检索结果-内蒙古大学图书馆

第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：王梁华周生余焦炳华倪健冯奉仪第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国医学科学院肿瘤医院北京

细胞凋亡或程序性死亡是基因控制的细胞自主性死亡过程,它与组织器官的发育、机体的生理活动、疾病的发生及细胞癌变有着密切的关系.本文论述了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)或称凋亡素2配... 详细信息

细胞凋亡或程序性死亡是基因控制的细胞自主性死亡过程,它与组织器官的发育、机体的生理活动、疾病的发生及细胞癌变有着密切的关系.本文论述了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo-2 ligand,Apo2L)是近几年来发现的肿瘤坏死因子家族新成员,能选择性诱导肿瘤细胞凋亡对正常组织无明显损伤.本文论述了Apo2L的发现、Apo2L的生物学功能、Apo2L的生物学活性、Apo2L的研究现状以及Apo2L的临床应用前景。

关键词：干拢素细胞凋亡肿瘤坏死因子

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低剂量镉处理后大鼠睾丸差异表达基因的cDNA微阵列分析

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癌变．畸变．突变 2006年第2期18卷 84-87页

作者：张建鹏任绪义郭婷婷冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 上海水产大学生命科学与技术学院上海200090

背景与目的深入探讨睾丸镉毒性机制。材料与方法应用cDNA微阵列分析和实时定量PCR技术对低剂量镉处理后大鼠睾丸组织基因表达情况进行分析。结果UDP-葡萄糖醛酸转移酶、血红素加氧酶、错配修复蛋白、T-激肽原和cal megin等基因与镉毒性... 详细信息

背景与目的深入探讨睾丸镉毒性机制。材料与方法应用cDNA微阵列分析和实时定量PCR技术对低剂量镉处理后大鼠睾丸组织基因表达情况进行分析。结果UDP-葡萄糖醛酸转移酶、血红素加氧酶、错配修复蛋白、T-激肽原和cal megin等基因与镉毒性相关,但作为产能的细胞器,线粒体呼吸链并未受到低剂量镉影响。另显示维生素C对镉毒性有明显的缓解作用。结论镉诱导毒性和致癌作用的影响可能涉及能量代谢、防御保护、DNA修复多个方面;维生素C能够明显降低镉对大鼠睾丸的毒性作用。

关键词：大鼠毒理学芯片定量RT-PCR 线粒体维生素C

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玄参中苯丙素苷Acteoside对小鼠高尿酸血症的影响

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解放军药学学报 2006年第1期22卷 30-32页

作者：尚雁君李医明蒋山好朱大元魏善建焦炳华黄才国中国人民解放军第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433 中科院上海药物研究所上海201203 不详

目的探讨玄参中苯丙素苷Acteoside对小鼠高尿酸血症的影响及可能的作用机理。方法从玄参根中分离提取苯丙素苷成分Acteoside,采用次黄嘌呤造成小鼠高尿酸血症,观察Acteoside对小鼠高尿酸血症的影响,并进一步从体外观察Acteoside对黄嘌... 详细信息

目的探讨玄参中苯丙素苷Acteoside对小鼠高尿酸血症的影响及可能的作用机理。方法从玄参根中分离提取苯丙素苷成分Acteoside,采用次黄嘌呤造成小鼠高尿酸血症,观察Acteoside对小鼠高尿酸血症的影响,并进一步从体外观察Acteoside对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。结果Acteoside能显著降低高尿酸血症小鼠体内的尿酸水平,体外实验显示其对黄嘌呤氧化酶有明显的抑制作用,IC50为12.25μgml-1。结论玄参中Acteoside在小鼠高尿酸血症中的降尿酸作用可能与其抑制黄嘌呤氧化酶作用有关。

关键词：玄参 Acteoside 黄嘌呤氧化酶高尿酸血症

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hVEGF_(165)和嵌合水蛭肽融合基因的构建、表达和活性检测

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生物化学与生物物理进展 2005年第11期32卷 1061-1068页

作者：沈雳陈少萍秦永文蔡在龙第二军医大学长海医院心内科上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

根据抗PTCA或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点,用基因重组技术构建了hVEGF165和嵌合水蛭肽(fusedhirudin,FH)融合基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,通过脂质体介导将pcDNA3.0/hVEGF165-FH转染到人内皮细胞株(ECV304)中,... 详细信息

根据抗PTCA或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点,用基因重组技术构建了hVEGF165和嵌合水蛭肽(fusedhirudin,FH)融合基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,通过脂质体介导将pcDNA3.0/hVEGF165-FH转染到人内皮细胞株(ECV304)中,RT-PCR及蛋白质印迹证明融合基因hVEGF165-FH在ECV304细胞中得到表达(分子质量为24ku左右).通过体外活性检测——MTT法检测hVEGF165-FH对ECV304细胞增殖的影响,通过体外血管生成分析hVEGF165-FH对内皮细胞株ECV304增殖的影响.通过体外抗栓活性检测,表明表达产物具有促进内皮细胞株增殖及加快血管生成的作用,同时显著抑制了ADP诱导的血小板聚集率(P<0.05)并显著延长APTT和TT(P<0.05).实验结果表明,融合基因在内皮细胞株中得到表达,表达的融合蛋白具有hVEGF165和嵌合水蛭肽(FH)的双重活性,这为以后的融合基因治疗再狭窄的动物实验打下了良好基础.

关键词：血管内皮生长凼子水蛭肽融合基因 pcDNA3.0 载体构建基因表达

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血管形成抑制因子tumstatin_(45-132)的基因克隆、表达和生物学活性

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 141-143页

作者：罗以勤王梁华球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

　目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产... 详细信息

　目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产物克隆到pBV220载体中, 测序证实后, 转化***21, 于 42℃进行热诱导表达。用SDS -PAGE分析表达产物, 对重组蛋白纯化后用内皮细胞增殖试验测定其生物学活性。结果: RT- PCR扩增出tumstatin全长编码基因, 以PCR扩增出tumstatin45-132的编码基因, 经序列分析证实与GenBank中的序列完全一致。以含有tumstatin45-132编码基因的表达载体转化***21后, 可表达出相对分子质量(Mr)为 9 600的重组蛋白。表达产物的蛋白量占菌体蛋白量的 10%, 纯化后能抑制内皮细胞的增殖。结论: 成功克隆全长tumstatincDNA, 并在大肠杆菌中表达重组tumstatin45-132蛋白, 证实其具有抑制内皮细胞增殖的活性。

关键词： tumstatin45-132基因表达生物学活性

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大鼠肝再生时肝PBR、Bcl-2、Bax基因mRNA的表达

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 931-936页

作者：黄鹤任绪义缪明永周运恒王洁王学敏焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:探讨肝细胞线粒体通透性转换(permeabilitytransition,PT)的主要调节蛋白外周型苯二氮类受体(PBR)、Bcl2家族成员Bcl2、Bax在肝再生过程中的表达情况,探讨上述基因表达与线粒体PT的关系。方法:健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:... 详细信息

目的:探讨肝细胞线粒体通透性转换(permeabilitytransition,PT)的主要调节蛋白外周型苯二氮类受体(PBR)、Bcl2家族成员Bcl2、Bax在肝再生过程中的表达情况,探讨上述基因表达与线粒体PT的关系。方法:健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:肝切除组,切除肝左叶和中叶部分约全肝的70%;假处理组,同样麻醉和开腹,但不切肝;正常组。手术后3、6、12、24、48、72、120和168h分别以半定量RTPCR法检测PBR、Bcl2、Bax在肝再生过程中mRNA表达的动态变化。结果:肝再生过程中PBR基因表达降低,但与假处理组无显著差异;Bcl2在肝切除后3h和120h表达显著高于对应的假处理组和正常组(P<0.05);BaxmRNA表达低于正常组和假处理组,其中在肝切除后12h和72h时显著低于相应的假处理组(P<0.05)。结论:PBR、Bax、Bcl2在肝再生过程中表达变化可能与线粒体PT时相变化有关。

关键词：肝再生线粒体通透性转换外周型苯二氮Zhuo类受体 Bcl-2 Bax 基因表达

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东海贻贝抗菌肽Myticin A基因的克隆表达及其生物学活性

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 65-68页

作者：仲燕刘军华张建鹏冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室上海200433

目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性。方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段。PCR产物与pMD18 T连接,得到阳性重组载体pMD18 Myticin A。Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重... 详细信息

目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性。方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段。PCR产物与pMD18 T连接,得到阳性重组载体pMD18 Myticin A。Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重组载体pPIC9K Myticin A转化至宿主菌中。得到高抗性阳性菌株并进行诱导表达。发酵上清进行Tricine SDS PAGE分析并用CM sepharose柱和Sephadex G 25柱纯化,Western印迹法鉴定并检测生物学活性。结果:获得重组载体pPIC9K Myticin A。高抗性多拷贝阳性表达菌株GS115/pPIC9K Myticin A经甲醇诱导后,Tricine SDS PAGE证实其相对分子质量为4 500,表达量为14%以上,纯化后纯度达到90%以上。Western印迹法证实所表达样品为Myticin A。表达样品对巨大芽胞杆菌的生长有抑制作用,对小鼠成纤维细胞(L929)、胰腺癌细胞(SW1990)、结肠腺癌细胞(LoVo)的生长均有明显抑制作用。结论:应用毕赤酵母表达系统能较好地表达抗菌肽Myticin A,生物学活性研究证实其具有抗革兰阳性菌作用,明显抑制肿瘤细胞生长。

关键词：抗菌肽 Myticin A 贻贝重组质粒毕赤酵母基因表达

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抗肿瘤小分子多肽的来源及抗肿瘤机制

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生命的化学 2005年第2期25卷 140-142页

作者：马丽蔡在龙毛积芳第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

小分子多肽广泛存在于自然界,并可通过人工方法合成。目前对具抗肿瘤活性小分子多肽的研究日渐深入,它们可针对肿瘤发生发展的机制,特异性杀伤肿瘤细胞,由于具有分子小、活性高、毒性低的特点,在肿瘤的临床治疗上有重要的价值。

关键词：小分子多肽抗肿瘤新生血管抑制因子多药物抗性

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人肿瘤抑素(Tumstatin)在***中的克隆、表达及活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第3期21卷 304-308页

作者：罗以勤王梁华球谊焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

从人胚肾2 93细胞中扩增肿瘤抑素(tumstatin)基因,进行原核表达,纯化和生物活性检测.利用原核表达载体pMAL c2在大肠杆菌BL2 1中表达肿瘤抑素,经AmyloseResin亲和层析柱和QSepharoseFastFlow柱纯化,通过体外内皮细胞增殖、内皮细胞凋亡... 详细信息

从人胚肾2 93细胞中扩增肿瘤抑素(tumstatin)基因,进行原核表达,纯化和生物活性检测.利用原核表达载体pMAL c2在大肠杆菌BL2 1中表达肿瘤抑素,经AmyloseResin亲和层析柱和QSepharoseFastFlow柱纯化,通过体外内皮细胞增殖、内皮细胞凋亡和鸡尿囊绒膜新生血管生成试验检测其抑制活性.MBP tumstatin在BL2 1中表达率约2 0 % ,肿瘤抑素纯度可达95 % .肿瘤抑素可明显抑制内皮细胞增殖(IC50 约为15 μg ml)、诱导内皮细胞凋亡和抑制鸡尿囊绒膜新生血管生成.研究结果表明,肿瘤抑素对内皮细胞具有明显的抑制作用,提示其在肿瘤治疗中有潜在的应用前景.

关键词：肿瘤抑素,重组表达,血管抑制,生物学活性

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厚壳贻贝多糖的提取和免疫学活性研究

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 896-899页

作者：姚滢魏江洲王俊张建鹏刘军华冯伟华焦炳华第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的:深入研究海洋生物多糖的药用价值,对厚壳贻贝多糖进行提取分离和免疫学活性的研究。方法:通过热碱法提取厚壳贻贝多糖粗品,用双蒸水配成三种浓度的厚壳贻贝多糖溶液,然后对其进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、NK... 详细信息

目的:深入研究海洋生物多糖的药用价值,对厚壳贻贝多糖进行提取分离和免疫学活性的研究。方法:通过热碱法提取厚壳贻贝多糖粗品,用双蒸水配成三种浓度的厚壳贻贝多糖溶液,然后对其进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、NK细胞活性测定、抗体生成细胞的检测、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞等实验,并用MTT法对荷瘤小鼠进行了脾淋巴细胞增殖活力测定。结果:成功获得厚壳贻贝多糖粗品,呈白色粉末状;各项免疫学活性测定结果表明厚壳贻贝多糖粗品溶液能有效地增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率,增强小鼠迟发型变态反应、NK细胞活性、抗体形成细胞活性、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率(P<0.01),且随多糖溶液浓度增高而增强(各浓度组间相比P<0.01);厚壳贻贝粗品溶液还能非常显著地提高荷瘤小鼠的脾脏细胞的增殖能力(P<0.01)。结论:厚壳贻贝多糖能从细胞免疫功能、体液免疫功能、单核巨噬细胞功能及NK细胞活性方面促进正常小鼠的免疫活性作用,并具有明显的抗肿瘤作用。

关键词：厚壳贻贝多糖分离和提纯免疫活性

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