检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1997年第3期18卷 201-204页

作者：雷章恒李建秀余宏宇王新民孙伟潘星华郝光荣王肖鹏傅继梁胡以平第二军医大学基础医学部生物学教研室和医学分子遗传学开放实验室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学实验动物中心

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，... 详细信息

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，分析所导入ＤＮＡ在转基因小鼠体内的功能情况。结果：得到２１只建立者小鼠，在它们的血清中检测到了ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的存在，还在肝细胞中观察到了ＨＢＶ样病毒颗粒。结论：ＨＢＶ基因组ＤＮＡ已经整合至小鼠的基因组，其中的基因能够表达，整个基因组ＤＮＡ还能复制，并被有效地包装。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型

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泛素结合酶E2C与肿瘤的关系研究进展

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医学研究生学报 2015年第5期28卷 543-548页

作者：王少冰王芳第二军医大学医学遗传学教研室上海医学硕士研究生200433

越来越多的证据提示肿瘤细胞内紊乱的泛素化过程调控了肿瘤的发生发展。泛素结合酶E2C(ubiquitinconjugating enzyme E2 C,UBE2 C)是泛素结合酶家族的重要成员,是细胞有丝分裂中期向后期转变的关键调节分子。近年来,UBE2C与肿瘤的关系... 详细信息

越来越多的证据提示肿瘤细胞内紊乱的泛素化过程调控了肿瘤的发生发展。泛素结合酶E2C(ubiquitinconjugating enzyme E2 C,UBE2 C)是泛素结合酶家族的重要成员,是细胞有丝分裂中期向后期转变的关键调节分子。近年来,UBE2C与肿瘤的关系研究较多,文中就该分子在肿瘤中的表达情况、对肿瘤发生发展的影响及内在机制的研究现状作一综述。

关键词：泛素结合酶 UBE2C 有丝分裂肿瘤

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缺血性急性肾衰大鼠肾组织细胞周期调节蛋白表达的变化

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肾脏病与透析肾移植杂志 2001年第2期10卷 118-122页

作者：傅鹏崔若兰袁伟杰戴建新孙树汉倪灿荣第二军医大学附属长海医院肾内科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室第二军医大学病理学教研室

目的 :探讨缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾组织细胞周期调节蛋白cyclinE和CDK 2的表达及与肾小管上皮细胞增生的关系。　方法 :建立缺血性急性肾功能衰竭大鼠模型 ,分别在第 0、2、7、10、14天处死。以生化法测定血清肌酐 (SCr)值 ,以免... 详细信息

目的 :探讨缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾组织细胞周期调节蛋白cyclinE和CDK 2的表达及与肾小管上皮细胞增生的关系。　方法 :建立缺血性急性肾功能衰竭大鼠模型 ,分别在第 0、2、7、10、14天处死。以生化法测定血清肌酐 (SCr)值 ,以免疫组织化学染色技术观察肾组织内细胞增生程度以及cyclinE和CDK 2的表达和分布情况。　结果 :大鼠SCr值在缺血再灌注第 2天开始显著增高 ,第 7天最高 ,第 10天开始降低 ,第 14天基本降至正常。对照组肾组织细胞增生指数 (PI)为 0 1% ,肾缺血后第 2、7、10和 14天PI分别为 14 8%、30 9%、2 3 6 %和12 4%。cyclinE和CDK 2蛋白在肾组织内分布于皮质肾小管 ,少数在间质 ,且肾缺血后第 2天表达弱阳性 (+) ,第7天表达强阳性 (+++) ,第 10天表达阳性 (++) ,第 14天表达弱阳性 (+) ;肾小球内基本无表达。　结论 :缺血性急性肾功能衰竭大鼠肾组织cyclinE/CDK 2蛋白表达增强与肾小管上皮细胞增生程度相一致。表明cyclinE和CDK 2是调控缺血性急性肾衰大鼠肾小管上皮细胞增生的关键蛋白。

关键词：缺血性急性肾功能衰竭细胞周期调节蛋白周期素E 周围素依赖性激酶2

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人血小板生成素cDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达

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第二军医大学学报 1998年第3期19卷 212-214页

作者：童涌戴建新陈蕊雯周永春孙树汉陆德如第二军医大学基础医学部医学生物技术和分子遗传学研究所第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：克隆人血小板生成素（ｈＴＰＯ）ｃＤＮＡ，并研究其在ＣＯＳ－７细胞中的表达。方法：通过ＲＴ－ＰＣＲ法获得ｈＴＰＯｃＤＮＡ，测序后克隆到真核表达载体ｐＥＤ上，以ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ－７细胞，巨核细胞... 详细信息

目的：克隆人血小板生成素（ｈＴＰＯ）ｃＤＮＡ，并研究其在ＣＯＳ－７细胞中的表达。方法：通过ＲＴ－ＰＣＲ法获得ｈＴＰＯｃＤＮＡ，测序后克隆到真核表达载体ｐＥＤ上，以ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ－７细胞，巨核细胞集落形成培养法测表达产物活性。结果和结论：获得的ｈＴＰＯｃＤＮＡ和文献报道的序列一致。转染细胞ＲＮＡ斑点杂交结果显示ＴＰＯｃＤＮＡ获得转录，转染后４８和７２ｈ的细胞上清均可测到ＴＰＯ活性。ｐＥＤ是一个表达较高的真核表达载体。

关键词：人血小板生成素基因表达 cDNA COS-7细胞

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利用荧光mRNA差异显示技术克隆短芒大麦盐胁迫相关基因的ESTs

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第二军医大学学报 2004年第2期25卷 203-206页

作者：陆一鸣李彦舫白杰英颜宏利贺艳孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 解放军军需大学生物学教研室长春130062

目的 :获取短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。方法 :应用荧光 m RNA差异显示技术进行筛选 ,并利用反向 North-ern杂交方法对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。结果 :共获得 32个与盐胁迫相关的 c DNA序列 ,并获得 Gen Bank注册号。BL ... 详细信息

目的 :获取短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。方法 :应用荧光 m RNA差异显示技术进行筛选 ,并利用反向 North-ern杂交方法对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。结果 :共获得 32个与盐胁迫相关的 c DNA序列 ,并获得 Gen Bank注册号。BL AST同源性分析结果表明 ,1 3个与已知基因序列有同源性 ,1 9个为未知 ESTs。其类型分别为 :诱导表达型 ,2 2个 ;增强表达型 ,7个 ;抑制表达型 ,3个。结论 :通过荧光 m RNA差异显示技术获得了短芒大麦盐胁迫相关基因的 ESTs。

关键词：荧光mRNA差异显示技术克隆短芒大麦盐胁迫相关基因 ESTs 基因表达

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含三联密码AAA的Kozak类似序列特异性增强口蹄疫DNA疫苗的免疫效果

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第10期26卷 915-919页

作者：张秀伟郭瀛军王开宇黄力杨勇军张术陈祖欢王凯慧杨康鹃孙树汉上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室吉林省延边大学医院200433 吉林省延边大学医院

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1... 详细信息

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1-KZ6),插入真核表达载体pVAX1,制备口蹄疫DNA疫苗,对6～8周龄BALB/c小鼠进行免疫,用间接ELISA分析实验动物外周血VP1的抗体滴度；同时插入带有绿色荧光蛋白的融合表达载体pEGFP-N1构建6种体外表达质粒,转染HeLa细胞,进行瞬时表达并分析体外表达水平。结果引入含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的疫苗质粒pKV6接种动物后产生的免疫抗体滴度高于其他组；相应的体外表达质粒pKG6转染HeLa细胞后体外表达水平亦高于其他组。结论含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的口蹄疫DNA疫苗,能特异性地增强口蹄疫DNA疫苗的表达水平及免疫效果。

关键词：三联密码AAA Kozak类似序列口蹄疫 DNA疫苗表达水平免疫效果

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泛素-结核抗原融合基因DNA疫苗诱导小鼠较强的细胞免疫应答

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第二军医大学学报 2007年第3期28卷 261-265页

作者：王庆敏殷明章建程胡家庆何颖孙树汉上海海军医学研究所舰艇卫生研究室上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的:构建结核杆菌ESAT6抗原DNA疫苗(pE)和泛素基因与ESAT6抗原基因融合的DNA疫苗(pUE)。方法:分别将构建的DNA疫苗肌内注射免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgGI、gG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γI、L-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应(... 详细信息

目的:构建结核杆菌ESAT6抗原DNA疫苗(pE)和泛素基因与ESAT6抗原基因融合的DNA疫苗(pUE)。方法:分别将构建的DNA疫苗肌内注射免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgGI、gG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γI、L-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL),比较融合基因DNA疫苗和单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度。结果:pE组小鼠血清IgG水平高于pUE组(P<0.01),但IgG2a/IgG1比值低于pUE组[(2.28±0.40)vs(3.87±0.60),P<0.05]。与pE组相比,pUE组小鼠IFN-γ分泌水平增高(P<0.01),IL-4分泌水平下降(P<0.01);pUE增强了CTL活性。提示融合基因DNA疫苗诱生的抗原特异的体液免疫应答不及单基因DNA疫苗,但其能诱导更强的细胞免疫应答。结论:泛素-ESAT6融合基因DNA疫苗对于防治结核病可能比单基因DNA疫苗更为有效。

关键词：分枝杆菌,结核疫苗,DNA 泛素免疫应答

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核酸疫苗pcDNA3cC1小鼠体内表达的血清学分析

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 957-958页

作者：章亚南何晓文王芳姜磊任丁李德安孙树汉第二军医大学基础医学部医学生物技术和分子遗传研究所医学遗传学教研室上海200433

抗原cC1是从猪囊尾蚴cDNA文库中以囊虫病患者、病猪血清为探针筛选出的抗原蛋白．经免疫学检测证实为具有较高特异性的诊断用抗原。在前期的研究中，我们将全长cC1 cDNA插入真核表达质粒载体pcDNA3，构建了重组质粒pcDNA3-cC1。该DNA疫... 详细信息

抗原cC1是从猪囊尾蚴cDNA文库中以囊虫病患者、病猪血清为探针筛选出的抗原蛋白．经免疫学检测证实为具有较高特异性的诊断用抗原。在前期的研究中，我们将全长cC1 cDNA插入真核表达质粒载体pcDNA3，构建了重组质粒pcDNA3-cC1。该DNA疫苗免疫仔猪后，能有效诱导仔猪的免疫保护效应。本研究选择该DNA疫苗为分析对象，旨在建立一种早期预测DNA疫苗免疫效果的方法。

关键词：疫苗,DNA pcDNA3 cC1 cC1循环抗原

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长链非编码RNA-H19特异性吸附微RNA-760调控nanog基因表达促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移

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第二军医大学学报 2019年第8期40卷 854-859页

作者：李莎朱怡卿石荟戈霞晖许靖商艳王芳白冲海军军医大学(第二军医大学)长海医院呼吸与危重症医学科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433 上海中医药大学附属第七人民医院呼吸科上海200137

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法收集2015年10月至2016年5月海军军医大学(第二军医大学)长海医院确诊的20例NSCLC患者手术切除的NSCLC组织及相应的癌旁正常组织。通过实... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法收集2015年10月至2016年5月海军军医大学(第二军医大学)长海医院确诊的20例NSCLC患者手术切除的NSCLC组织及相应的癌旁正常组织。通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测NSCLC组织及癌旁正常组织,人NSCLC细胞系A549、NCI-H1299和人正常肺上皮细胞系BEAS-2B中lncRNA-H19的表达。在A549细胞中过表达lncRNA-H19后,采用CCK-8法和Transwell实验分别检测细胞的增殖和迁移能力。利用生物信息学分析预测lncRNA-H19与微RNA(miRNA)-760的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA-H19对miRNA-760的吸附作用,采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测lncRNA-H19过表达对miRNA-760及下游靶基因nanog表达的影响。通过对A549细胞转染miRNA-760模拟剂过表达miRNA-760后,检测过表达miRNA-760对lncRNA-H19促进NSCLC细胞增殖和迁移作用的影响。结果LncRNA-H19在NSCLC组织和A549、NCI-H1299细胞中均呈高表达,分别与其在癌旁正常组织和BEAS-2B细胞中的表达水平相比差异均有统计学意义(P均<0.01)。与对照组相比,过表达lncRNA-H19后A549细胞的增殖能力增强(P<0.05)、迁移能力提高(P<0.01)。在线数据库starBase v3.0预测分析结果显示lncRNA-H19能特异性吸附miRNA-760。双荧光素酶报告基因检测结果显示lncRNA-H19与miRNA-760之间存在特异性结合。与对照组相比,过表达lncRNA-H19可抑制A549细胞中miRNA-760的表达(P均<0.05),并促进其下游基因nanog在mRNA和蛋白水平的表达(P均<0.01)。过表达miRNA-760可抑制lncRNA-H19对A549细胞增殖和迁移的促进作用,与lncRNA-H19过表达组相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LncRNA-H19可通过特异性吸附miRNA-760调控nanog基因表达,从而促进NSCLC细胞增殖和迁移。

关键词：非小细胞肺癌长链非编码RNA-H19 微RNA-760 nanog基因

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血液AFP mRNA在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的诊断意义

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第二军医大学学报 1999年第3期20卷 192-193页

作者：刘扬吴孟超钱光相张柏和陈汉傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院胆道外科第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物开放实验室

目的：探讨血液ＡＦＰｍＲＮＡ在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义。方法：应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：２１例伴有肝外远处器... 详细信息

目的：探讨血液ＡＦＰｍＲＮＡ在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义。方法：应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：２１例伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ均表达阳性（１００％），１９例复发性肝癌患者中有７例血液ＡＦＰｍＲＮＡ表达阳性（３６．８％），两组比较差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结论：血液ＡＦＰｍＲＮＡ有希望成为判断肝癌复发或预测肝癌远处器官转移的客观性指标之一。

关键词：甲胎蛋白类肝肿瘤肿瘤转移 mRNA

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