检索结果-内蒙古大学图书馆

农产品加工（下） 2010年第6期 35-38页

作者：董瑞琦时多焦炳华励建荣缪明永第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 浙江工商大学浙江杭州310018

建立了冰冻保存鱿鱼体内氧化三甲胺脱甲基酶(TMAOase)活性的测定方法,初步探索了鱿鱼体内甲醛的产生机理。根据TMAOase可在体外催化TMAO生成甲醛,后者可用乙酰丙酮法定量,并结合酶促反应动力学的原理,建立针对冰冻保存鱿鱼体内TMAOase... 详细信息

建立了冰冻保存鱿鱼体内氧化三甲胺脱甲基酶(TMAOase)活性的测定方法,初步探索了鱿鱼体内甲醛的产生机理。根据TMAOase可在体外催化TMAO生成甲醛,后者可用乙酰丙酮法定量,并结合酶促反应动力学的原理,建立针对冰冻保存鱿鱼体内TMAOase活性的检测方法。建立的活性检测方法可用于检测冰冻保存的鱿鱼体内TMAOase的活性;冰冻鱿鱼体内TMAOase的活性随保存时间延长而增高。该方法简便易行,重复性较好,对深入研究TMAOase生物学特性具有一定的应用价值;在冰冻保存过程中,鱿鱼体内TMAOase活性是造成甲醛含量增高的重要原因。

关键词：鱿鱼氧化三甲胺脱甲基酶(TMAOase) 检测方法

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黑色素及谷胱甘肽通过抑制NF-κB途径的激活可有效抑制H_5N_1禽流感病毒感染

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第4期25卷 364-372页

作者：张晓玲杨桥代俊顾潮江许振辉焦炳华中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 病毒学国家重点实验室武汉大学生命科学学院湖北武汉430072 哥伦比亚大学病理与细胞生物学系

我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式... 详细信息

我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.

关键词： H5N1 禽流感病毒病毒感染黑色素谷胱甘肽 NF—κB途径

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海螵蛸多糖对小鼠胃黏膜细胞保护作用的研究

海螵蛸多糖对小鼠胃黏膜细胞保护作用的研究

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2008年全国糖生物学学术会议

作者：郭一峰周文丽张建鹏刘军华冯伟华焦炳华第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室

中医常用海螵蛸来治疗消化性溃疡,但是其机理还不明确,普遍认为其收敛作用源于海螵蛸中的碳酸钙可以中和胃酸。但是,有报道发现海螵蛸较其他中成药和碳酸钙更能有效的治疗溃疡病和胃酸过多的患者,提示海螵蛸中含有除碳酸钙以外的对治疗... 详细信息

中医常用海螵蛸来治疗消化性溃疡,但是其机理还不明确,普遍认为其收敛作用源于海螵蛸中的碳酸钙可以中和胃酸。但是,有报道发现海螵蛸较其他中成药和碳酸钙更能有效的治疗溃疡病和胃酸过多的患者,提示海螵蛸中含有除碳酸钙以外的对治疗消化性疾病起作用

关键词：胃黏膜细胞海螵蛸

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聚酮合酶研究进展

聚酮合酶研究进展

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2008年全国海洋生物技术与创新药物学术会议

作者：焦豫良王梁华焦炳华淮海工学院海洋学院，连云港 222005 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室，上海 200433 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室，上海 200433

聚酮合酶及其合成的聚酮类化合物具有极大的学术研究和商业价值，现已成为生物技术药物领域研究热点。聚酮合酶的研究近年来发展迅速，本综述针对I型聚酮合酶基因簇筛选和功能研究的方法进行了总结归纳。

关键词：聚酮合酶基因簇组合生物合成技术

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人破骨细胞形成抑制因子活性域片段在大肠杆菌中的融合表达

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中国生物制品学杂志 2005年第2期18卷 85-88页

作者：张兴群王梁华焦炳华袁勤生华东理工大学国家生物反应器中心第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室上海200433

目的　在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子 (Osteoclastogenesisinhibitoryfactor,OCIF)活性域片段。方法　从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA ,利用RT PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA ,将其与pMD18 T连接 ,转化大肠杆菌... 详细信息

目的　在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子 (Osteoclastogenesisinhibitoryfactor,OCIF)活性域片段。方法　从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA ,利用RT PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA ,将其与pMD18 T连接 ,转化大肠杆菌K80 2 ,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18 OCIFAD ,经双酶切得到OCIF活性域编码片段 ,将其插入pMAL c2载体中 ,转化大肠杆菌TB1。筛选得到阳性重组表达子后进行诱导表达。结果　所获得的OCIF活性结构域编码序列片段经测序与GenBank报道的完全一致。所表达的产物经SDS PAGE分析可见在相对分子质量 6 0 0 0 0处出现一条特殊条带 ,与预期的相对分子质量一致。Westernblot证实了表达产物能与抗人OCIF单抗发生特异性反应。结论　已成功地获得了人OCIF活性结构域编码片段的克隆 ,并实现了其在大肠杆菌中的融合表达。表达产物对体外培养破骨细胞的骨吸收功能有明显的抑制作用。

关键词：破骨细胞大肠杆菌融合表达阳性抑制因子活性结构肝细胞系片段诱导表达 SDS-PAGE分析

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人OCIF成熟肽基因在大肠杆菌中的表达

人OCIF成熟肽基因在大肠杆菌中的表达

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中国海洋生化学术会议

作者：张兴群王梁华袁勤生焦炳华第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室华东理工大学国家生物反应器中心第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室

骨骼作为一个动态组织,其功能和形态的完整性是通过破骨细胞的持续吸收和成骨细胞的持续形成来维持和保证的,破骨细胞和成骨细胞功能和活力失衡会导致代谢性骨骼疾病,如骨质疏松等。破骨细胞形成抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory... 详细信息

骨骼作为一个动态组织,其功能和形态的完整性是通过破骨细胞的持续吸收和成骨细胞的持续形成来维持和保证的,破骨细胞和成骨细胞功能和活力失衡会导致代谢性骨骼疾病,如骨质疏松等。破骨细胞形成抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF,又称osteoprotegerin,OPG)作为肿瘤坏死因子受体超家族的一种诱饵受体,能够在全身或局部通过抑制破骨细胞分化和形成以及抑制成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡而对其数量和活性进行有效调节,是成骨细胞和骨基质作用的分子基础。实验表明,OCIF基因敲除的小鼠成年后表现为严重的骨质疏松,而卵巢切除导致的骨质疏松小鼠注射重组人OCIF两周后,症状明显缓解,骨量和骨密度均明显增加。提示OCIF在治疗骨质疏松症方面潜在的

关键词：成熟肽骨质疏松外显子破骨细胞氨基酸残基大肠杆菌酶切位点细胞凋亡亲和层析酶切鉴定成骨细胞基因片段基因敲除

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来氟米特对HaCaT细胞分泌α-肿瘤坏死因子、白介素-6和8的影响

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临床皮肤科杂志 2004年第1期33卷 9-10页

作者：郭志丽顾军唐玲球谊米庆胜第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室上海200433 泰山医学院附院皮肤科山东泰安371000

目的:研究来氟米特活性代谢产物A771726对角质形成细胞分泌α-肿瘤坏死因子TNF-α,白介素IL-6及IL-8的影响。方法:以体外培养的角质形成细胞株HaCaT为对象,以不同浓度A771726处理正常及TNF-α刺激后细胞,用生物活性法及ELISA方法测定培... 详细信息

目的:研究来氟米特活性代谢产物A771726对角质形成细胞分泌α-肿瘤坏死因子TNF-α,白介素IL-6及IL-8的影响。方法:以体外培养的角质形成细胞株HaCaT为对象,以不同浓度A771726处理正常及TNF-α刺激后细胞,用生物活性法及ELISA方法测定培养上清中TNF-α、IL-6及IL-8的分泌变化情况。结果:正常情况下,HaCaT细胞可自发分泌TNF-α、IL-6和IL-8;药物作用后分泌水平下降;TNF-α诱导下,HaCaT细胞IL-6及IL-8表达量均增加,加入来氟米特后则表达量均受到抑制。结论:来氟米特可抑制角质形成细胞分泌TNF-α、IL-6及IL-8。

关键词：角质形成细咆HaCaT株来氯米特细胞因子

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人OCIF成熟肽基因在大肠杆菌中的表达

人OCIF成熟肽基因在大肠杆菌中的表达

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全国首届海洋生物化学与分子生物学学术会议暨全国第五届海洋生命活性物质与天然生化药物学术研讨会

作者：张兴群王梁华袁勤生焦炳华第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室上海 200433 华东理工大学国家生物反应器中心上海 200237 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室上海 200433 华东理工大学国家生物反应器中心上海 200237

骨骼作为一个动态组织，其功能和形态的完整性是通过破骨细胞的持续吸收和成骨细胞的持续形成来维持和保证的，破骨细胞和成骨细胞功能和活力失衡会导致代谢性骨骼疾病，如骨质疏松等。破骨细胞形成抑制因子(OCIF，又称OPG)作为肿瘤坏... 详细信息

骨骼作为一个动态组织，其功能和形态的完整性是通过破骨细胞的持续吸收和成骨细胞的持续形成来维持和保证的，破骨细胞和成骨细胞功能和活力失衡会导致代谢性骨骼疾病，如骨质疏松等。破骨细胞形成抑制因子(OCIF，又称OPG)作为肿瘤坏死因子受体超家族的一种诱饵受体”，能够在全身或局部通过抑制破骨细胞分化和形成以及抑制成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡而对其数量和活性进行有效调节，是成骨细胞和骨基质作用的分子基础。本实验通过PCR从人肝细胞文库中扩增了人OCIF成熟肽基因，并实现了在大肠杆菌中表达。表达产物可特异地与抗人OCIF单克隆抗体结合。初步的生物活性检测表明其能诱导体外培养小鼠成熟破骨细胞的凋亡，同时，也能中和TRAIL的活性，从而抑制TRAIL诱导的Jurkat T细胞的凋亡。

关键词：成熟肽基因大肠杆菌破骨细胞成骨细胞骨骼疾病单克隆抗体生物活性

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高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL—OCIFm和高表达重组融合人破骨细胞形成抑制因子成熟肽

高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL—OCIFm和高表达重组融合人破骨细胞...

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2004年全国生化与生物技术药物学术年会

作者：张兴群王梁华焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室(上海) 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室(上海)

目的:高密度、高表达培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子(rhOCIFm).方法和结果:应用Bioengerring 3.7L自控发酵罐,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,控制碳源和氮源的补加,控制溶解氧,使重组菌... 详细信息

目的:高密度、高表达培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子(rhOCIFm).方法和结果:应用Bioengerring 3.7L自控发酵罐,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,控制碳源和氮源的补加,控制溶解氧,使重组菌*** TB1/pMAL—hOCIFm,发酵菌体OD600达到58.6,人重组破骨细胞形成抑制因子MBP融合蛋白(MBP-hOCIFm)的含量达到3.2g/L.结论:本研究为工业化生产重组hOCIFm奠定了基础.

关键词：破骨细胞形成抑制因子高密度培养大肠杆菌

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高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL-OCIFm和高表达重组融合人破骨细胞形成抑制因子成熟肽

高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL-OCIFm和高表达重组融合人破骨细胞形...

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中国药学会学术年会

作者：张兴群王梁华焦炳华袁勤生华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室上海200433

目的:高密度、高表达培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子.方法和结果:应用Bioengerring3.7L自控发酵罐,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,控制碳源和氮源的补加,控制溶解氧,使重组菌***1/pMAL-... 详细信息

目的:高密度、高表达培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子.方法和结果:应用Bioengerring3.7L自控发酵罐,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,控制碳源和氮源的补加,控制溶解氧,使重组菌***1/pMAL-hOCIFm,发酵菌体OD600达到58.6,人重组破骨细胞形成抑制因子MBP融合蛋白(MBP-hOCIFm)的含量达到3.2g/L.结论:本研究为工业化生产重组hOCIFm奠定了基础.

关键词：破骨细胞抑制因子高密度培养大肠杆菌

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