检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2020年第8期41卷 871-875页

作者：刘晓宁邹嫣琼袁继行李贵苹杭勤黄莹上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433

目的通过对小鼠肝脏冰冻切片进行不同的封闭处理,探寻消除小鼠肝脏自发荧光的最佳方法,以降低对免疫荧光阳性信号的干扰,提高免疫荧光结果的准确性。方法(1)经脾静脉注射肝脏荷瘤裸小鼠:将Hepa1-6-GFP细胞通过脾脏注射方法使其在雄性无... 详细信息

目的通过对小鼠肝脏冰冻切片进行不同的封闭处理,探寻消除小鼠肝脏自发荧光的最佳方法,以降低对免疫荧光阳性信号的干扰,提高免疫荧光结果的准确性。方法(1)经脾静脉注射肝脏荷瘤裸小鼠:将Hepa1-6-GFP细胞通过脾脏注射方法使其在雄性无胸腺BALB/c裸小鼠肝脏定植,并将肝脏进行冰冻连续切片,对切片分别进行AB液(内源性生物素封闭液)、blocking、AB液+blocking、丙酮+AB液+blocking封闭处理,然后检测小鼠肝脏冰冻切片自发荧光。(2)C57BL/6小鼠:对C57BL/6小鼠肝脏进行冰冻连续切片,对切片分别进行上述4种封闭处理,用F4/80标记肝巨噬细胞(Kupffer细胞),然后检测小鼠肝脏冰冻切片自发荧光。结果肝脏组织冰冻切片免疫荧光染色时,4种封闭处理都可以减弱肝脏切片的自发荧光,但丙酮+AB液+blocking封闭处理效果最佳。结论丙酮+AB液+blocking联合应用对小鼠肝脏组织冰冻切片自发荧光的消除效果最好。

关键词：小鼠肝冰冻切片自发荧光免疫荧光技术

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姜黄素诱导人肝癌细胞系Huh7自噬和凋亡

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第二军医大学学报 2019年第1期40卷 38-42页

作者：尹煜鹏孙树汉海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433

目的探讨姜黄素诱导人肝癌细胞Huh7自噬和凋亡的作用,以及抑制自噬对姜黄素诱导凋亡的影响。方法将姜黄素(5、10、20、40μmol/L)加入人肝癌细胞系Huh7的培养液中,用CCK-8检测细胞增殖水平变化。Huh7细胞用5～40μmol/L姜黄素培养48 h,... 详细信息

目的探讨姜黄素诱导人肝癌细胞Huh7自噬和凋亡的作用,以及抑制自噬对姜黄素诱导凋亡的影响。方法将姜黄素(5、10、20、40μmol/L)加入人肝癌细胞系Huh7的培养液中,用CCK-8检测细胞增殖水平变化。Huh7细胞用5～40μmol/L姜黄素培养48 h,通过蛋白质印迹法检测自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值,免疫荧光法检测自噬小体的形成,评估Huh7细胞自噬水平的变化。通过流式细胞术检测Huh7细胞凋亡情况。加入5 mmol/L自噬抑制剂3-甲基嘌呤(3-MA)和20μmol/L姜黄素培养Huh7细胞,检测Huh7细胞凋亡水平和自噬水平的变化。结果 CCK-8检测显示姜黄素能抑制Huh7细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),且细胞凋亡率随着姜黄素浓度的升高而上升;蛋白质印迹检测显示加入姜黄素后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值上升(P<0.05,P<0.01),免疫荧光检测显示加入20μmol/L姜黄素后自噬小体增多。与单独使用20μmol/L姜黄素培养的Huh7细胞相比,姜黄素联用3-MA培养的Huh7细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值下降(P<0.01),自噬小体减少。流式细胞术检测发现5～40μmol/L姜黄素促进了Huh7细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),而联用3-MA后与单独使用20μmol/L姜黄素培养相比引起的Huh7细胞凋亡减少(P<0.05)。结论姜黄素能诱导Huh7细胞凋亡、抑制细胞增殖并促进细胞自噬,抑制自噬能减弱姜黄素对Huh7细胞的诱导凋亡效应。

关键词：肝细胞癌姜黄素自噬细胞凋亡

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两种战伤编码的比较与转换研究

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中国急救复苏与灾害医学杂志 2021年第6期16卷 675-679页

作者：胡鹏伟解宏伟杨晨秦宇迪陈福兴常旺陈国良张磊刘晓荣武警后勤学院卫生勤务系卫生勤务教研室天津300300 武警后勤学院基础部政治工作教研室天津300300 武警后勤学院服务保障中心天津300300 第二军医大学卫生勤务学系卫生勤务学教研室上海200433 第二军医大学海军医学系海军卫勤与装备教研室上海200433

目的目前美军较为成熟的战伤编码系统为美军战地医疗系统伤情编码(Deployable medical systems patient conditions,PCs)和美军战伤定级编码系统(Military Combat Injury Scale,MCIS)。PCs由于包含战伤诊断、救治概要、生存概率以及后... 详细信息

目的目前美军较为成熟的战伤编码系统为美军战地医疗系统伤情编码(Deployable medical systems patient conditions,PCs)和美军战伤定级编码系统(Military Combat Injury Scale,MCIS)。PCs由于包含战伤诊断、救治概要、生存概率以及后送要求等要素,广泛应用于卫勤领域的模拟仿真系统,但对于真实战伤诊断数据的编码率较低,且无法对严重程度定级。MCIS具有针对强、简单易用等特点,能够较好地对真实战伤诊断进行编码并对战伤严重度定级,但目前仅包括战伤诊断要素,缺少卫勤决策支持的其他要素。因此本文通过对两套编码系统进行对比与转换研究,探究建立两套编码系统转换规则的可行性,从而使得真实战伤数据和模拟仿真数据相结合,共同为卫勤决策提供支持,并为构建我军战伤编码提供建议。方法提取PCs中187个战伤伤情编码,将PCs和MCIS编码指导手册分别交给3名资深编码员,分别将两套编码进行匹配并记录。计算不同编码员匹配记录的加权Kappa系数用以评价评分者间信度。结果两套编码匹配记录的评分者信度较差。结论亟待建立一套既能编码真实战伤诊断数据,又涵盖卫勤决策支持要素的战伤分类与编码系统,从而将真实数据与模拟仿真数据相结合,共同形成决策证据为卫勤保障提供决策支持。

关键词：战伤编码匹配转换评分者间信度

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长链非编码RNA-H19特异性吸附微RNA-760调控nanog基因表达促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移

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第二军医大学学报 2019年第8期40卷 854-859页

作者：李莎朱怡卿石荟戈霞晖许靖商艳王芳白冲海军军医大学(第二军医大学)长海医院呼吸与危重症医学科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433 上海中医药大学附属第七人民医院呼吸科上海200137

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法收集2015年10月至2016年5月海军军医大学(第二军医大学)长海医院确诊的20例NSCLC患者手术切除的NSCLC组织及相应的癌旁正常组织。通过实... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法收集2015年10月至2016年5月海军军医大学(第二军医大学)长海医院确诊的20例NSCLC患者手术切除的NSCLC组织及相应的癌旁正常组织。通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测NSCLC组织及癌旁正常组织,人NSCLC细胞系A549、NCI-H1299和人正常肺上皮细胞系BEAS-2B中lncRNA-H19的表达。在A549细胞中过表达lncRNA-H19后,采用CCK-8法和Transwell实验分别检测细胞的增殖和迁移能力。利用生物信息学分析预测lncRNA-H19与微RNA(miRNA)-760的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA-H19对miRNA-760的吸附作用,采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测lncRNA-H19过表达对miRNA-760及下游靶基因nanog表达的影响。通过对A549细胞转染miRNA-760模拟剂过表达miRNA-760后,检测过表达miRNA-760对lncRNA-H19促进NSCLC细胞增殖和迁移作用的影响。结果LncRNA-H19在NSCLC组织和A549、NCI-H1299细胞中均呈高表达,分别与其在癌旁正常组织和BEAS-2B细胞中的表达水平相比差异均有统计学意义(P均<0.01)。与对照组相比,过表达lncRNA-H19后A549细胞的增殖能力增强(P<0.05)、迁移能力提高(P<0.01)。在线数据库starBase v3.0预测分析结果显示lncRNA-H19能特异性吸附miRNA-760。双荧光素酶报告基因检测结果显示lncRNA-H19与miRNA-760之间存在特异性结合。与对照组相比,过表达lncRNA-H19可抑制A549细胞中miRNA-760的表达(P均<0.05),并促进其下游基因nanog在mRNA和蛋白水平的表达(P均<0.01)。过表达miRNA-760可抑制lncRNA-H19对A549细胞增殖和迁移的促进作用,与lncRNA-H19过表达组相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LncRNA-H19可通过特异性吸附miRNA-760调控nanog基因表达,从而促进NSCLC细胞增殖和迁移。

关键词：非小细胞肺癌长链非编码RNA-H19 微RNA-760 nanog基因

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CRISPR/Cas9基因编辑技术在肿瘤中的应用

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医学研究生学报 2018年第2期31卷 210-214页

作者：尹煜鹏袁继行孙树汉第二军医大学遗传教研室上海医学硕士研究生200433

成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白酶9(Cas9)作为第三代基因编辑技术由于其基因编辑的高效性和准确性被广泛用于肿瘤研究领域,并探索性地用于肿瘤治疗。但CRISPR/Cas9技术走向临床还需要面临许多挑战。文章简单的介... 详细信息

成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白酶9(Cas9)作为第三代基因编辑技术由于其基因编辑的高效性和准确性被广泛用于肿瘤研究领域,并探索性地用于肿瘤治疗。但CRISPR/Cas9技术走向临床还需要面临许多挑战。文章简单的介绍CRISPR/Cas9的原理并探讨其在肿瘤研究领域和临床肿瘤治疗中的应用。

关键词： CRISPR/Cas9 基因编辑肿瘤研究肿瘤治疗

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哮喘小鼠气道平滑肌细胞磷酸二酯酶4D基因启动子甲基化的研究

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广东医学 2019年第5期40卷 626-630页

作者：李晓鸾朱怡卿王芳商艳河北医科大学第一医院变态反应科河北石家庄050031 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)长海医院呼吸与危重症医学科上海200433

目的观察屋尘螨诱导哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞中磷酸二酯酶4D(phosphodiestarase 4D,PDE4D)基因表达水平,及PDE4D基因启动子区域甲基化水平的改变。方法 12只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组,每组6只。模型组用屋尘螨(house dust m... 详细信息

目的观察屋尘螨诱导哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞中磷酸二酯酶4D(phosphodiestarase 4D,PDE4D)基因表达水平,及PDE4D基因启动子区域甲基化水平的改变。方法 12只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组,每组6只。模型组用屋尘螨(house dust mite,HDM)致敏建立哮喘模型,对照组用磷酸盐缓冲液代替。检测小鼠肺功能变化,观察小鼠肺组织病理变化,进行肺泡灌洗并对灌洗液中免疫细胞分类、计数。实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测气道平滑肌细胞中PDE4D基因mRNA的表达量,重硫酸盐测序分析PDE4D基因启动子区域DNA甲基化水平。结果与对照组小鼠相比,模型组小鼠气道平滑肌细胞中PDE4D基因mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),PDE4D启动子区域的甲基化位点的整体甲基化程度显著下降(P<0.05)。此外,部分甲基化修饰位点改变。结论哮喘小鼠中PDE4D基因启动子区域的甲基化水平改变,可能通过调控PDE4D基因表达,参与哮喘的发生发展。

关键词：哮喘气道平滑肌磷酸二酯酶4D 甲基化

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姜黄素对哮喘小鼠气道平滑肌细胞磷酸二酯酶4D基因表达及甲基化的影响

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广东医学 2019年第20期40卷 2843-2847页

目的探讨姜黄素对哮喘小鼠气道平滑肌细胞中磷酸二酯酶4D(phosphodiestarase 4D,PDE4D)基因的表达及其启动子区域甲基化的影响。方法将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、哮喘模型组、姜黄素干预组,每组6只。哮喘模型组和姜黄素... 详细信息

目的探讨姜黄素对哮喘小鼠气道平滑肌细胞中磷酸二酯酶4D(phosphodiestarase 4D,PDE4D)基因的表达及其启动子区域甲基化的影响。方法将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、哮喘模型组、姜黄素干预组,每组6只。哮喘模型组和姜黄素干预组小鼠分别给予腹腔注射屋尘螨(house dust mite,HDM)溶液以致敏、激发建立哮喘模型。在模型建立过程中,姜黄素干预组小鼠1次/d给予200 mg/kg姜黄素灌胃,共21 d。对照组小鼠给予等剂量的生理盐水腹腔注射及激发。对小鼠进行支气管肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液并对肺泡灌洗液中的细胞进行分类和计数;采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠肺组织病理结构改变;采用实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测小鼠气道平滑肌细胞中PDE4D mRNA的表达,通过甲基化特异性PCR检测PDE4D基因启动子区域的甲基化水平。结果与对照组相比,哮喘模型组小鼠支气管肺泡灌洗液中总细胞数目和分类细胞数目均升高(P<0.01)。与哮喘模型组相比,姜黄素干预组小鼠的支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数目均下降(P<0.05,P<0.01);小鼠的肺组织炎性症状减轻,气道重塑改善;气道平滑肌细胞中PDE4D mRNA表达降低(P<0.05);PDE4D基因启动子区域甲基化水平升高,是哮喘模型组的(2.34±0.42)倍(P<0.01)。结论姜黄素干预能够部分缓解HDM致敏引起的小鼠支气管炎性细胞浸润、气道结构重塑,并能通过调控PDE4D基因的甲基化水平从而抑制PDE4D mRNA表达。

关键词：哮喘姜黄素气道平滑肌细胞磷酸二酯酶4D 甲基化

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八年制医学生临床遗传学教学中应用翻转课堂的可行性探讨

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医学教育研究与实践 2018年第1期26卷 43-45页

作者：戴智慧杨富第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

介绍了"翻转课堂"的背景知识,针对八年制医学生临床遗传学教学现状,分析了临床遗传学教学中实施"翻转课堂"的可行性和需要注意的问题,以提高八年制医学生遗传学知识的应用能力;分析了翻转课堂在临床遗传学教学中应... 详细信息

介绍了"翻转课堂"的背景知识,针对八年制医学生临床遗传学教学现状,分析了临床遗传学教学中实施"翻转课堂"的可行性和需要注意的问题,以提高八年制医学生遗传学知识的应用能力;分析了翻转课堂在临床遗传学教学中应用的局限性和应对策略。

关键词：临床遗传学翻转课堂教学医学生

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自噬在电离辐射诱导的小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用

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第二军医大学学报 2017年第10期38卷 1225-1230页

作者：杨文军黄金凤刘岩朱怡卿王芳孙树汉第二军医大学长海医院临床遗传科上海200433 第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433

目的探讨自噬在电离辐射诱导小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用。方法将小鼠精母细胞GC-2分为空白对照组和不同剂量(2、4和8Gy)60Co辐射处理组。采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹实验观... 详细信息

目的探讨自噬在电离辐射诱导小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用。方法将小鼠精母细胞GC-2分为空白对照组和不同剂量(2、4和8Gy)60Co辐射处理组。采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹实验观察自噬相关蛋白LC3(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)和Beclin1表达水平的改变,使用荧光显微镜观察GC-2细胞内自噬小体的变化。用5mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理GC-2细胞2h再给予60 Co辐射处理,观察自噬抑制剂联合电离辐射对细胞凋亡率的影响以及自噬相关蛋白表达水平的改变。结果与空白对照组相比,GC-2细胞经60Co辐射处理后细胞凋亡率升高(P<0.05),荧光显微镜下可见细胞自噬体明显增多,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平增加(P<0.05)。预先用5mmol/L 3-MA处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平与未经3-MA处理组相比降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论电离辐射可以诱导精母细胞发生自噬,抑制细胞自噬后可增强电离辐射对精母细胞的杀伤作用。

关键词：电离辐射精母细胞自噬细胞凋亡

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美军的虫媒病防控策略及其对我军的启示:以利什曼病防控为例

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第二军医大学学报 2017年第7期38卷 918-922页

作者：高景鹏彭恒马雅军第二军医大学热带医学与公共卫生学系热带传染病学教研室上海200433 第二军医大学基础部病原生物学教研室上海200433

虫媒病是由病媒生物传播病原体而引起的疾病,严重时会导致军队的非战斗减员增加,甚至军事行动失败。本文介绍了美军在伊拉克塔里尔空军基地的"利什曼病防控计划",总结和剖析了美军的虫媒病防控策略,并提出我军应借鉴美军成功... 详细信息

虫媒病是由病媒生物传播病原体而引起的疾病,严重时会导致军队的非战斗减员增加,甚至军事行动失败。本文介绍了美军在伊拉克塔里尔空军基地的"利什曼病防控计划",总结和剖析了美军的虫媒病防控策略,并提出我军应借鉴美军成功经验,因地制宜地制定防控虫媒病的计划和策略,以提高我军应对虫媒病威胁的能力。

关键词：军队卫生虫媒病预防和控制利什曼病

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