检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2002年第6期22卷 622-624页

作者：王庆敏陈蕊雯吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血... 详细信息

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血清中的IgG和IgG2a的水平 ;用MTT法检测小鼠脾细胞增殖反应 ,用ELISA法检测其分泌的IL 2和IL 4的水平。最后在仔猪中进行攻击实验 ,观察pcDNA3 IL 2质粒的免疫刺激作用。结果　注射疫苗后 ,pcDNA3 IL 2协同注射组增强了副肌球蛋白特异性的IgG和IgG2a的水平 ,增强了脾细胞的增殖反应 ,提高了其分泌IL 2的水平 ,但对IL 4的水平产生轻微影响。仔猪攻击实验中 ,共同注射IL 2基因组提高了仔猪的相对保护率。结论对于副肌球蛋白核酸疫苗而言 ,人的IL

关键词：副肌球蛋白猪囊尾蚴人IL-2 核酸疫苗免疫保护 ELISA法囊虫病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪囊尾蚴副肌球蛋白cDNA中CpG序列的免疫激活作用

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第5期19卷 298-299页

作者：孙树汉郭瀛军王庆敏陈蕊雯第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　探讨猪囊尾蚴副肌球蛋白 (又称为AntigenB ,AgB)cDNA中CpG序列的免疫激活作用。　方法　以pcDNA3 AgB质粒疫苗、CpG序列突变的pcDNA3 AgB′质粒疫苗、pcDNA3载体质粒和AgB蛋白质分别免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,2wk后开始用ELISA检测小鼠... 详细信息

目的　探讨猪囊尾蚴副肌球蛋白 (又称为AntigenB ,AgB)cDNA中CpG序列的免疫激活作用。　方法　以pcDNA3 AgB质粒疫苗、CpG序列突变的pcDNA3 AgB′质粒疫苗、pcDNA3载体质粒和AgB蛋白质分别免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,2wk后开始用ELISA检测小鼠血清中IgG和IgG2a的效价。　结果　免疫接种的第 2周起实验组IgG与IgG2a效价开始升高 ,至第 4周达到峰值。其中以pcDNA3 AgB组升高最为显著 (P <0 0 5 )。　结论　pcDNA3 AgB核酸疫苗所诱导的小鼠免疫反应 ,不仅具有其表达产物AgB蛋白的抗原作用 ,AgBcDNA中的CpG序列也具有免疫激活作用。

关键词：囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗 CpG序列免疫激活作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠锌指蛋白基因ZF-12基因剔除的ES细胞系的建立

引用

Acta Genetica Sinica 2002年第10期29卷 860-864页

作者：厉建中杨桦傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获... 详细信息

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获得 4个ZF 12 + /-基因的ES细胞杂合子克隆 ,其生长状态良好 ,为进一步建立ZF 12基因剔除的小鼠动物模型创造了条件。

关键词：小鼠锌指蛋白基因 ZF-12 基因剔除 ES细胞系基因打靶胚胎干细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪囊尾蚴抗原cC1与γ-干扰素融合蛋白在大肠杆菌中的表达

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第4期17卷 215-217页

作者：郭瀛军吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤ... 详细信息

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤＮＡ，两ｃＤＮＡ经接头融合后构建成融合形式的原核表达载体转入大肠杆菌ＸＬ Ｂｌｕｅ。结果：经酶切分析，表明重组载体中含１５ｋｂ插入片段。ＳＤＳ ＰＡＧＥ显示一５２ｋＤａ的诱导产物。结论：猪ＩＦＮγ和猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合ｃＤＮＡ在大肠杆菌中获得表达。

关键词：囊尾蚴病融合蛋白 γ-干扰素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

引用

Acta Genetica Sinica 2002年第7期29卷 594-598页

作者：车文良贺艳姚真真李坚傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载... 详细信息

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体 ,该载体包括由人凝血因子IX编码区及第一内含子构成的人凝血因子IX基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子 (MCKe)、鸡 β -肌动蛋白启动子 (bA)及PolyA ,命名为pMe4bAIXml质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 817只凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核 ,再将它们分别回输 4 5只假孕受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 6 9只 ,存活 6 3只。采用PCR与基因组Southern杂交筛选法鉴定小鼠 ,证实 6只小鼠基因组中整合有含特定点突变的pMe4bAIXml质粒 ,并对 1只小鼠的PCR产物进行测序。

关键词：血友病乙转基因小鼠模型点突变人凝血因子IX基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪囊尾蚴抗原cC1在大肠杆菌中的克隆及高效表达

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第1期18卷 37-39页

作者：陈蕊雯林懿孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

[目的 ]在大肠杆菌中克隆及高效表达猪囊尾蚴抗原cC1。 [方法 ]将cC1cDNA片段以BamHI和PstI克隆到pGEM 3Z载体 ,改换限制性内切酶位点成BamHI和PstI,加上人工接头PstI BamHI XhoI后 ,克隆到pGEX 5T ,构建重组原核表达载体pGE X5T cC1。 ... 详细信息

[目的 ]在大肠杆菌中克隆及高效表达猪囊尾蚴抗原cC1。 [方法 ]将cC1cDNA片段以BamHI和PstI克隆到pGEM 3Z载体 ,改换限制性内切酶位点成BamHI和PstI,加上人工接头PstI BamHI XhoI后 ,克隆到pGEX 5T ,构建重组原核表达载体pGE X5T cC1。 [结果 ]培养 3h、IPTG诱导 6h ,cC1表达量最高 ,表达量占细菌总量的 5 7% ,Westernblotting结果表明猪囊尾蚴抗原cC1蛋白与囊尾蚴病猪血清有特异性的结合条带。 [结论 ]猪囊尾蚴抗原cC1在大肠杆菌中获得高效表达。

关键词：囊尾蚴抗原基因表达克隆大肠杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

孕妇外周血中胎儿游离DNA在产前诊断中的应用

引用

第二军医大学学报 2009年第4期30卷 442-446页

作者：王文博张毅孙树汉第二军医大学学员十队上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、... 详细信息

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、早产和胎儿染色体疾病的临床诊断新指标。本文对母体外周血中胎儿游离DNA的生化特征及其临床应用研究,进行了总结和分析。

关键词：胎儿游离DNA 游离核酸无创性产前诊断基因诊断孕妇血浆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪囊尾蚴抗原与猪白细胞介素-4基因融合DNA疫苗载体的构建

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第3期17卷 172-174页

作者：吴丹郭瀛军孙树汉上海第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的：为增强猪囊尾蚴抗原ｃＣ１的免疫保护作用而构建一表达猪白细胞介素４（ＩＬ４）与ｃＣ１抗原融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别扩增猪ＩＬ４ｃＤＮＡ和ｃＣ１ｃ ... 详细信息

目的：为增强猪囊尾蚴抗原ｃＣ１的免疫保护作用而构建一表达猪白细胞介素４（ＩＬ４）与ｃＣ１抗原融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别扩增猪ＩＬ４ｃＤＮＡ和ｃＣ１ｃＤＮＡ片段并进行融合，获得的嵌合基因ＩＬ４ｃＣ１中含有１０个氨基酸的中间接头序列，同时对其５’ ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。结果：经酶切鉴定，证实有一１．５ｋｂ的片段插入载体，其ＤＮＡ序列分析结果与文献报道和实验设计完全一致。结论：表达猪ＩＬ４与猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体构建成功。

关键词：囊尾蚴病抗原基因融合 DNA疫苗 IL-4

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

孕妇血样采集后体外存放对血浆中胎儿游离DNA水平的影响

引用

第二军医大学学报 2008年第9期29卷 1042-1045页

作者：李勤张毅丁宇烽胡振林孙树汉惠宁第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的:探讨孕妇血样采集后体外存放过程中血浆游离DNA水平的影响因素。方法:采集孕妇血样,体外4℃存放6、36h后,实时定量PCR检测孕妇外周游离DNA水平,Annexin Ⅴ/PI双染色法流式分析血样白细胞死亡情况,速率法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活... 详细信息

目的:探讨孕妇血样采集后体外存放过程中血浆游离DNA水平的影响因素。方法:采集孕妇血样,体外4℃存放6、36h后,实时定量PCR检测孕妇外周游离DNA水平,Annexin Ⅴ/PI双染色法流式分析血样白细胞死亡情况,速率法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性,单相酶扩散法测定血浆DNA酶活性。结果:血样体外存放36h后,血浆中β-globin基因的拷贝数较存放6h的样品显著增加,而SRY基因拷贝数明显减少;4℃存放条件下,妊娠晚期孕妇外周血中胎儿DNA占总DNA百分比从6h的(10.3±5.6)%下降到36h的(3.0±2.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。体外存放6h的血样中基本未检出死亡细胞,而存放36h的血样中分别检出了坏死和凋亡的白细胞;36h样品血浆中LDH活性较6h样品显著升高(P<0.05)。单相酶扩散法结果表明,血浆DNA酶在4℃时虽然活性显著减弱,但仍然保持降解DNA的能力。结论:血样采集后体外存放时间过长会导致血浆总游离DNA增多,而胎儿DNA减少,这种变化可能与血样体外存放过程中白细胞死亡和血浆DNA酶对胎儿DNA的降解作用有关;胎儿DNA抽提应在血样采集后尽早(6h内)进行。

关键词：孕妇血浆胎儿游离DNA Dnase 乳酸脱氢酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

类风湿关节炎易感基因的全基因组关联分析研究进展

引用

第二军医大学学报 2009年第11期30卷 1303-1307页

作者：郝峻烽魏玉保陈蕊雯第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种炎性侵润关节及其周围结缔组织的系统性自身免疫疾病,也是一种具有复杂遗传模式的多基因遗传病。环境因素和遗传因素共同影响RA的发生、发展。它的易感基因研究给临床的诊断、治疗提供了理... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种炎性侵润关节及其周围结缔组织的系统性自身免疫疾病,也是一种具有复杂遗传模式的多基因遗传病。环境因素和遗传因素共同影响RA的发生、发展。它的易感基因研究给临床的诊断、治疗提供了理论基础。新兴的全基因组关联分析作为寻找易感基因的高通量技术,是发现多基因遗传性疾病包括RA易感基因的强大工具。它不仅能够验证已有的易感基因位点,还能够发现新的候选易感位点。近5年来,用全基因组关联分析研究易感基因取得了很多新的进展,为探明RA的发病机制和治疗RA提供了新的契机。本文就近年来全基因组关联分析技术研究RA易感基因的进展做一综述。

关键词：全基因组关联分析类风湿关节炎易感基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：