检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第9期21卷 849-852页

作者：朱分禄任浩朱诗应谢南潘卫董辉戚中田第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 南昌市传染病医院中心实验室

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4... 详细信息

目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。

关键词：免疫原性杆状病毒载体庚型肝炎 NS3蛋白

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携带DT_(390)-VEGF_(165)或DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因的真核表达载体的构建及表达

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中国肿瘤生物治疗杂志 2000年第3期7卷 218-219页

作者：潘欣柯重伟潘卫曹广文戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

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血管内皮细胞生长因子的研究进展

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国外医学（临床生物化学与检验学分册） 2000年第2期21卷 66-69页

作者：潘欣第二军医大学微生物学教研室上海200433

血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）是在胚胎发生和创伤愈合过程中启动血管形成的一个高度特异的有丝分裂原，也是一种有效的血管通透性诱导因子。ＶＥＧＦ是此氨酸结生长因子超家族的一员，其结构特征和生物学特性使之在为缺血组织重建... 详细信息

血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）是在胚胎发生和创伤愈合过程中启动血管形成的一个高度特异的有丝分裂原，也是一种有效的血管通透性诱导因子。ＶＥＧＦ是此氨酸结生长因子超家族的一员，其结构特征和生物学特性使之在为缺血组织重建侧支循环、肿瘤预后、肿瘤转移乃至实施基因治疗等领域成为重要的研究对象。

关键词：血管内皮细胞生长因子胱氨酸结生长因子 VEGF

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缺氧诱导因子1研究进展

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国外医学（分子生物学分册） 2000年第4期22卷 202-206页

作者：吴晓兰第二军医大学微生物学教研室上海200433

缺氧诱导因子1(HIF-1)在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为缺氧应答的全局性调控因子。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β两种亚基组成,为异源二聚体转录因子。HIF-1α、HIF-1β和近年来发现的HIF-2α一样均属于bHLH转录因子超家族中的PAS亚族... 详细信息

缺氧诱导因子1(HIF-1)在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为缺氧应答的全局性调控因子。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β两种亚基组成,为异源二聚体转录因子。HIF-1α、HIF-1β和近年来发现的HIF-2α一样均属于bHLH转录因子超家族中的PAS亚族。HIF-1α的bHLH和PAS结构域与二聚化及DNA结合活性有关,TAD结构域则主要参与转录激活。HIF-1α的全长基因已克隆并在人和小鼠中定位。通过作用于靶基因的缺氧反应元件(HRE),HIF-1参与缺氧诱导的一系列基因的表达调控。HIF-1在生物体的氧气供应、细胞代谢、心血管发育以及一系列疾病生理病理中起重要作用,其活性调节存在多种层次。HIF-1/HRE基因选择表达系统已被应用于基因治疗中。

关键词：缺氧诱导因子1 内皮PAS蛋白1 缺氧反应元件

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病毒研究的新体系——转基因动物

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国外医学（病毒学分册） 2000年第5期7卷 133-136页

作者：胡卫江戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

转基因动物是指通过遗传操作 ,使外源基因在体内稳定遗传的动物。转基因动物体系是研究基因功能的新手段 ,在病毒学研究中有广泛的运用前景。越来越多的含有病毒基因、病毒受体基因的转基因小鼠用于病毒与受体、病毒与宿主相互作用和功... 详细信息

转基因动物是指通过遗传操作 ,使外源基因在体内稳定遗传的动物。转基因动物体系是研究基因功能的新手段 ,在病毒学研究中有广泛的运用前景。越来越多的含有病毒基因、病毒受体基因的转基因小鼠用于病毒与受体、病毒与宿主相互作用和功能的研究 ,从而探讨病毒的致病机理及防治方法。

关键词：病毒转基因动物自身免疫性疾病

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血管生成抑制素Endostatin研究新进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2000年第1期7卷 76-78页

作者：贺祥潘卫芮耀诚戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

１９９７年Ｏ’ Ｒｅｉｌｌｙ从小鼠血管内皮细胞瘤中分离到一种新的２０ｋＤ具有特异抑制血管内皮细胞生长的抑制因子─—Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ，它对牛毛细血管内皮细胞、牛肺主动脉内皮细胞有特异的抑制增殖作用，而对非血管内皮细... 详细信息

１９９７年Ｏ’ Ｒｅｉｌｌｙ从小鼠血管内皮细胞瘤中分离到一种新的２０ｋＤ具有特异抑制血管内皮细胞生长的抑制因子─—Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ，它对牛毛细血管内皮细胞、牛肺主动脉内皮细胞有特异的抑制增殖作用，而对非血管内皮细胞系细胞如ＮＩＨ３Ｔ３，Ａ１０平滑肌细胞等则无增殖抑制作用，实验证实大肠杆菌生产的复性及未复性的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ及杆状病毒生产的重组Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ均有抑制鸡胚血管生成的作用，而且Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ没有象肿瘤化疗药物那样引发肿瘤产生抗药性，其作用机理尚待进一步研究。

关键词： Endostatin 肿瘤血管生成抑制素

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丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶的研究进展

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国外医学（微生物学分册） 2000年第4期23卷 7-9,38页

作者：董辉第二军医大学基础部微生物学教研室

丙型肝炎病毒(HCV)非结构3区(NS3)编码的丝氨酸蛋白酶是HCV复制过程中的重要蛋白酶,负责对NS3、NS4及N55进行加工。NS4a是HCV丝氨酸蛋白酶作用的辅因子,并具有多种活性。HCV丝氨酸蛋白酶有相对特异的底物,其活性不能被一般的丝氨酸蛋白... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)非结构3区(NS3)编码的丝氨酸蛋白酶是HCV复制过程中的重要蛋白酶,负责对NS3、NS4及N55进行加工。NS4a是HCV丝氨酸蛋白酶作用的辅因子,并具有多种活性。HCV丝氨酸蛋白酶有相对特异的底物,其活性不能被一般的丝氨酸蛋白酶抑制剂所抑制。丝氨酸蛋白酶是抗HCV药物设计的靶目标之一,对其结构与功能的研究有着重要意义。

关键词：丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶结构功能

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从噬菌体随机肽库筛选庚型肝炎病毒E2抗原表位

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第二军医大学学报 2000年第9期21卷 838-841页

作者：柯屾戚中田施明赵平王建安姚志建沈倍奋第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 军事医学科学院基础医学研究所北方基因研究中心

目的 :筛选能识别庚型肝炎病毒 (HGV) E2区的单克隆抗体和有竞争抑制活性的多肽。方法 :利用抗 HGV E2区的3株单克隆抗体 M6 ,M13,M30作为筛选配基 ,对构象限制性的随机环 9肽库进行亲和筛选 ,并对阳性噬菌体克隆进行功能鉴定。结果 :... 详细信息

目的 :筛选能识别庚型肝炎病毒 (HGV) E2区的单克隆抗体和有竞争抑制活性的多肽。方法 :利用抗 HGV E2区的3株单克隆抗体 M6 ,M13,M30作为筛选配基 ,对构象限制性的随机环 9肽库进行亲和筛选 ,并对阳性噬菌体克隆进行功能鉴定。结果 :证实亲和筛选具有良好的富集效果后 ,随机挑出 16个噬菌体克隆进行交叉结合实验 ,有 14个克隆与 M6抗体有较强的特异结合 ;其中 10个克隆在竞争抑制实验中抑制率大于 5 0 %。 DNA测序表明 9个克隆具有氨基酸核心序列 GYAPL S,该序列与 HGV E2区第 30 6～ 311位氨基酸有较好的同源性。用合成肽与核心序列相似的噬菌体克隆 P9GC5和 P9GC11进行HGV E2抗原抗体实验 ,显示它们的 IC5 0 分别为 4.5和 7.2 nmol/ L。结论 :从噬菌体随机肽库中筛选到能与 HGV E2抗体特异性结合的 HGV抗原表位 ,并确定与合成了具有活性的核心多肽序列。

关键词：噬菌体随机肽库 E2蛋白抗原表位庚型肝炎 HGV

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中国姥鲨软骨源溶菌酶样分子的分离纯化、部分氨基酸序列测定及体内抗肿瘤活性研究

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药物生物技术 2000年第2期7卷 77-81页

作者：陈建鹤焦炳华缪为民王梁华冯煜朱玉平娄永华缪辉南第二军医大学毒理学教研室上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433

用含 0 0 2mol/LMES的 1mol/L盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织 ,抽提物经Mr30 0 0 0PTTK膜超滤、SephacrylS 2 0 0和Superdex 75柱层析获得 1种新的Mr 为 15 2 0 0的高纯度蛋白质 (Sp15 ) ,N 末端序列测定表明其与多种哺乳动物来源的... 详细信息

用含 0 0 2mol/LMES的 1mol/L盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织 ,抽提物经Mr30 0 0 0PTTK膜超滤、SephacrylS 2 0 0和Superdex 75柱层析获得 1种新的Mr 为 15 2 0 0的高纯度蛋白质 (Sp15 ) ,N 末端序列测定表明其与多种哺乳动物来源的溶菌酶具有相关性 ,并在体外具有显著的溶菌酶活性 ,其比活性高达 2 2 30 0 0U/mg ;Sp15在 10 μg/ml浓度下 ,可显著抑制血管内皮细胞的增殖 ,其抑制率高达 75 % ;在 8mg/kg剂量下 ,对小鼠移植的S180肉瘤的抑瘤率达 33 3% ,并可显著延长荷S180腹水瘤小鼠的生存时间。

关键词：鲨鱼软骨溶菌酶抗肿瘤活性氨基酸

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DT/VEGF系统对胃癌细胞的杀伤效应

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世界华人消化杂志 2000年第4期8卷 393-396页

作者：潘欣柯重伟潘卫贺祥曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科上海市200433

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转... 详细信息

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，观察胃癌细胞的形态变化，结果５μｇ趑核表达构的转染５×１０＾５个胃癌细胞／孔（２４孔板）９６ｈ后发现，转素融合基因的细胞９０％死亡，而对照细胞形态正常。

关键词：真核表达载体胃肿瘤基因治疗 VEGF

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