检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2006年第9期27卷 998-1001页

作者：徐红丽郭婷婷郭一峰张建鹏冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海水产大学生命学院中心实验室上海200090

目的:分离纯化贻贝多糖MP-Ⅰ,并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法:采用热水提取,Sevage法除蛋白分离得粗多糖,DEAE-Sepharose、Sepharose CL-6B柱层析纯化的方法从东海厚壳贻贝中得到贻贝多糖纯品MP-Ⅰ。用GC及TLC法进行单糖组分的分析,... 详细信息

目的:分离纯化贻贝多糖MP-Ⅰ,并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法:采用热水提取,Sevage法除蛋白分离得粗多糖,DEAE-Sepharose、Sepharose CL-6B柱层析纯化的方法从东海厚壳贻贝中得到贻贝多糖纯品MP-Ⅰ。用GC及TLC法进行单糖组分的分析,用MTT法进行体外抗肿瘤活性的研究。结果:得到贻贝多糖纯品MP-Ⅰ,多糖的得率为2.14%。单糖组分分析显示MP-Ⅰ主要由葡萄糖组成,MP-Ⅰ(0.5,0.1,0.02 mg/ml)对体外HO-8910、MCF-7、K562、SMMC-7721肿瘤细胞均有不同程度抑制作用(P<0.01),其中高浓度组对HO-8910、MCF-7肿瘤细胞的抑制率分别达到30.55%和36.38%。结论:贻贝多糖MP-Ⅰ主要由葡萄糖组成,对HO-8910、MCF-7、K562、SMMC-7721肿瘤细胞有体外抑制作用。

关键词：贻贝多糖类分离和提纯抗肿瘤药

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中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 25-27页

作者：尚雁君郭跃伟黄才国贾睿许强芝魏善建焦炳华张建荣第二军医大学基础医学部生物化学及分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50... 详细信息

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50μmol/ml)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,利用5 min超氧离子生成量来测定黄嘌呤氧化酶活性(NBT显色法)。再将20、40、60μg/ml renierol或100 U/ml阳性对照SOD加入25℃预热过的邻苯三酚,在波长420 nm处测定吸光值,观察renierol对自由基的直接清除作用。建立尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,并给高、中、低剂量renierol组小鼠口服10、203、0 ***-1renierol,别嘌呤醇组给药量为2 ***-1,用全自动生化分析仪测定实验鼠的血清尿酸值,观察renierol体内降尿酸作用。结果:Renierol体外是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,其IC50为1.36μ***-1,在体内也有明显的降尿酸作用。结论:Renierol通过抑制黄嘌呤氧化酶来降血尿酸。

关键词： renierol 海绵海洋生物学黄嘌呤氧化酶高尿酸血症抑制作用

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SMO液对低温下肾皮质线粒体功能的保护作用

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 196-199页

作者：牛强朱有华缪明永杨军昌张纯第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长征医院药学部

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法测定其活性，描记四态呼吸曲线，计算Ⅲ态、Ⅳ态耗氧速率、线粒体呼吸控制率（RCR）及磷氧比（P／O）。结果：低温保存期间，HC-A组肾皮质线粒体水肿、空泡样变明显重于SMO组和UW组，而后两者改变相似；随着低温保存时间延长，实验组和对照组肾皮质线粒体Ⅲ态呼吸耗氧速率、RCR和P／0均明显降低；保存1～3dHC-A组Ⅲ态呼吸耗氧速率显著低于SMO组（P〈0．05）；保存各时间点SMO组线粒体RCR和P／O显著高于HC-A组（P〈0．05），与UW组无明显差异。结论：SMO液对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用比HC-A液强，与UW液相似。

关键词：器官保存液低温保存缺氧肾皮质线粒体保护作用

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丹参总酚酸抑制大鼠肾间质纤维化的初步观察

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第二军医大学学报 2006年第12期27卷 1295-1298页

作者：尚雁君黄才国蒋山好朱大元魏善建焦炳华李锴男张建荣第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中国科学院上海药物研究所上海201203 第四军医大学基础医学部病理学教研室西安710033 第二军医大学长海医院实验诊断科上海200433

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组... 详细信息

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组和丹参总酚酸组分别灌胃ACEI[6mg/(kg·d)]和丹参总酚酸[20mg/(kg·d)],连续8d。术后第7天分别处死各组大鼠用免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达情况。行H-E和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果丹参总酚酸组和ACEI组TGF-β1的表达量与模型组(0.22±0.06)比较有明显的下降(P<0.05),结果分别是1.38±0.26和1.38±0.26。丹参总酚酸能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β1的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论丹参总酚酸对UUO所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β1的表达有关。

关键词：丹参总酚酸肾间质纤维化转化生长因子β1

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一株具有抗菌和细胞毒活性的海洋嗜盐菌XD20的筛选和鉴定

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 8-11页

作者：穆军焦炳华孙炳达刘杏忠第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学国家重点实验室北京100080

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体r... 详细信息

目的：从中国东海分离筛选活性海洋微生物，进而确定所获取的活性菌株的分类地位。方法：乘坐专业考察船只在中国东海海域进行系统采样，采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选。对获取的活性菌株进行形态特征研究、盐需求测试、核糖体rDNA ITS区序列分析，并将所测得序列在NCBI数据库中进行相似性搜索，选取其中相似性较高的序列以邻接法构建系统进化树，将该菌株分类鉴定到种。结果：从我国东海海域C01站位（122°26′30″，30°43′48″）30m水深处分离获得一活性菌株XD20，是一嗜盐菌株，能耐受高达10．0％的盐浓度，合适的生长盐浓度范围为2．5％～7．5％；它对白念珠菌具有抑菌活性，对SMMC7721细胞株和HeLa细胞株具有细胞毒活性。以菌丝断裂方式产生节孢子，孢子大小及形态与Wallemia sebi相符；rDNAITS区测序发现，该菌株序列与Wallemia sebi的多条序列相似程度较高，且差异均在ITS1和ITS2区，属于可变区。结论：活性菌株XD20首次从海洋中分离获得，为一嗜盐海洋菌株，鉴定为Wallemia sebi（Fr．）Arx。

关键词：海洋嗜盐菌抗真菌活性细胞毒活性 XD20 海洋微生物

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：孙铭娟王梁华董晓毅宗英焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:获得人angioarrestin C-末端hFD融合表达蛋白,并对其功能进行了初步研究.方法:用DNA重组法构建了hFD cDNA和麦芽糖结合蛋白重组原核表达质粒pMAL-C2-hFD.将重组质粒转入大肠杆菌*** BL21(DE3),经0.3 mmol/L IPTG在37℃条件下诱导4h... 详细信息

目的:获得人angioarrestin C-末端hFD融合表达蛋白,并对其功能进行了初步研究.方法:用DNA重组法构建了hFD cDNA和麦芽糖结合蛋白重组原核表达质粒pMAL-C2-hFD.将重组质粒转入大肠杆菌*** BL21(DE3),经0.3 mmol/L IPTG在37℃条件下诱导4h,SDS-PAGE检测.取上清纯化、透析、浓缩并冻干,以此为抗原免疫Balb/c小鼠制备多抗.结果:融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的20％.多抗效价达1∶10240,此多抗可以与pET-22b(+)表达系统获得的hFD重组蛋白发生很好的抗原抗体反应.结论:angioarrestin的C-末端hFD在大肠杆菌中得到高效表达,以此为抗原制备的抗angioarrestin多克隆抗体为深入研究angioarrestin提供了材料.

关键词： angioarrestin 融合蛋白大肠杆菌多克隆抗体血管生成素多抗制备家族蛋白

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：孙铭娟王梁华董晓毅宗英焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:克隆人血管生成素相关家族蛋白-1 angioarrestin基因,构建angioarrestin基因的真核表达载体.方法:从人肝cDNA文库中经PCR扩增出angioarrestin基因,经纯化、回收目的片断,将其插入克隆载体pcDNA3.1/His-Myc(-)B,构建重组质粒angioar... 详细信息

目的:克隆人血管生成素相关家族蛋白-1 angioarrestin基因,构建angioarrestin基因的真核表达载体.方法:从人肝cDNA文库中经PCR扩增出angioarrestin基因,经纯化、回收目的片断,将其插入克隆载体pcDNA3.1/His-Myc(-)B,构建重组质粒angioarrestin/pcDNA3.1/His-Myc(-)B,转染COS-7细胞,经RT-PCR和Western Blot确定转染成功.结果:从人肝cDNA文库中扩增出1473 bp 的angioarrestin目的片段,成功构建重组质粒angioarrestin/pcDNA3.1/His-Myc(-)B和FD/pcDNA3.1/His-Myc(-)B.结论:成功构建了angioarrestin和FD基因的真核表达重组质粒,为angioarrestin抗肿瘤血管形成作用机理的研究奠定了基础.

关键词： angioarrestin 血管生成素家族蛋白真核表达基因载体

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Kininogen D5和Trail融合蛋白的克隆表达和生物学活性的研究

Kininogen D5和Trail融合蛋白的克隆表达和生物学活性的研究

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：宗英王梁华孙铭娟董晓毅焦炳华第二军医大学生物化学和分子生物学教研室上海200433

本文用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导蛋白的表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经Amylose Resin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白,活性... 详细信息

本文用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导蛋白的表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经Amylose Resin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白,活性鉴定可以看出MBP-KT对肿瘤细胞1990有明显的抑制作用,而MBP-TK对肿瘤细胞1990的抑制作用不明显.同时,比较MBP-KT,MBP-TK,MBP-KD5和TRAIL对内皮细胞ECV304的作用,可以看到MBP-KT和MBP-KD5对ECV304有明显的抑制作用且MBP-KT大于MBP-KD5,但是MBP-TK和TRAIL几乎无作用,表明融合蛋白KT既具抗肿瘤作用又有抗新生血管的作用,从而为进一步研究靶向性杀伤肿瘤奠定了基础.

关键词：激肽原增殖抑制融合蛋白克隆表达生物学活性重组PCR技术

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中国南海海绵提取物-renierol抗痛风作用的实验研究

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中国海洋药物 2006年第5期25卷 25-27页

作者：尚雁君郭跃伟黄才国贾睿许强智魏善建焦炳华上海第二军医大学基础医学部生物化学及分子生物学教研室上海200433 中科院上海药物所上海201203

目的探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响和可能的作用机理。方法从海绵中分离提取renierol成分,采用尿酸生成法和超氧离子致NBT显色法测定黄嘌呤氧化酶活性,并进一步研究其作用机理。结... 详细信息

目的探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响和可能的作用机理。方法从海绵中分离提取renierol成分,采用尿酸生成法和超氧离子致NBT显色法测定黄嘌呤氧化酶活性,并进一步研究其作用机理。结果两种实验显示其对黄嘌呤氧化酶有明显的抑制作用,IC50分别为1.85和1.36μ***-1。结论该海绵中renierol成分能有效抑制黄嘌呤氧化酶。

关键词： Haliclona sp 海绵黄嘌呤氧化酶超氧离子痛风

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重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rh-TNFαD3a)治疗恶性肿瘤的临床研究

重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rh-TNFαD3a)治疗恶性肿瘤的临床...

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：夏阳焦炳华常州药业股份有限公司常州213003 第二军医大学基础部生物化学分子生物学教研室上海200433

目的:研究rh-TNFαD3a单药治疗晚期、复治的非霍奇金氏淋巴癌、晚期乳腺癌、恶性黑色素瘤、恶性肾癌和恶性胸水的临床疗效、不良反应和治疗前后的免疫功能变化.方法:采用单药治疗,静脉和胸腔注入给药.结果:在可评介疗效的260例病例中,... 详细信息

目的:研究rh-TNFαD3a单药治疗晚期、复治的非霍奇金氏淋巴癌、晚期乳腺癌、恶性黑色素瘤、恶性肾癌和恶性胸水的临床疗效、不良反应和治疗前后的免疫功能变化.方法:采用单药治疗,静脉和胸腔注入给药.结果:在可评介疗效的260例病例中,非霍奇金氏淋巴癌55例、晚期乳腺癌50例、恶性肾癌49例、恶性黑色素瘤肿37例的肿瘤缓解率分别为:21.8％、12.0％、8.2％、8.1％;肿瘤好转率分别为:32.7％、20.0％、12.5％、13.5％;临床受益率分别为:72.7％、78.8％、57.1％、56.8％.恶性胸水69例,有效率58.0％.结论:rh-TNFαD3aD单药静脉及胸腔给药治疗晚期癌症--非霍奇金氏淋巴癌、晚期乳腺癌、恶性肾癌、恶性黑色素瘤、恶性胸水具有较好的临床效果.并能提高肿瘤患者的细胞免疫,改善肿瘤患者的免疫功能.

关键词：肿瘤坏死因子恶性肿瘤肿瘤治疗

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