检索结果-内蒙古大学图书馆

编码耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶的pheB基因在大肠杆菌中的亚克隆与高表达

第二军医大学学报 1997年第2期18卷 101-104页

作者：蔡在龙季朝能王学敏张洁董海沈仁权毛裕民复旦大学遗传学研究所第二军医大学基础医学部生物化学教研室

目的：构建ｐｈｅＢ基因高表达菌株，研究酶的耐热机制。方法与结果：通过ＰＣＲ扩增方法，对位于质粒ｐＦＤＡ１３上的ｐｈｅＢ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并未发生突变，然... 详细信息

目的：构建ｐｈｅＢ基因高表达菌株，研究酶的耐热机制。方法与结果：通过ＰＣＲ扩增方法，对位于质粒ｐＦＤＡ１３上的ｐｈｅＢ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并未发生突变，然后亚克隆于高表达载体ｐＪＬＡ５０３，转化Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１，经４２℃诱导，获得了高表达的基因产物，表达量占细菌总蛋白的３４．６％。并与ｘｙｌＥ基因编码的邻苯二酚２，３双加氧酶作了耐热性比较。结论：ｐｈｅＢ基因在大肠杆菌中获得了高表达，高表达后重组酶的耐热性未发生改变。

关键词： pheB基因耐热邻苯二酚双加氧酶大肠杆菌表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

^(60)Co-γ照射后早期小鼠肝组织基因表达谱

引用

第二军医大学学报 2006年第4期27卷 386-390页

作者：宋立华颜宏利蔡东联上海交通大学食品科学与工程系上海201101 第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学长海医院营养科上海200433

目的:以基因芯片技术研究辐射后小鼠肝脏的基因表达谱,从分子水平探讨辐射引起小鼠肝脏损伤的机制。方法:采用小鼠基因表达谱芯片(4 096个基因)对60Co-γ照射后48 h小鼠肝组织基因表达谱进行研究。RT-PCR验证基因芯片结果。结果:与正常... 详细信息

目的:以基因芯片技术研究辐射后小鼠肝脏的基因表达谱,从分子水平探讨辐射引起小鼠肝脏损伤的机制。方法:采用小鼠基因表达谱芯片(4 096个基因)对60Co-γ照射后48 h小鼠肝组织基因表达谱进行研究。RT-PCR验证基因芯片结果。结果:与正常小鼠相比,辐射后小鼠肝组织有124条基因差异表达,78条下调,46条上调。其中57条基因的功能已知,这些差异表达的基因按功能可分为6类:DNA修复和应激蛋白,细胞骨架,离子通道和转运蛋白,信号转导,免疫蛋白,代谢调控,其中下调基因主要为细胞骨架基因,而上调基因主要为细胞周期调控蛋白和转录因子。RT-PCR结果表明,Hspa5、Rasa3、Nqo1基因的表达和芯片结果一致。结论:辐射造成的肝损伤具有多靶点、多层次及多通路的特点。

关键词：辐射肝脏基因表达谱

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因工程综合性实验教学改革初探

引用

山西医科大学学报（基础医学教育版） 2009年第3期11卷 303-305页

作者：丁飞翔王玉招颜宏利孙树汉第二军医大学基础部医学遗传学教研室

传统的基因工程实验教学存在着资金投入少、知识结构老化、教学内容更新慢及学生学习被动等许多问题。因此,有必要通过教学改革来推动基因工程技术的实验教学,其主要措施有：加大资金投入、更新实验内容、加强师资培训、让学生参与实验... 详细信息

传统的基因工程实验教学存在着资金投入少、知识结构老化、教学内容更新慢及学生学习被动等许多问题。因此,有必要通过教学改革来推动基因工程技术的实验教学,其主要措施有：加大资金投入、更新实验内容、加强师资培训、让学生参与实验教学的准备、实验教学与科研实践相结合等。根据在基因工程实验教学的实践中积累的经验和体会,对实验的内容、教学方法和手段进行了充实和改革,并取得了一定的成绩。

关键词：基因工程教学改革综合性实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建立pESnx／FL穿梭质粒致突变测试系统的实验研究

引用

第二军医大学学报 1994年第4期15卷 318-322页

作者：印木泉徐唯邱信芳薛京伦第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室复旦大学遗传学研究所

本研究用电穿孔法将带有邻苯二酚氧化酶基因（ｘＹ１Ｅ基因）的质粒ｐＥＳｎｘ转染至５种哺乳动物细胞（ＦＬ，ＨＴ，ＬＴＲ，ＰＡ３１７和Ｗｇ３－ｈ）。结果表明，质粒ｐＥＳｎｘ在５种细胞中均可形成抗性克隆。但是，仅ｐＥＳｎｘ／... 详细信息

本研究用电穿孔法将带有邻苯二酚氧化酶基因（ｘＹ１Ｅ基因）的质粒ｐＥＳｎｘ转染至５种哺乳动物细胞（ＦＬ，ＨＴ，ＬＴＲ，ＰＡ３１７和Ｗｇ３－ｈ）。结果表明，质粒ｐＥＳｎｘ在５种细胞中均可形成抗性克隆。但是，仅ｐＥＳｎｘ／ＦＬ克隆可获得每皿５０个以上的转化子和低于１０－４的自发突变率，符合穿梭质粒测试系统的要求。为进一步验证可用于检测致突变性，用已知可诱发点突变的致癌物亚硝基胍（ＭＮＮＧ）处理ｐＥＳｎｘ／ＦＬ克隆细胞。结果表明，ＭＮＮＧ的诱发突变率高于自发突变率２７．８倍，并有剂量－效应关系。突变子快速鉴定结果显示，质粒稳定地存在于突变子中，并无大片段缺失和分子量改变，证实ＭＮＮＧ诱变的是点突变。

关键词：邻苯二酚氧化酶基因致突变质粒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因xylE编码的邻苯二酚2，3－双加氧酶在大肠杆菌中的亚克隆与高表达

引用

第二军医大学学报 1996年第4期17卷 306-312页

作者：蔡在龙王学敏毛积芳季朝能张洁董海沈仁权毛裕民上海第二军医大学基础医学部生物化学教研室上海复旦大学遗传学研究所

目的：构建ｘｙｌＥ基因高表达菌株，为快速检测芳香类化合物污染提供可能。方法和结果：通过ＰＣＲ扩增，将位于质粒ｐＴＧ４０２上的ｘｙｌＥ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并... 详细信息

目的：构建ｘｙｌＥ基因高表达菌株，为快速检测芳香类化合物污染提供可能。方法和结果：通过ＰＣＲ扩增，将位于质粒ｐＴＧ４０２上的ｘｙｌＥ基因进行扩增，克隆于ｐＵＣ１１８Ｎ和ｐＵＣ１１９Ｎ上，经双向测序，证明ＰＣＲ过程中并未发生突变，然后进一步克隆于高表达载体ｐＪＬＡ５０３，转化Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１，经４２℃诱导，获得了高表达的基因产物，表达量占全菌总蛋白的３４．２％。结论：ｘｙｌＥ基因在大肠杆菌中获得了高表达。

关键词： xylE基因邻苯二酚双加氧酶大肠杆菌亚克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

遗传性视网膜色素变性3型基因位点单拷贝探针库的构建

引用

第二军医大学学报 1997年第3期18卷 225-227页

作者：周炜缪为民朱冠山姚玉河焦炳华柴建华第二军医大学基础医学部微生物学教研室复旦大学遗传学研究所

目的：构建遗传性视网膜色素变性３型（ＲＰ３）基因位点的单拷贝探针库。方法：对包含ＲＰ３位点的酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＨＯ５１２进行亚克隆，用人总ＤＮＡ杂交法去除重复顺序克隆。结果：构成ＲＰ３位点特异的单拷贝探针库。结... 详细信息

目的：构建遗传性视网膜色素变性３型（ＲＰ３）基因位点的单拷贝探针库。方法：对包含ＲＰ３位点的酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＨＯ５１２进行亚克隆，用人总ＤＮＡ杂交法去除重复顺序克隆。结果：构成ＲＰ３位点特异的单拷贝探针库。结论：该库对于构建ＲＰ３位点精细的Ｃｏｓｍｉｄ克隆重叠群及最终识别ＲＰ３基因提供了一种有效的工具。

关键词：视网膜色素变性基因位点单拷贝探针库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脓毒症和脓毒性休克大鼠的肺肾肠、内皮素-1和内皮素A受体基因表达变化及其意义

引用

中华实验外科杂志 2008年第6期25卷 740-742页

作者：陈学云张希洲戴建新孙树汉陈德昌杨兴易第二军医大学附属长征医院普外科上海200003 湖北宜昌市第一人民医院急救中心第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长征医院急救科

目的观察大鼠脓毒症和脓毒性休克时内皮素-1（ET-1）和内皮素A受体（ETAR）基因在肺、肾和小肠黏膜中的表达变化以及各脏器功能受损情况。方法24只雄性大鼠随机分为正常组、对照组、脓毒症组和脓毒性体克组；通过脓毒症和脓毒性休克大... 详细信息

目的观察大鼠脓毒症和脓毒性休克时内皮素-1（ET-1）和内皮素A受体（ETAR）基因在肺、肾和小肠黏膜中的表达变化以及各脏器功能受损情况。方法24只雄性大鼠随机分为正常组、对照组、脓毒症组和脓毒性体克组；通过脓毒症和脓毒性休克大鼠模型，采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）以葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）基因为内参照基因，分别检测脓毒症和脓毒性休克组肾、肺和小肠黏膜组织ET-1和ETAR基因表达情况，同时检测其血清丙氨酸转氨酶（ALT）、白蛋白（A）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）和动脉血气变化。结果脓毒症组肾肺肠组织ET-1 mRNA表达相对量分别为87％、74％、82％，ETAR mRNA为82％、65％、78％；脓毒性休克组肾肺肠组织ET-1 mRNA表达相对量分别为98％、85％、93％，ETAR mRNA为95％、80％、91％；较正常组和对照组均明显增加（P〈0．01）。脓毒性休克组大鼠血清ALT为288．50±194．10、BUN 58，00±5．20，Crl33．67±18．70，较正常组、对照组和脓毒症组均显著上升，差异有统计学意义（P〈0．01）；脓毒症组血清ALT为97．17±6．30、BUN 30，17±2，30、Cr75．83±6．70，较正常组明显升高（P〈0．01）。脓毒症组和脓毒性休克组早期动脉血气分析为低氧和呼吸性碱中毒，脓毒性休克组后期出现明显的低氧血症和CO2潴留。结论ET-1和ETAR参与了脓毒症和脓毒性休克的病理生理过程，且可能是参与脓毒症和脓毒性休克并发多脏器功能障碍综合征（MODS）启动的因子之一。

关键词：败血症休克脓毒性内皮素基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核杆菌抗原MPT64基因在大肠杆菌中的表达及纯化

引用

第二军医大学学报 2004年第10期25卷 1146-1147页

作者：王庆敏胡振林周凤娟殷明章建程孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 上海海军医学研究所舰艇卫生研究室上海200433

近几年来,结核病的发病有上升的趋势,全世界每年约有300万人死于结核病,800万人患结核病[1].尤其是多重耐药菌株的出现及与艾滋病共同感染更加重了结核病对人类健康的危害.

关键词：结核分枝杆菌 MPT64抗原表达纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

克隆超基因家族中新基因的一种PCR同源引物

引用

第二军医大学学报 1998年第2期19卷 101-105页

作者：郭葆玉久野耕嗣张淑英松岛纲治第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室日本金泽大学癌症研究所第二军医大学科研处新药评价中心

目的：用同源引物克隆ＲＮＡ低丰度表达的小鼠β－趋化因子受体。方法：将β－趋化因子受体小鼠ＭＩＰ－１αＲ，人ＭＣＰ－１Ｒ和大鼠ＩＬ－８Ｒ跨膜区中高度保守的氨基酸序列中的核苷酸进行相似序列对比后，设计出同源引物，再用ＲＴ... 详细信息

目的：用同源引物克隆ＲＮＡ低丰度表达的小鼠β－趋化因子受体。方法：将β－趋化因子受体小鼠ＭＩＰ－１αＲ，人ＭＣＰ－１Ｒ和大鼠ＩＬ－８Ｒ跨膜区中高度保守的氨基酸序列中的核苷酸进行相似序列对比后，设计出同源引物，再用ＲＴ－ＰＣＲ扩增出ＤＮＡ片段，经基因库检索为该超基因家族中的新基因序列后设计特异引物，用ＭａｒａｔｈｏｎＰＣＲ扩增出该新基因。结果：成功克隆出小鼠β－趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ｃＤＮＡ全基因序列，序列全长２８８８ｂｐ，开放阅读框１０６５个核苷酸，编码３５５个氨基酸。该序列经序列分析、配体结合试验及国际基因库检索证实为该超基因家族中的一个新基因成员。结论：该克隆策略的引物设计思路较为新颖，能有效捕获超基因家族中的新基因。该克隆方法敏感、高效。

关键词：克隆超基因家族同源引物 β趋化因子受体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠神经细胞p35^(nck5a)基因5′非编码区基因表达调控功能初步研究

引用

第二军医大学学报 2002年第2期23卷 147-149页

作者：朱海英周常文王秀凤傅继梁李建秀王新民胡以平第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 山东省东营市环保科研所基础医学部细胞生物学教研室

目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小... 详细信息

目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小鼠实验体系来观察该片段在体内、外基因表达调控的差异。结果 :体外培养细胞中 p35 nck5a基因 5′侧翼序列不具有决定报告基因神经特异性表达的能力 ,但在基因组中整合有相同表达载体的转基因小鼠体内却能够指导报告基因的神经限制性表达。结论 :这种差异提示进行体内。

关键词： p35^nck5a基因小鼠转基因基因表达调控神经细胞 AD病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：