检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2021年第1期42卷 8-13页

作者：吴兵安钱汐晶吴兴安徐铮昊罗正汉唐海琳赵平戚中田海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海200433 空军军医大学基础医学院微生物学教研室西安710032

目的检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制。方法用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50)。YFV感染Huh-7细... 详细信息

目的检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制。方法用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50)。YFV感染Huh-7细胞的同时加入不同浓度(0.04、0.2、1、5、25μmol/L)的利福平,检测其抗YFV感染的剂量效应,并计算IC50。YFV感染Huh-7细胞的同时加入5μmol/L利福平,孵育不同时长(2、4、8、12、24 h),检测其抗YFV感染的时间效应。YFV感染Huh-7细胞后,在感染的不同时间段(2、4、6、8、12 h)加入25μmol/L利福平(药物作用时间2 h,病毒感染2 h),检测其抗YFV感染最显著的起效阶段。利用病毒结合实验、内吞荧光标记实验评价利福平对YFV入侵靶细胞的影响。结果利福平细胞毒性较弱(CC50为176.9μmol/L),抑制YFV作用显著(IC50为1.868μmol/L,P<0.01);动力时间窗、结合和内吞实验表明,利福平能抑制YFV结合、入侵靶细胞(P<0.01),但不影响YFV的内吞过程。此外,利福平在感染后期的复制阶段也有一定的抑制效果(P<0.01)。结论利福平可抑制YFV感染靶细胞,作用机制主要通过在病毒感染早期的入侵阶段阻断病毒结合靶细胞。

关键词：利福平黄热病毒抗病毒药感染

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2019冠状病毒病研究纪实:至2020年3月11日

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中国人兽共患病学报 2020年第5期36卷 341-348页

作者：苗根丁翠玲彭浩然戚中田第二军医大学微生物学教研室全军生物侦检与防护重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

2019年12月1日,武汉市出现首例不明原因肺炎病例,2020年1月8日确认病原体为新型冠状病毒,2020年1月31日世界卫生组织(WHO)将病原体暂命名为2019新冠病毒(2019-nCoV),2020年2月8日国家卫健委将该不明原因肺炎命名为新型冠状病毒肺炎(简... 详细信息

2019年12月1日,武汉市出现首例不明原因肺炎病例,2020年1月8日确认病原体为新型冠状病毒,2020年1月31日世界卫生组织(WHO)将病原体暂命名为2019新冠病毒(2019-nCoV),2020年2月8日国家卫健委将该不明原因肺炎命名为新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎,novel coronavirus pneumonia),2020年2月11日,WHO依据规则将新冠肺炎正式命名为2019冠状病毒病(COVID-19),同一天,国际病毒分类委员会将2019新冠病毒正式命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。2020年3月11日,WHO将新冠疫情流行趋势升级为全球大流行状态。新冠疫情暴发后,国内外研究人员迅速开展流行病学调查、短时间内分离鉴定病毒、开展病原学研究、建立检测方法、完善诊疗方案、探索致病机制、研发药物和疫苗,有效阻止了国内疫情蔓延,也为世界疫情防控赢得了时间窗口。本文拟以时间为轴线,从病原体、病毒宿主、流行病学、检测方法、致病机制和临床诊疗6个方面记述2019冠状病毒病研究的重要进展。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 2019冠状病毒病病原体病毒宿主流行病学临床诊疗

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寨卡病毒感染相关脊髓炎研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第10期39卷 800-804页

作者：苗根丁翠玲刘延刚戚中田第二军医大学海医系微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室200433

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科、黄病毒属,主要通过伊蚊叮咬传播.2015年起,ZIKV在南美暴发流行,大部分感染者无临床表现,部分孕妇感染引发新生儿小头畸形、成人吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome)、脊髓炎等神经系统并... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科、黄病毒属,主要通过伊蚊叮咬传播.2015年起,ZIKV在南美暴发流行,大部分感染者无临床表现,部分孕妇感染引发新生儿小头畸形、成人吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome)、脊髓炎等神经系统并发症.本文从ZIKV生物学特征、传播途径、临床诊治、ZIKV相关脊髓炎的病例报道和可能的致病机制等方面综述了ZIKV相关脊髓炎的最新研究进展,为进一步了解认识和研究ZIKV相关脊髓炎提供参考.

关键词：寨卡病毒脊髓炎致病机制

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新型隐球菌临床菌株中CNAG＿01032基因的鉴定和功能研究

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菌物学报 2019年第8期38卷 1341-1349页

作者：邱文兰咏哲王迪黄劲廖万清康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025 第二军医大学上海长征医院真菌学研究所上海200003

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检... 详细信息

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检测突变株和野生型菌株经典毒力因子变化情况;使用API 20C AUX测试系统测试突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况;使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测。结果显示:成功构建以临床株C1、C2为背景的CNAG-01032基因敲除突变株;突变株在37℃生长、黑色素产生与野生型菌株无显著差异,但荚膜厚度分别比C1、C2减少16.4%、18.2%;两基因敲除菌株均不能分解利用纤维二糖;致病性与野生型菌株无显著差异。新型隐球菌CNAG01032基因可能参与临床来源菌株IFM56800、IFM56769的荚膜合成和纤维二糖的代谢。

关键词：病原性真菌基因敲除荚膜纤维二糖

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东部沿海某部海训官兵皮肤病患病率调查及其影响因素分析

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第二军医大学学报 2018年第6期39卷 661-666页

作者：闫泽灏张正委伊九任浩潘炜华杨雅骊廖万清方伟海军军医大学(第二军医大学)海军医学系学员3队上海200433 海军军医大学(第二军医大学)长征医院皮肤科、上海市医学真菌分子生物学重点实验室上海200003 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院微生物学教研室、上海市医学生物防御重点实验室上海200433

目的分析东部某海训部队官兵在新时期军事训练环境下皮肤病的流行病学特点和患病原因,并提出防治措施。方法采用整群抽样、分层抽样和单纯随机抽样相结合的多阶段抽样方法,从东部沿海某部海训官兵中选择768名官兵,进行皮肤病问卷调查,... 详细信息

目的分析东部某海训部队官兵在新时期军事训练环境下皮肤病的流行病学特点和患病原因,并提出防治措施。方法采用整群抽样、分层抽样和单纯随机抽样相结合的多阶段抽样方法,从东部沿海某部海训官兵中选择768名官兵,进行皮肤病问卷调查,随行医师对全体被调查者进行体格检查并给出诊断和治疗指导。应用logistic回归分析研究皮肤病患病的影响因素。结果回收有效问卷696份,有效率为90.62%。被调查者年龄17~32岁,共349例(50.14%)患有皮肤病。共检出皮肤病类型34种,患病频次为755,其中感染性皮肤病占多数(患病频次565,构成比74.83%)。海训官兵皮肤病患病情况与气候、环境、训练条件、饮食习惯等有关,各类皮肤病病因不尽相同。结论海训官兵皮肤病患病率高、影响因素多,应通过普及皮肤病防治知识、科学施训、改善防护条件、倡导合理生活习惯、提高医务人员诊治水平、更新药品配备等防治措施降低皮肤病患病率。

关键词：军队卫生皮肤疾病海训东部沿海问卷调查患病率

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蜱传脑炎病毒感染引发细胞信号转导的研究进展

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生命的化学 2018年第2期38卷 303-308页

作者：唐海琳张龙严赵兰娟第二军医大学微生物学教研室上海200433

人类高致病性虫媒传播蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)是蜱传脑炎的重要病原体,疾病表现为伴有或不伴有脊髓炎的急性脑膜炎。TBEV在自然界中的生存依赖于硬蜱和野生脊椎动物宿主。最近30年,TBEV在全球的地理分布呈持... 详细信息

人类高致病性虫媒传播蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)是蜱传脑炎的重要病原体,疾病表现为伴有或不伴有脊髓炎的急性脑膜炎。TBEV在自然界中的生存依赖于硬蜱和野生脊椎动物宿主。最近30年,TBEV在全球的地理分布呈持续扩张趋势。报道认为,TBEV感染所致细胞异常信号转导是病毒致病的分子机制。文章综述了TBEV感染引发细胞信号转导事件及其与病毒致病机制的关联。

关键词：蜱传脑炎病毒蜱传脑炎信号转导致病机制

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应用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除小窝蛋白1基因的神经细胞构建与功能鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2018年第5期29卷 453-457页

作者：权力江爱民卢彦宗朱耐伟朱勇喆第二军医大学微生物学教研室上海200433 第二军医大学学员旅学员1队上海200433 第二军医大学学员旅学员9队上海200433

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑系统建立小窝蛋白1(CAV-1)基因敲除的神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),并验证其对流行性乙型脑炎病毒(JEV)的易感性。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,基于人源CAV-1基因的外显子区(EXON)序列设计小向导RNA(sg... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑系统建立小窝蛋白1(CAV-1)基因敲除的神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),并验证其对流行性乙型脑炎病毒(JEV)的易感性。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,基于人源CAV-1基因的外显子区(EXON)序列设计小向导RNA(sgRNA),将sgRNA连接到载体PX459质粒上。将重组质粒转染至SHSY5Y细胞中,使用嘌呤霉素筛选稳定敲除CAV-1蛋白的SH-SY5Y细胞,并用免疫印迹法验证CAV-1蛋白的敲除效果。免疫荧光法比较CAV-1基因敲除的SH-SY5Y株与野生型细胞株对JEV感染性的差异。结果经酶切和测序鉴定,重组真核表达质粒构建正确,转染并筛选的单克隆细胞中没有CAV-1蛋白的表达,成功构建CAV-1基因敲除的SH-SY5Y细胞株。与野生型SH-SY5Y细胞株相比,CAV-1基因敲除的细胞株对JEV的感染性下降约90%(P<0.001)。结论利用CRISPR/Cas9系统成功构建CAV-1基因敲除的SH-SY5Y细胞株,该细胞株可用于进一步研究CAV-1蛋白在JEV感染中的作用机制。

关键词：基因编辑小窝蛋白神经细胞流行性乙型脑炎病毒

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DC-SIGN与mCEACAM1a分子相互作用调控鼠冠状病毒复制

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微生物与感染 2018年第3期13卷 136-145页

作者：张浩旸郭佳慧赵兰娟姚茜茜文荣徐娅佳王玉燕叶荣复旦大学基础医学院病原生物学系上海200032 第二军医大学微生物学教研室上海200433

树突细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素分子(dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin,DC-SIGN)和肝/淋巴结特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素分子(liver/lymph node-specific intercellular adhesion molecules-3-grabbing non-integrin,L-SIGN)是钙离子依赖的C型凝集素受体,通过识别病毒粒子表面含甘露聚糖或果糖寡聚糖的分子介导病毒进入细胞,但其在调节病毒复制中的作用较少被关注。本研究通过建立稳定表达DC-SIGN和L-SIGN及其功能域嵌合体的细胞系,分析两者过表达对鼠冠状病毒复制的影响。结果显示,L-SIGN比DC-SIGN更能显著抑制病毒复制,这种差异与两者胞内区序列和基序组成不同有关;鼠冠状病毒感染导致细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路分子磷酸化下调,过表达DC-SIGN和L-SIGN可抑制这种下调趋势。在没有鼠癌胚抗原相关细胞黏附分子1(mouse carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,mCEACAM1)存在时,DC-SIGN不能介导病毒感染。这些结果提示,DC-SIGN通过与mCEACAM1a分子相互作用和调节细胞信号通路分子功能以调控鼠冠状病毒复制。

关键词： DC-SIGN mCEACAM1a 相互作用鼠冠状病毒复制

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1株肠道病毒71型毒株的分离与鉴定

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中国热带医学 2018年第1期18卷 17-21页

作者：许耘川朱勇喆王娟娟上海交通大学医学院附属新华医院检验科上海200092 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell,RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)来分析EV71的分离效... 详细信息

目的探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell,RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)来分析EV71的分离效果。分别利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹分析(Western Blotting)方法来鉴定EV71病毒特异性核酸和蛋白。扩增EV71VP1区全长基因,对其序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果手足口病疑似病例咽拭子标本接种RD细胞传代至第2代后出现CPE。RT-PCR和Western Blotting检测结果均显示,感染组RD细胞中有EV71病毒特异性条带,暂命名为EV71分离株2016SHYP001。序列分析结果显示,2016SHYP001株病毒的VP1区核苷酸与C型代表株的同源性较高,为93.1%~98.3%;其中与C4a亚型代表株的同源性最高,为98.3%。进化树分析发现本地流行株与深圳地区流行株的亲缘较近。结论成功分离出一株新的EV71病毒株2016SHYP001,其株型为C4a亚型。

关键词：手足口病肠道病毒71型病毒分离基因型

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维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

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第二军医大学学报 2017年第5期38卷 548-553页

作者：王世杰张卫张龙严罗正汉尹昊瓒唐紫薇戚中田赵平第二军医大学热带医学与公共卫生学系微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 第二军医大学海军医学系学员5队上海200433 第二军医大学学员旅10队上海200433

目的探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染。方法用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达。用维拉帕米处理Huh7.5.... 详细信息

目的探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染。方法用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达。用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV(HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况。用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响。结果与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P<0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P<0.05)。进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P<0.05)。结论维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的。

关键词：维拉帕米丙型肝炎病毒硫氧还蛋白互作蛋白转录启动子

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