检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2009年第11期30卷 1221-1224页

作者：赵洁莹陈欢王雁陈光椿卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:在先前研究发现Hedgehog信号通路的下游转录因子Gli1能够抑制乳腺癌细胞中的雌激素信号通路活性的基础上,观察雌激素受体ERα在乳腺癌细胞MCF-7中对转录因子Gli1的转录活性和表达的影响,以探讨两条信号通路之间是否存在着交互作用... 详细信息

目的:在先前研究发现Hedgehog信号通路的下游转录因子Gli1能够抑制乳腺癌细胞中的雌激素信号通路活性的基础上,观察雌激素受体ERα在乳腺癌细胞MCF-7中对转录因子Gli1的转录活性和表达的影响,以探讨两条信号通路之间是否存在着交互作用。方法:应用荧光素酶报告基因转录活性分析的方法,将Gli1的表达质粒和Gli的报告基因质粒pGli-BS-luc以及ERα的表达质粒或者空载体共同瞬时转染到乳腺癌细胞MCF-7中,观察Gli1转录活性的变化。然后分别用实时定量PCR和蛋白质印迹的方法检测乳腺癌细胞中ERα的过表达对Gli1 mRNA和蛋白表达的影响。结果:荧光素酶的活性随着ERα过表达剂量的增加而增加,ERα的质粒量在500 ng/孔时可将荧光素酶的活性升高到对照细胞的3.5倍(P<0.001)。雌激素处理后,荧光素酶的活性无显著变化。过表达ERα后可将Gli1 mRNA的表达水平提高为原来的2倍(P<0.01),也可明显增加Gli1蛋白的表达水平。结论:ERα在MCF-7细胞中的过表达能够明显增强Gli1的转录活性,增加Gli1的表达。这表明乳腺癌细胞中,转录因子ERα和Gli1之间存在着交互作用。

关键词： Gli1 乳腺肿瘤雌激素受体α Hedgehog

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多功能分子S5a/angiocidin的抗肿瘤作用

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生命的化学 2009年第6期29卷 817-821页

作者：陆健昇焦炳华王梁华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

S5a/angiocidin是由377个氨基酸组成的蛋白质,是胞内26S蛋白酶体19S调节微粒的亚单位,也存在于细胞外,尤其高表达于多种实体肿瘤和肿瘤新生血管内皮细胞。近年发现S5a/angiocidin具有抑制肿瘤新生血管生成、诱导肿瘤细胞凋亡和诱导单核... 详细信息

S5a/angiocidin是由377个氨基酸组成的蛋白质,是胞内26S蛋白酶体19S调节微粒的亚单位,也存在于细胞外,尤其高表达于多种实体肿瘤和肿瘤新生血管内皮细胞。近年发现S5a/angiocidin具有抑制肿瘤新生血管生成、诱导肿瘤细胞凋亡和诱导单核细胞分化等生物学活性,有望成为新一代抗肿瘤分子,用于肿瘤治疗。S5a/angiocidin的这些生物学功能可能与细胞内外S5a/angiocidin的分布比例有关,也有可能其靶细胞表面存在其受体,或存在着全新的作用机制。

关键词： S5 a/angiocidin 蛋白酶体泛素化修饰抗肿瘤

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促凋亡蛋白PUMA对小鼠肝细胞凋亡的影响及其分子机制

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第四军医大学学报 2009年第23期30卷 2726-2730页

作者：郝强陈松杨生生陈欢焦炳华蔡在龙第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:通过腺病毒介导puma在小鼠肝细胞***2内过表达,观察其对周期和凋亡的影响及其分子机制.方法:用HEK293 low passage(LP)细胞包装制备重组PUMA腺病毒(Ad-puma)和GFP(Ad-GFP)腺病毒,PCR,Western Blot检测鉴定包装的腺病毒.腺病毒感染*... 详细信息

目的:通过腺病毒介导puma在小鼠肝细胞***2内过表达,观察其对周期和凋亡的影响及其分子机制.方法:用HEK293 low passage(LP)细胞包装制备重组PUMA腺病毒(Ad-puma)和GFP(Ad-GFP)腺病毒,PCR,Western Blot检测鉴定包装的腺病毒.腺病毒感染***2细胞后,流式细胞仪检测感染Ad-PUMA后的***2细胞的周期和凋亡.免疫共沉淀实验分析BCL-2家族成员间在PUMA介导的凋亡中的相互作用.结果:①用HEK293包装制备了目的细胞中有效高表达Ad-PUMA和Ad-GFP浓缩病毒存储液.所制备的病毒浓缩液Ad-PUMA的滴度为2.0×1011ifu/L;Ad-GFP滴度为2.1×1012ifu/L.②Ad-PUMA感染BNL CL.2细胞后24,36 h与对照组相比细胞凋亡增加;36 h S期细胞明显增多细胞周期中的S期的细胞则明显增多,G2期细胞相对减少.③小鼠肝细胞中PUMA介导的凋亡不仅可能与PUMA,Bax与Bcl-XL的竞争性结合作用有关,也存在PUMA与Bax的直接激活作用.结论:PUMA可有效地促进鼠肝细胞***2的凋亡.可能Ad-PUMA介导的PUMA过表达后使细胞从S期到G2期时发生停留或阻滞.在***2细胞中,PUMA促凋亡的分子机制既与PUMA,Bax与Bcl-XL的竞争性结合作用有关,也存在PUMA与Bax的直接相互作用.

关键词： PUMA 腺病毒感染周期细胞凋亡

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PUMA在小鼠肝再生早期的表达及其调控机制

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第四军医大学学报 2009年第23期30卷 2731-2733页

作者：陈松郝强杨生生陈欢焦炳华蔡在龙第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的：观察部分肝脏切除术后PUMA及其相关的转录因子在小鼠肝再生早期的表达.方法：成年雄性C57/BL6小鼠经70%肝脏切除后建立肝再生模型,采用实时定量PCR,Western印迹和免疫组化方法研究PUMA在肝再生不同时期（共7个时间点）的表达,同... 详细信息

目的：观察部分肝脏切除术后PUMA及其相关的转录因子在小鼠肝再生早期的表达.方法：成年雄性C57/BL6小鼠经70%肝脏切除后建立肝再生模型,采用实时定量PCR,Western印迹和免疫组化方法研究PUMA在肝再生不同时期（共7个时间点）的表达,同时还检测了p53和Slug蛋白水平的变化.结果：同对照组相比,PUMA mRNA自肝切术后6~72 h显著下降（P〈0.05）,同其蛋白水平的变化一致;同时p53和Slug蛋白分别自术后24 h和6 h上调.结论：在肝切术后72 h,PUMA的表达下调并不依赖p53,可能与Slug的上调相关,提示PUMA在肝再生早期可能参与对细胞凋亡的调节.

关键词：肝再生部分肝脏切除术 PUMA p53 Slug

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第二军医大学学报 2009年第4期30卷 416-419页

作者：雷鸣缪明永徐卫东第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探讨骨肉瘤乳腺癌特异基因1(breast carcinoma specific gene 1,BCSG1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lym-phoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关转录因子(Bcl-2-associated transcription factor,BTF)和雌激素受体(estrogen receptor,ER)基因表达水平及意义。方法:用实时荧光定量RT-PCR技术检测16例低(未)分化骨肉瘤标本及成骨细胞系hFOB 1.19细胞株BCSG1、BTF、Bcl-2、ERα、ERβmRNA的表达,分析各指标间的相关性。结果:骨肉瘤组织中BCSG1、Bcl-2、ERα、ERβ的表达明显高于成骨细胞系hFOB 1.19细胞株(P<0.01),BTF表达两组无统计学差异;骨肉瘤组织ERα/ERβ显著高于成骨细胞系hFOB 1.19细胞株(P<0.01);肿瘤瘤体大小、患者性别对BCSG1、Bcl-2、BTF、ERα、ERβ的表达未见显著影响;骨肉瘤组织中BCSG1与ERα(r=0.696,P<0.01)、ERβ与Bcl-2(r=0.875,P<0.01)、ERα/ERβ与Bcl-2基因表达水平(r=-0.649,P<0.01)分别存在线性关系。结论:骨肉瘤组织中可能存在BCSG1增强ERα基因转录激活的作用,ERβ可能影响Bcl-2的表达。

关键词：乳腺癌特异基因 Bcl-2 雌激素受体转录因子骨肉瘤

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融合蛋白Kininogen D5_(60-148)-TRAIL_(114-281)的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2009年第4期16卷 336-341页

作者：宗英王梁华孙铭娟董晓毅王燕陆国才焦炳华第二军医大学新药评价中心上海200433 第二军医大学生物化学和分子生物学教研室上海200433 第二军医大学病理生理学教研室上海200433

目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL114-281(pMAL-TRAIL)和pMAL-Kininogen D560-148-TRAIL114-281(pMAL-KT),重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果:成功构建原核表达载体pMAL-KD5、pMAL-TRAIL和pMAL-KT,并获得纯化的融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT。融合蛋白MBP-KT与MBP-KD5、MBP-TRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBP-KT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论:融合蛋白Kininogen D560-148-TRAIL114-281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础。

关键词：高分子量激肽原肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体血管生成抑制因子胰腺肿瘤细胞

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TRAIL在肿瘤治疗中的敏感性调节

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生命的化学 2009年第5期29卷 654-657页

作者：杨玉鹤孙铭娟王梁华焦炳华第二军医大学研究生管理大队学员七队第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员。TRAIL可与死亡受体DR4、DR5结合,通过触发胱天蛋白酶通路诱导肿瘤细胞凋亡。诱骗受体可与死亡受体竞争结合TRAIL,从而抑制TRAIL的凋亡活性。NF-κB和Bcl-2家族可作为TRAI... 详细信息

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员。TRAIL可与死亡受体DR4、DR5结合,通过触发胱天蛋白酶通路诱导肿瘤细胞凋亡。诱骗受体可与死亡受体竞争结合TRAIL,从而抑制TRAIL的凋亡活性。NF-κB和Bcl-2家族可作为TRAIL敏感性调节的重要靶点。

关键词： TRAIL 肿瘤细胞抗药性死亡受体 NF-κB Bcl-2家族

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反相高效液相色谱法测定化妆品中几种防腐剂

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日用化学工业 2009年第2期39卷 138-140页

作者：王健辉胡家庆张欣荣尹笋君刘小宇杨峰第二军医大学药学院无机化学教研室上海200433 海军医学研究所上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

采用反相高效液相色谱法测定化妆品中重氮烷基脲、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯3种防腐剂,用Waters XTerra Ms C18柱(4.6 mm i.d×250 mm,5μm),乙腈-水作为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm。回收率为97.30%～102.00%,相对... 详细信息

采用反相高效液相色谱法测定化妆品中重氮烷基脲、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯3种防腐剂,用Waters XTerra Ms C18柱(4.6 mm i.d×250 mm,5μm),乙腈-水作为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm。回收率为97.30%～102.00%,相对标准偏差为3.6%～8.2%。

关键词：化妆品反相高效液相色谱法防腐剂

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浅谈各种记忆法在生物化学教学中的应用

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2009年第5期11卷 545-547页

作者：刘小宇刘军华高云卢小玲黄才国焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

生物化学是一门重要的专业基础课，针对现行统编教材知识点多、理论抽象难懂的特点，在教学过程中综合运用多种记忆方法，包括场景记忆法、拆分记忆法、对比记忆法等，可有效帮助学生记忆基本的反应过程和重要的概念，取得良好的教学效果。

关键词：生物化学记忆方法教学效果

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一株来源于东海的盐单胞菌的鉴定及活性筛选

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中国海洋药物 2009年第6期28卷 5-10页

作者：刘军华龙聪卢小玲杨桥曹霞刘小宇焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的对一株分离自东海海水样品中的菌株(编号P12008)进行鉴定和生物学活性研究。方法对P12008进行革兰染色、形态观察及耐盐实验,结合16S rDNA序列测定确立其进化地位。采用体外细胞毒模型MTT法测定菌株发酵液对HepG2细胞及HL60细胞的... 详细信息

目的对一株分离自东海海水样品中的菌株(编号P12008)进行鉴定和生物学活性研究。方法对P12008进行革兰染色、形态观察及耐盐实验,结合16S rDNA序列测定确立其进化地位。采用体外细胞毒模型MTT法测定菌株发酵液对HepG2细胞及HL60细胞的抑制作用;采用DPPH和ABTS模型对菌株发酵液的乙酸乙酯提取液进行抗氧化作用研究。结果P12008为G^-菌,光镜下呈椭圆或圆形。该菌株在不含NaCl的培养基中不能生长,最适生长盐度为12.5%。16S rDNA序列分析的结果表明P12008菌株与Halomonas ***0306A1(EU124745.1)相似度最高,为99%。生物学活性研究发现,该菌株的发酵液对HepG2细胞的抑制率为17.1%,对ABTS清除率达到40.71%(100μg·mL^(-1)),而对DPPH的抑制率达到59.06%(375μg·mL^-)抗氧化活性较强。结论研究表明,P12008是一株中等嗜盐的盐单胞菌,其发酵液具有一定的体外细胞毒活性和较强的抗氧化作用,值得进一步研究其活性代谢产物。

关键词：鉴定细胞毒抗氧化作用

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