检索结果-内蒙古大学图书馆

海军军医大学学报 2022年第12期43卷 1391-1396页

作者：童启聆程鼎原高思懿邹彬亓茉言邓博文李振钢孙铭娟王梁华海军军医大学(第二军医大学)基础医学院学员队上海200433 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的探究核酸适配体对岩沙海葵毒素(PLTX)细胞毒性的拮抗作用。方法采用细胞毒性实验分别检测并比较PLTX对小鼠胚胎成纤维细胞株NIH-3T3、仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1及人永生化角质形成细胞株HaCaT的毒性作用,以及核酸适配体13-S3对PLTX... 详细信息

目的探究核酸适配体对岩沙海葵毒素(PLTX)细胞毒性的拮抗作用。方法采用细胞毒性实验分别检测并比较PLTX对小鼠胚胎成纤维细胞株NIH-3T3、仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1及人永生化角质形成细胞株HaCaT的毒性作用,以及核酸适配体13-S3对PLTX细胞毒性的拮抗作用(PLTX与适配体的浓度比例均为1∶1)。采用红细胞溶血实验检测PLTX对绵羊红细胞的溶血作用,以及适配体对PLTX溶血活性的抑制作用。结果细胞毒性实验结果显示,HaCaT细胞的IC50为(1.24±0.93)nmol/L,CHO-K1细胞的IC50为(3.95±0.78)×10^(-3)nmol/L,NIH-3T3细胞的IC50为(5.18±1.92)×10^(-3)nmol/L。与PLTX对照组比较,各浓度(9.3×10^(-4)、9.3×10^(-3)、9.3×10^(-2)、9.3×10^(-1)、9.3、93.3 nmol/L)PLTX+适配体13-S3组的HaCaT细胞存活率均升高(P均<0.05)。在12.5 nmol/L PLTX浓度下,与PLTX+适配体N7-T(节球藻毒素R的特异性适配体)组相比,PLTX+适配体13-S3组的溶血率下降更明显(P<0.05),表明适配体13-S3能够特异性地抑制PLTX对绵羊红细胞的溶血活性。结论 HaCaT细胞存活率对PLTX浓度变化(9.3×10^(-4)~93.3 nmol/L)具有较好的梯度响应,相应浓度的核酸适配体能够拮抗PLTX对HaCaT细胞的毒性作用。在12.5 nmol/L PLTX浓度下,相应浓度适配体能够有效抑制PLTX对绵羊红细胞的溶血活性,具有细胞保护作用。

关键词：岩沙海葵毒素适配体细胞毒性细胞保护作用

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隆纳霉素引起三阴性乳腺癌细胞周期阻滞基因表达谱及关键通路的生物信息学分析

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第二军医大学学报 2021年第6期42卷 585-595页

作者：薛佳兴孔杰卢小玲孙筱于豪冰梁珍珍徐尧邓博文焦炳华海军军医大学(第二军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的利用生物信息学方法分析隆纳霉素对人三阴性乳腺癌细胞系细胞周期阻滞的作用机制。方法利用隆纳霉素处理人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞48、72 h,计算IC50,采用流式细胞术分析细胞周期变化。选取0.8μmol/L隆纳霉素处理48 h的M... 详细信息

目的利用生物信息学方法分析隆纳霉素对人三阴性乳腺癌细胞系细胞周期阻滞的作用机制。方法利用隆纳霉素处理人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞48、72 h,计算IC50,采用流式细胞术分析细胞周期变化。选取0.8μmol/L隆纳霉素处理48 h的MDA-MB-468细胞和未加药处理的对照细胞进行转录组测序,测序数据经质量控制过滤后,使用DESeq21.16.1软件进行差异表达基因分析,并进行基因本体和京都基因与基因组百科全书功能分析及基因集富集分析,用STRING工具进行蛋白质相互作用网络分析及用AutoDock 1.5.6软件进行分子对接预测。结果隆纳霉素干预MDA-MB-468细胞48、72 h的IC50分别为2.733和0.866μmol/L,且流式细胞术分析显示隆纳霉素干预48 h有明显G2/M阻滞作用。隆纳霉素干预后共筛选出1764个差异表达基因,主要定位于NF-κB介导的TNF-α通路和P53通路,G蛋白γ亚基7(GNG7)、G蛋白γ亚基11(GNG11)、C-X-C基序趋化因子配体8(CXCL8)、腺苷酸环化酶2(ADCY2)等基因可能是隆纳霉素作用基因网络中的关键节点。隆纳霉素与DNA分子、拓扑异构酶、基因表达调节蛋白[20S蛋白酶体β亚单位5(PSMB5)和含有SET结构域7的组蛋白赖氨酸甲基转移酶(SETD7)]有较好的结合及相互作用。结论隆纳霉素具有与蝴蝶霉素类似的功能,其通过与DNA-拓扑异构酶Ⅰ复合物中的DNA分子结合发挥抗肿瘤活性;还可通过与基因表达调节蛋白PSMB5和SETD7结合影响GNG7、GNG11、CXCL8、ADCY2等基因的表达水平,从而上调NF-κB介导的TNF-α通路和P53通路,最终导致乳腺癌细胞发生G2/M阻滞,发挥抗肿瘤作用。

关键词：隆纳霉素蝴蝶霉素类似物三阴性乳腺癌细胞周期阻滞

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生物化学与分子生物学实验教学中常见问题与解决方法

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科教导刊-电子版（上旬） 2020年第6期 177-178页

作者：廖俊高云孔杰卢小玲朱玉平王梁华第二军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海 200433 第二军医大学基础医学院基础医学实验教学中心上海 200433

生物化学与分子生物学实验课程是将理论知识和动手操作能力相结合的重要基础课程.在实验教学过程中,教员通过发现常见的问题并针对这些问题提出行之有效的的解决办法,能够让学生充分意识到实验课程的重要性,发挥自主学习的能动性,提高... 详细信息

生物化学与分子生物学实验课程是将理论知识和动手操作能力相结合的重要基础课程.在实验教学过程中,教员通过发现常见的问题并针对这些问题提出行之有效的的解决办法,能够让学生充分意识到实验课程的重要性,发挥自主学习的能动性,提高发现、分析、解决问题以及创新实验的能力.

关键词：生物化学分子生物学实验教学

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低糖与甘露糖协同抑制胰腺肿瘤生长

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肿瘤防治研究 2020年第5期47卷 319-323页

作者：陈哲文石汉平缪明永余亚英张启瑜温州医科大学附属第二医院肝胆外科温州325000 首都医科大学附属北京世纪坛医院胃肠外科/临床营养科北京100038 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 河南大学第一附属医院营养科开封475001 温州医科大学附属第一医院肝胆外科温州325000

目的探讨胰腺癌细胞在不同葡萄糖浓度下对甘露糖敏感度的变化与机制。方法 CCK-8细胞活性和增殖试剂盒检测在不同浓度葡萄糖与甘露糖作用下的胰腺癌细胞增殖情况,锥虫蓝染色测定细胞存活率,Western blot实验观察PMI酶表达的变化。生酮... 详细信息

目的探讨胰腺癌细胞在不同葡萄糖浓度下对甘露糖敏感度的变化与机制。方法 CCK-8细胞活性和增殖试剂盒检测在不同浓度葡萄糖与甘露糖作用下的胰腺癌细胞增殖情况,锥虫蓝染色测定细胞存活率,Western blot实验观察PMI酶表达的变化。生酮饮食联合甘露糖水溶液喂养荷瘤模型鼠验证实验结果。结果随着葡萄糖培养浓度降低,胰腺癌细胞增殖受到明显抑制,所需的甘露糖浓度也明显降低;高糖培养下甘露糖明显诱导PMI酶的表达,而在低糖下诱导效应减弱;生酮饮食具有降血糖、升血酮的作用,与甘露糖联合应用组的荷瘤鼠肿瘤抑制效果显著。结论低葡萄糖浓度增强甘露糖抑制肿瘤的作用,生酮饮食与甘露糖联合应用可提高抗肿瘤的疗效。

关键词：胰腺癌甘露糖葡萄糖肿瘤生酮饮食

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雷公藤红素与肿瘤代谢的关系研究进展

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2020年第1期7卷 18-21页

作者：李晔宋蒙蒙常文军缪明永潘亚敏上海中医药大学附属曙光医院内镜中心上海201203 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450052 第二军医大学热带医学与公共卫生学系环境卫生教研室上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

雷公藤红素是一种中草药活性成分,具有广泛的治疗特性及较高的药用价值,通常用于治疗自身免疫性疾病、代谢性疾病及肿瘤.雷公藤红素可以通过多种途径抑制肿瘤的发生、发展,尤其与肿瘤代谢密切相关,对肿瘤细胞的糖代谢、脂类代谢、氨基... 详细信息

雷公藤红素是一种中草药活性成分,具有广泛的治疗特性及较高的药用价值,通常用于治疗自身免疫性疾病、代谢性疾病及肿瘤.雷公藤红素可以通过多种途径抑制肿瘤的发生、发展,尤其与肿瘤代谢密切相关,对肿瘤细胞的糖代谢、脂类代谢、氨基酸代谢及肿瘤微环境产生重要影响.雷公藤红素导致线粒体功能障碍以改变葡萄糖代谢途径,使肿瘤细胞供能不足;通过诱导肝内Sirt1的表达影响肿瘤宿主的脂类代谢;抑制吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)表达和色氨酸分解代谢来抑制结直肠癌,与IDO的抑制剂D-1MT联用控制胰腺癌;在肿瘤微环境中,雷公藤红素可通过抑制NLRP3炎性小体及重塑免疫抑制治疗黑色素瘤.根据最新研究报道,肠道菌群的高度代谢可以提高雷公藤红素在体内的功效,影响肿瘤发展.本文从代谢的角度阐述雷公藤红素对肿瘤的主要作用及机制,为其药理作用的深入研究提供科学依据.

关键词：雷公藤红素肿瘤代谢肿瘤微环境肠道菌群

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新型隐球菌临床菌株中CNAG＿01032基因的鉴定和功能研究

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菌物学报 2019年第8期38卷 1341-1349页

作者：邱文兰咏哲王迪黄劲廖万清康颖倩贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省微生物与人类健康关系研究人才基地暨贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550025 第二军医大学上海长征医院真菌学研究所上海200003

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检... 详细信息

新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌。本课题组在前期工作中发现CNAG01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769(C2)为背景构建CNAG01032基因敲除突变体,并检测突变株和野生型菌株经典毒力因子变化情况;使用API 20C AUX测试系统测试突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况;使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测。结果显示:成功构建以临床株C1、C2为背景的CNAG-01032基因敲除突变株;突变株在37℃生长、黑色素产生与野生型菌株无显著差异,但荚膜厚度分别比C1、C2减少16.4%、18.2%;两基因敲除菌株均不能分解利用纤维二糖;致病性与野生型菌株无显著差异。新型隐球菌CNAG01032基因可能参与临床来源菌株IFM56800、IFM56769的荚膜合成和纤维二糖的代谢。

关键词：病原性真菌基因敲除荚膜纤维二糖

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盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的研究

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生物加工过程 2019年第2期17卷 131-137页

作者：朱五二缪明永顾正华李由然丁重阳石贵阳江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室江苏无锡214122 第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433

以盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶为研究对象,探究其合成低聚半乳糖效率。为了提高低聚半乳糖产率,对反应条件进行了优化,并以反应温度、pH、加酶量、底物浓度为考察对象进行正交试验,得到最优反应条件:反应温度40℃,pH 7.0,加酶量50 U/mL,... 详细信息

以盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶为研究对象,探究其合成低聚半乳糖效率。为了提高低聚半乳糖产率,对反应条件进行了优化,并以反应温度、pH、加酶量、底物浓度为考察对象进行正交试验,得到最优反应条件:反应温度40℃,pH 7.0,加酶量50 U/mL,底物质量浓度300 g/L。反应6 h时可获得最大低聚半乳糖产率(41.91±0.27)%,乳糖消耗率为(82.47±0.38)%。反应4～8 h内低聚半乳糖产率都维持在40%以上,此时乳糖消耗率均在80%以上,在提高乳糖利用率的同时实现了低聚半乳糖的高产,有利于降低生产成本,为低温S62 β-半乳糖苷酶工业化应用奠定了基础。

关键词： β-半乳糖苷酶低聚半乳糖产率乳糖消耗率盐单胞菌

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基于超滤膜辅助的糖蛋白全O-连接糖链的富集和MALDI-TOF/TOF质谱结构解析

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生物化学与生物物理进展 2017年第1期44卷 70-79页

作者：武艳丽杨刚龙缪明永关锋江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室无锡214122 第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433

哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构的解... 详细信息

哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构的解析有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜辅助(FASP)富集细胞、血清和尿液中糖蛋白全O-连接糖链的方法,根据糖蛋白与其糖链结构之间的分子质量差异,利用10 KD超滤膜富集蛋白质样品中由β消除反应释放的全O-连接糖链,将糖链甲基化修饰后再使用MALDI-TOF/TOF-MS进行解析,同时利用二级质谱进行结构确认.通过上述方法可从标准糖蛋白mucin、细胞、血清和尿液样本中分别鉴定到83、29、33和85种O-连接糖链结构,利用该方法可以从复杂样品中富集和解析糖蛋白全O-连接糖链,实现快速、高效、高通量地解析糖蛋白O-连接糖链的目的.

关键词： O-连接糖链糖组学超滤膜辅助(FASP) MALDI—TOF/TOF—MS

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肿瘤生酮代谢疗法敏感性依赖于酮体代谢酶水平

肿瘤生酮代谢疗法敏感性依赖于酮体代谢酶水平

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2018中国国际肿瘤营养学论坛、第六届全国肿瘤营养与支持治疗学术会议、第四届海峡两岸肿瘤营养高峰论坛、2018吴阶平医学营养学术会议

作者：张杰高云俞伟男石汉平缪明永徐州医科大学附属淮安医院第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室徐州医科大学附属淮安医院首都医科大学附属北京世纪坛医院普外四科/临床营养科

目的基础实验及临床研究均证实生酮饮食(ketogenic diet,KD)具有一定的抗肿瘤作用,但是疗效并不一致,尚没有特异性的分子靶标或明确的适应证来衡量其抗肿瘤作用。本研究拟检测多种肿瘤细胞系酮体代谢酶的表达情况,以验证不同酮体代谢... 详细信息

目的基础实验及临床研究均证实生酮饮食(ketogenic diet,KD)具有一定的抗肿瘤作用,但是疗效并不一致,尚没有特异性的分子靶标或明确的适应证来衡量其抗肿瘤作用。本研究拟检测多种肿瘤细胞系酮体代谢酶的表达情况,以验证不同酮体代谢酶表达水平的肿瘤细胞对KD治疗的敏感性。

关键词：生酮饮食生酮代谢疗法肿瘤酮体

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单羧酸转运载体与肿瘤代谢的关系

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肿瘤代谢与营养电子杂志 2019年第2期6卷 266-271页

作者：陈哲文张杰王正平宋蒙蒙张启瑜缪明永石汉平首都医科大学附属北京世纪坛医院胃肠外科/临床营养科北京100038 温州医科大学附属第二医院浙江温州325000 徐州医科大学附属淮安医院江苏淮安223002 聊城大学生物制药研究院山东聊城252059 郑州大学河南郑州450000 温州医科大学附属第一医院浙江温州325000 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

单羧酸转运载体是一类重要的跨膜转运蛋白,它们负责单羧酸类物质如丙酮酸、乳酸、酮体等的跨膜转运,具有促进这些物质的营养吸收,维持细胞代谢平衡等功能。单羧酸转运载体在肿瘤中的表达明显上调,与糖代谢、脂代谢、能量代谢途径及肿瘤... 详细信息

单羧酸转运载体是一类重要的跨膜转运蛋白,它们负责单羧酸类物质如丙酮酸、乳酸、酮体等的跨膜转运,具有促进这些物质的营养吸收,维持细胞代谢平衡等功能。单羧酸转运载体在肿瘤中的表达明显上调,与糖代谢、脂代谢、能量代谢途径及肿瘤微环境的形成密切相关,对维持肿瘤细胞高糖酵解状态具有重要作用。在一些肿瘤中,乳酸由低氧区的糖酵解癌细胞产生,通过单羧酸转运载体4排出到肿瘤微环境中,然后被表达单羧酸转运载体1的外周氧化型癌细胞摄取,进入TCA循环成为呼吸作用的燃料。丙酮酸也通过单羧酸转运载体1和单羧酸转运载体2外排到肿瘤细胞外,而肿瘤微环境中的丙酮酸能够促进乳腺癌的肺转移。同时,单羧酸转运载体促进酸性的肿瘤微环境形成,这不仅有利于肿瘤的生长、增殖及转移,还会导致肿瘤周围正常细胞的死亡,肿瘤的免疫抑制也与这有关。目前已有多项研究证实了单羧酸转运载体1和单羧酸转运载体4的高表达与肿瘤恶性程度及预后呈正相关,抑制单羧酸转运载体的表达可以抑制肿瘤的生长、增殖及转移,这为肿瘤的靶向治疗提供了潜在的治疗靶点。目前已有的单羧酸转运载体抑制剂如CHC、AR-C155858和AZD3965对单羧酸转运载体各型的选择性较差,但已经显示出了良好治疗效果。开发新型单羧酸转运载体抑制剂的同时,探索与传统肿瘤疗法联合应用的策略具有不错的临床应用前景。

关键词：单羧酸转运载体肿瘤代谢糖酵解靶向治疗

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