检索结果-内蒙古大学图书馆

药物生物技术 1998年第3期5卷 140-144页

作者：周凯王梁华焦炳华第二军医大学基础部微生物学教研室上海200433

TNFα突变体 60 (TNF60 )蛋白在大肠杆菌中高效表达 ,菌体超声破碎后 ,以低浓度尿素反复洗涤包涵体 ,经 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤层析初步纯化 ,对重组蛋白浓度、氧化还原剂等复性参数进行优化和选择 ,复性后组分以 Sephadex G- 2 5... 详细信息

TNFα突变体 60 (TNF60 )蛋白在大肠杆菌中高效表达 ,菌体超声破碎后 ,以低浓度尿素反复洗涤包涵体 ,经 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤层析初步纯化 ,对重组蛋白浓度、氧化还原剂等复性参数进行优化和选择 ,复性后组分以 Sephadex G- 2 5脱盐 ,经 Superdex 75凝胶过滤再次纯化。获得了纯度 >97% ,具有增强 rh TNFα细胞毒活性的 TNF60蛋白。

关键词：突变体变性复性纯化肿瘤坏死因子

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庚型肝炎病毒的分子生物学研究进展

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国外医学（病毒学分册） 1998年第3期5卷 83-86页

作者：任浩朱分禄第二军医大学微生物学教研室上海200433

庚型肝炎病毒（GBV－C／HGV）为单股正链RNA病毒，属黄病毒家族成员。GBV-C／HGV与丙型肝炎病毒（HCV）有许多相似之处，但又有其自身特点。本文对GBV－C／HGV的基因组结构及变异、病毒多蛋白前体的加工、感染途径与致病性及检测方法等... 详细信息

庚型肝炎病毒（GBV－C／HGV）为单股正链RNA病毒，属黄病毒家族成员。GBV-C／HGV与丙型肝炎病毒（HCV）有许多相似之处，但又有其自身特点。本文对GBV－C／HGV的基因组结构及变异、病毒多蛋白前体的加工、感染途径与致病性及检测方法等进行了综述。

关键词：庚型肝炎病毒分子生物学基因组结构致病性

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TRAIL诱导突变细胞凋亡的分子机理——免疫监督机制的新模型

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中国肿瘤生物治疗杂志 1998年第3期5卷 231-234页

作者：王梁华第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途... 详细信息

Burnet提出免疫监督学说已经快三十年了,现在对这一理论的理解已经深入至分子水平,如MHC、TCR分子在免疫监督中的作用.随着TNF超家族和TNF受体超家族研究的深入,尤其是FasL、TNF-α和它们的受体Fas、TNFR1结构和功能及它们的信号转导途径的逐步阐明,免疫监督已从细胞免疫水平向分子免疫水平过渡.本文在国内外对TRAIL及其受体研究的基础上,提出了一个免疫监督的新模型:突变细胞比正常细胞缺少某些细胞膜表面信号从而被机体凋亡信号所识别,机体利用凋亡信号诱导突变细胞凋亡的方式清除它们.这一机制的提出可能会补充免疫监督学说.

关键词： TRAIL 免疫监督模型免疫监督分子肿瘤免疫

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人类HLA-B7可诱导启动子调控IRES连接的人TNFα和IFNβ基因的重组逆转录病毒载体的构建

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胃肠病学和肝病学杂志 1998年第4期7卷 308-313页

作者：杨淑英段芳龄曹广文张晓琴陈秋莉贺祥河南医科大学消化疾病研究所第二军医大学基础部微生物学教研究室上海市200433

目的:为增强肿瘤细胞表面MHCⅠ类分子表达,并调动免疫系统更有效地抑制和杀伤肿瘤细胞,构建在HLA-B7启动子调控下,IRES连接的人TNFα和IFNβ基因的重组逆转录病毒载体.方法与结果:将TNFαcDNA克隆人pBIuescript sk(+)中,改换酶切位点后... 详细信息

目的:为增强肿瘤细胞表面MHCⅠ类分子表达,并调动免疫系统更有效地抑制和杀伤肿瘤细胞,构建在HLA-B7启动子调控下,IRES连接的人TNFα和IFNβ基因的重组逆转录病毒载体.方法与结果:将TNFαcDNA克隆人pBIuescript sk(+)中,改换酶切位点后定向克隆人含HLA-B7启动子的质粒中,构建成***βcDNA经定向插入pGEM-7Zf(+)改换酶切位点切下,定向克隆人含内部核糖体进入位点(IRES)的质粒中,构建成pIRE-SIFN.B7pro-TNFα和IRES-IFN β基因片段分别于各自载体酶切取出,再次插入中间载体,改换酶切位点后,先后定向插入pBlucscript sk(+)中,构建成pBLB7TNIRIF.用SacI+SalI+PvuI酶切回收B7pro-TNFα-IRES-IFNβDNA片段,补平后平端连入GINa逆转录病毒载体的BamH I补平位点,构建成重组逆转录病毒载体GINNaB7TNIRIF(+),结论:该载体的构建为调控各种肿瘤细胞MHCⅠ类分子增强表达,杀伤和抑制肿瘤研究奠定了基础.

关键词：干扰素 HLA-B7 逆转录病毒载体基因疗法肿瘤

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银屑病患者皮损组织中总RNA水平分析

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中华皮肤科杂志 1998年第2期31卷 118-118页

作者：汪治中郑茂荣焦炳华缪为民孙君红第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433 第二军医大学附属长海医院微生物学教研室上海200433

生物细胞的表型及其变化均由严密调控的基因表达所决定,转录产物mRNA是遗传信息从DNA流向蛋白质的重要媒介。我们抽提了12例银屑病患者皮损组织中的总RNA,发现其皮损组织中存在着十分活跃的转录过程。

关键词：银屑病皮损组织 RNA

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外显子捕捉法快速分离新基因的原理和方法

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生物化学与生物物理进展 1997年第3期24卷 207-211页

作者：朱冠山缪为民焦炳华第二军医大学第一附属医院传染病学教研室上海200433 第二军医大学微生物学教研室上海200433

从大片段基因组DNA中快速分离转录序列是疾病基因定位克隆 (positionalcloning)中的关键步骤 .外显子捕捉法是一种较为成功的方法 .文章对该法的基本原理。

关键词：基因分离方法外显子捕捉法

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携带HuIL-3基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建

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第二军医大学学报 1997年第1期18卷 9-12页

作者：高军曹广文戚中田杜平仇晓芳杨文国崔龙孙如美第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院普通外科

目的:构建携带人白细胞介素3（HuIL－3）cDNA的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：将HuIL－3cDNA克隆到逆转录病毒载体pMNSM的PL位点，构建SV40早期启动子驱动的载体pMNS－IL－3；从质粒pGEM．7Zf－AFPe中游离人甲胎蛋白（AFP）... 详细信息

目的:构建携带人白细胞介素3（HuIL－3）cDNA的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：将HuIL－3cDNA克隆到逆转录病毒载体pMNSM的PL位点，构建SV40早期启动子驱动的载体pMNS－IL－3；从质粒pGEM．7Zf－AFPe中游离人甲胎蛋白（AFP）增强子核心序列，先克隆到pMNSM的PL位点上，再将HuIL－3cDNA片段克隆到PL位点上，构建出SV40早期启动子和AFP增强子驱动的人肝癌特异性表达载体PMNSA－IL－3。结论：该载体为肝癌特异性转基因治疗提供了一条途径。

关键词：肝肿瘤逆转录病毒载体 HuIL-3 基因治疗

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核酸探针在结核病实验室诊断中的应用进展

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中华疾病控制杂志 1997年第1期9卷 69-72页

作者：朱诗应第二军医大学微生物学教研室上海200433

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中国姥鲨软骨新生血管抑制因子的生物学活性研究

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药物生物技术 1997年第3期4卷 138-143页

作者：王路焦炳华缪辉南第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

实验对分离纯化了的姥鲨软骨新生血管抑制因子 (Shark cartilage derived inhibitor,SCDI)进行了生物学活性研究 ,结果表明它对型胶原酶、内皮细胞 DNA合成、角膜新生血管和荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用。12 μg SCDI可竞... 详细信息

实验对分离纯化了的姥鲨软骨新生血管抑制因子 (Shark cartilage derived inhibitor,SCDI)进行了生物学活性研究 ,结果表明它对型胶原酶、内皮细胞 DNA合成、角膜新生血管和荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用。12 μg SCDI可竞争抑制一个单位的胶原酶活性 ;其对小鼠心肌和肺毛细血管内皮细胞 DNA合成的 IC50 分别为 3.38μg和 11.74 μg;高剂量组 (40 μg)和低剂量组 (10μg) SCDI对家兔眼角膜新生血管的抑制率分别为 70 .2 4 %和 38.38% ;SCDI在 2 0 mg/kg的剂量下对 B16黑色素瘤和 L ewis肺癌的抑瘤率分别为 4 5.4 5%和 37.84 % .

关键词：鲨鱼软骨新生血管抑制因子生物学活性

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中国姥鲨软骨新生血管抑制因子的分离纯化及理化性质检测

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药物生物技术 1997年第1期4卷 17-21页

作者：王路焦炳华缪辉南第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :... 详细信息

实验用盐酸胍抽提、超滤、层析等方法 ,从中国姥鲨软骨中分离纯化到一种新生血管抑制因子 (shark cartilage derived inhibitor,SCDI) ,得率为 1/ 6 0 0 0 0经毛细管电泳检测 ,其纯度为90 .6 7% ;SDS- PAGE电泳及等电聚焦电泳结果表明 :SCDI的分子量为 16 10 0 D,等电点为 8.15;氨基酸组成分析表明 SCDI含有 2 0种氨基酸 ,其中以 L eu、Ile和

关键词：鲨鱼软骨新生血管抑制因子分离纯化

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