对精子浓... 详细信息

随着电离辐射渗入到人们生活中的各个领域,其对人体健康的影响也愈发显著。研究表明增殖分化旺盛的系统对电离辐射的敏感程度较高,比如男性生殖系统,其作为易受电离辐射影响的系统之一,与后代健康水平息息相关。本文就电离辐射对精子浓度、活动度、形态以及对精子细胞D N A和染色体结构的影响及可能的损伤机制的研究进展进行综述,为电离辐射造成男性生殖系统损伤的治疗及防护提供新的策略。

关键词：电离辐射精子生殖健康

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一个与小鼠锌指蛋白基因ZF-12相关的假基因的克隆和鉴定

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实验生物学报 2002年第2期35卷 135-141页

作者：厉建中张亚洲王水良杨桦李坚余龙傅继梁上海第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 复旦大学遗传学研究所上海200433

小鼠类Krüppel锌指蛋白基因ZF-12为人的类Krüppel锌指蛋白基因ZNF191的同源基因,它们都编码368个氨基酸残基,N端存在SCAN结构域,C端有4个连续的锌指模体,最近的研究表明ZNF191是肝癌发生的相关基因。我们以人锌指蛋白基因ZNF... 详细信息

小鼠类Krüppel锌指蛋白基因ZF-12为人的类Krüppel锌指蛋白基因ZNF191的同源基因,它们都编码368个氨基酸残基,N端存在SCAN结构域,C端有4个连续的锌指模体,最近的研究表明ZNF191是肝癌发生的相关基因。我们以人锌指蛋白基因ZNF191的cDNA为探针,筛选小鼠λ噬菌体基因组文库,意外地获得了1个与小鼠锌指蛋白基因ZF-12相类似的基因,多种组织的RT-PCR和启动子序列分析,暗示该基因不表达,且该基因无内含子,与ZF-12高度相似,存在突变,暗示其为与ZF-12相关的假基因序列,经查新证实它为新的序列后,以ZF12p(ZF-12 pseudogene)命名在GenBank登录(AY040222)。查寻GenBank的人类基因组库以及Southern结果显示人类基因组中无ZNF191假基因序列。ZF12p与ZF-12高度相似,暗示ZF12p在进化过程中产生的时间较晚,这对研究锌指蛋白基因ZF-12的突变与进化具有重要的意义。

关键词：小鼠锌指蛋白基因 ZF-12 假基因克隆鉴定 ZNF191 进化

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结核抗原ESAT-6基因的克隆及在大肠埃希菌中的表达

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中华传染病杂志 2003年第1期21卷 30-32页

作者：王庆敏胡振林孙树汉张巧敏第二军医大学医学遗传学教研室河北省胸科医院

目的　将结核分支杆菌ESAT抗原编码区基因克隆 ,并使其在大肠埃希菌中表达。方法　培养并抽提结核分支杆菌基因组 ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码ESAT的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建 pGEX5T ESAT重组质粒。IPTG诱... 详细信息

目的　将结核分支杆菌ESAT抗原编码区基因克隆 ,并使其在大肠埃希菌中表达。方法　培养并抽提结核分支杆菌基因组 ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码ESAT的全长cDNA ,并插入到原核表达载体 pGEX5T中 ,构建 pGEX5T ESAT重组质粒。IPTG诱导使该基因在k80 2菌中表达 ,并用免疫印迹 (Westernblot)方法确证表达蛋白的特异性。结果　PCR扩增获得了单一的条带 ,大小约 0 .3kb ;全自动测序与Genbank中登录的序列完全相同。获得了 pGEX5T ESAT重组子并在k80 2菌中表达 ,该蛋白可被结核病患者血清特异地识别。结论　扩增和克隆了结核杆菌ESAT抗原的全长cDNA并在大肠埃希菌中获得表达 ,为进一步研究其在结核病诊断和防治中的应用打下了基础。

关键词：结核分支杆菌 ESAT-6 基因表达克隆大肠埃希菌结核病预防

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口蹄疫DNA疫苗海藻酸钠微球的制备及体外释放的研究

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药学服务与研究 2004年第2期4卷 107-110页

作者：刘善奎钟延强王芳孙树汉高申第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433

目的 :研制DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以口蹄疫DNA疫苗为DNA疫苗的模型药物 ,采用喷雾干燥离子交联法制备DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及其... 详细信息

目的 :研制DNA疫苗海藻酸钠微球 ,并对其体外释药特性进行考察。方法 :以口蹄疫DNA疫苗为DNA疫苗的模型药物 ,采用喷雾干燥离子交联法制备DNA疫苗海藻酸钠微球 ;考察粒径大小、外观、载药量等理化特性 ;考察微球的体外释药特性及其影响因素。结果 :微球球形圆整 ,分散性好 ,平均粒径为 11.9μm ,载药量为 5 % ,产率为 5 3.2 %。微球的体外释放速率受载药量影响较小 ,而壳聚糖的交联固化度增高 ,微球的体外释放速率变慢。结论 :以生物降解材料海藻酸钠、壳聚糖 ,用喷雾干燥法制备DNA疫苗微球 ,不需要超声和有机溶剂 ,因而有利于DNA疫苗结构和功能的稳定性 ;工艺简便 ,易于工业化生产。

关键词：口蹄疫 DNA疫苗海藻酸钠微球喷雾干燥体外释药

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