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全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议

作者：冯子晋张建鹏刘小宇卢小玲焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

本实验对北沙参的薄层色谱、指纹图谱、药效学成分的含量测定进行了研究,为《中国药典》中北沙参质量标准的增补修订提供依据。方法:薄层色谱以北沙参对照药材为依据,对供试品溶液制备、薄层板选择等七个方面进行考察,确立北沙参对照药... 详细信息

本实验对北沙参的薄层色谱、指纹图谱、药效学成分的含量测定进行了研究,为《中国药典》中北沙参质量标准的增补修订提供依据。方法:薄层色谱以北沙参对照药材为依据,对供试品溶液制备、薄层板选择等七个方面进行考察,确立北沙参对照药材的薄层色谱方法;指纹图谱采用HPLC-DAD检测方法,利用国家药典委员会提供的相似度评价软件对不同处理方式,不同产地的北沙参药材的指纹图谱进行了分析;采用多组分定量的方法对四种香豆素、三种聚炔类的药效学成分进行含量测定,并对不同产地,不同处理方式的北沙参药材的药效学成分进行了比较研究。结果:建立了北沙参对照药材的薄层色谱方法。建立了北沙参药材的指纹图谱,分析了三个主产区北沙参指纹图谱,得出不同产区的北沙参药材所含化学成分的指纹图有明显差异;分析了不同处理方式的北沙参指纹图谱的区别,发现北沙参经去皮处理后其主成分组成发生了变化;测定了北沙参7个药效学组分的含量。结论:拟定了北沙参质量标准草案,为2015版《中国药典》一部北沙参质量标准的增补修订提供科学依据。

关键词：北沙参薄层色谱指纹图谱含量测定

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海胆壳多糖的提取及PMP柱前衍生化高效液相分析

海胆壳多糖的提取及PMP柱前衍生化高效液相分析

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全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议

作者：商晓慧曲晨龙张建鹏卢小玲刘小宇焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

目的:本实验通过对各种属海胆壳多糖提取工艺及柱前衍生化条件的摸索,建立了壳多糖水解液特征图谱,为建立海胆质量标准提供支持。方法:利用水提醇沉的方法,加入15倍的水、70℃提取1h、提取3次,加入5倍的95%乙醇沉淀,离心得粗多糖。设计... 详细信息

目的:本实验通过对各种属海胆壳多糖提取工艺及柱前衍生化条件的摸索,建立了壳多糖水解液特征图谱,为建立海胆质量标准提供支持。方法:利用水提醇沉的方法,加入15倍的水、70℃提取1h、提取3次,加入5倍的95%乙醇沉淀,离心得粗多糖。设计两次单因素实验,分别对壳多糖水解和柱前衍生化条件进行了摸索,50 mg多糖在1 ml TFA溶液中水解6 h时达到完全;取100μL多糖水解液置于1.5 mL EP管中,加入50μL NaOH,并加入40μL PMP溶液,70℃反应30 min。至室温,加入50μL HCl中和,摇匀后加入200μL氯仿混匀萃取,离心,除有机相。重复3次,经0.22μm滤膜过滤于HPLC分析。结果:HPLC分析3个种属的多糖水解液在单糖的组成种类上差别不显著,但在各组成单糖的含量上区分较为明显。光棘球海胆壳的单糖以甘露糖,半乳糖和岩藻糖为主;海刺猬壳的单糖以半乳糖为主;紫海胆壳的单糖以甘露糖,核糖,葡萄糖和岩藻糖为主。结论:本次实验首次建立了14批不同产地3个种属的海胆壳多糖水解液的特征图谱,可为鉴别不同种属的海胆提供有力依据。

关键词：光棘球海胆海刺猬紫海胆多糖水解柱前衍生化

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北极小山珊瑚属真菌D-10次级代谢产物的化学成分研究

北极小山珊瑚属真菌D-10次级代谢产物的化学成分研究

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全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议

作者：刘靖堂闫凝星卢小玲刘小宇第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

目的:对一株北极小山珊瑚属真菌D-10进行次级代谢产物的化学成分研究。方法:将菌株D-10按照优化的发酵条件大批量分批发酵50 L,发酵液用纱布过滤后,滤液用等体积乙酸乙酯萃取,得到发酵液浸膏。采用LH-20凝胶柱层析、ODS反相柱层析和硅... 详细信息

目的:对一株北极小山珊瑚属真菌D-10进行次级代谢产物的化学成分研究。方法:将菌株D-10按照优化的发酵条件大批量分批发酵50 L,发酵液用纱布过滤后,滤液用等体积乙酸乙酯萃取,得到发酵液浸膏。采用LH-20凝胶柱层析、ODS反相柱层析和硅胶柱层析等多种现代色谱手段系统分离了该菌株次级代谢产物的化学成分,并运用现代波谱技术手段(ESI-MS,H-NMR,C-NMR,COSY,HMBC,HSQC等)鉴定所分离纯化的单体化合物结构。结果:共得到菌株D-10发酵液的乙酸乙酯萃取浸膏6.2g,从中分离纯化了十余个单体化合物,共鉴定了八个已知化合物的结构,分别为:5-羟甲基-2-呋喃醛,8-methoxy-3,5-dimethylisochroman-6-ol,dehydroabietic acid,（9E,12E）-octadeca-9,12-dienoic acid,环（苯丙氨酸-丙氨酸）,环（苯丙氨酸-酪氨酸）,环（苯丙氨酸-缬氨酸）和环（丙氨酸-亮氨酸）。本研究是首次对小山珊瑚属真菌次生代谢产物的报道,以上化合物均为首次从小山珊瑚属真菌的次级代谢产物中分离发现。

关键词：极地微生物小山珊瑚属真菌次级代谢产物结构鉴定

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GLUT4在胰岛素调控葡萄糖转运中作用

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生命的化学 2014年第2期34卷 285-290页

作者：唐海双王清松焦炳华杨生生第二军医大学临床医学4队上海200433 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

机体的血糖平衡调节主要依赖于胰岛素,其中一个重要的机制是胰岛素通过调控GLUT4的囊泡运转来调节脂肪细胞和肌细胞对葡萄糖的摄取。由胰岛素受体介导的一系列磷酸化过程能调节一些关键的GLUT4转运相关蛋白质的活性,这些蛋白质包括小GT... 详细信息

机体的血糖平衡调节主要依赖于胰岛素,其中一个重要的机制是胰岛素通过调控GLUT4的囊泡运转来调节脂肪细胞和肌细胞对葡萄糖的摄取。由胰岛素受体介导的一系列磷酸化过程能调节一些关键的GLUT4转运相关蛋白质的活性,这些蛋白质包括小GTP酶、拴系复合体和囊泡融合体。而这些蛋白质又反过来通过内膜系统调节GLUT4储存囊泡的生成、滞留,并调控这些囊泡的靶向出胞方式。了解这些过程有助于解释2型糖尿病中胰岛素耐受的机制,并可能为糖尿病提供新的靶向治疗方法。

关键词：胰岛素葡萄糖 GLUT4

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北沙参多糖的含量测定研究

北沙参多糖的含量测定研究

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2014年中国药学大会暨中国药师周

作者：商晓慧曲晨龙冯子晋卢小玲刘小宇焦炳华第二军医大学基础班生物化学与分子生物学教研室

目的建立北沙参多糖提取工艺及检测不同批次药材中多糖的含量的方法。方法水提醇沉提取多糖,蒽酮硫酸法检测北沙参多糖含量。结果不同产地多糖的含量范围在217.226～852.146 mg.g-1,其中河北安国的北沙参样品多糖含量较高。结论不同产... 详细信息

目的建立北沙参多糖提取工艺及检测不同批次药材中多糖的含量的方法。方法水提醇沉提取多糖,蒽酮硫酸法检测北沙参多糖含量。结果不同产地多糖的含量范围在217.226～852.146 mg.g-1,其中河北安国的北沙参样品多糖含量较高。结论不同产地的北沙参多糖的含量有一定的差异。

关键词：北沙参多糖蒽酮硫酸含量测定

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北沙参多糖的含量测定研究

北沙参多糖的含量测定研究

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2014年中国药学大会暨第十四届中国药师周

作者：商晓慧曲晨龙冯子晋卢小玲刘小宇焦炳华第二军医大学基础班生物化学与分子生物学教研室

目的：建立北沙参多糖提取工艺及检测不同批次药材中多糖的含量的方法.方法：水提醇沉提取多糖,蒽酮硫酸法检测北沙参多糖含量.结果：不同产地多糖的含量范围在217.226～852.146mg.g-1,其中河北安国的北沙参样品多糖含量较高.结论：不... 详细信息

目的：建立北沙参多糖提取工艺及检测不同批次药材中多糖的含量的方法.方法：水提醇沉提取多糖,蒽酮硫酸法检测北沙参多糖含量.结果：不同产地多糖的含量范围在217.226～852.146mg.g-1,其中河北安国的北沙参样品多糖含量较高.结论：不同产地的北沙参多糖的含量有一定的差异.

关键词：北沙参多糖含量蒽酮硫酸法区域差异

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植物多糖抗衰老作用的研究进展

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生物技术通讯 2014年第4期25卷 588-590页

作者：毛宇奇张建鹏第二军医大学基础医学部生物技术队 2010级上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰老... 详细信息

植物中存在许多天然活性多糖。由于生长环境不同,不同植物的多糖在结构和组成上有明显差异,但不同来源的植物多糖却具有相似的生物学活性,比如调节机体免疫功能、抑制肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化等。植物多糖抗衰老机制已成为植物多糖生物学活性研究中的热点之一。我们简要综述了国内外植物多糖抗衰老作用的研究进展。

关键词：植物多糖抗衰老自由基超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶端粒酶

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TNF-α与IL-1β对胃癌腹膜间皮细胞黏附分子mRNA表达的影响

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胃肠病学和肝病学杂志 2014年第3期23卷 252-255页

作者：梁翙丁健民刘小宇中国人民解放军第455医院普通外科上海200052 上海第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

目的探讨TNF-α与IL-1β对胃癌腹膜间皮细胞黏附分子mRNA表达的影响。方法以体外原代培养腹膜间皮细胞作为研究对象,分为对照组与处理组。处理组经不同浓度TNF-α与IL-1β处理后与胃癌细胞共培养,对照组中则以PBS代替TNF-α或IL-1β。... 详细信息

目的探讨TNF-α与IL-1β对胃癌腹膜间皮细胞黏附分子mRNA表达的影响。方法以体外原代培养腹膜间皮细胞作为研究对象,分为对照组与处理组。处理组经不同浓度TNF-α与IL-1β处理后与胃癌细胞共培养,对照组中则以PBS代替TNF-α或IL-1β。经流式细胞仪检测细胞间黏附率,采用Real-time法检测腹膜间皮细胞中CD44、ICAM-1、VCAM-1 mRNA及胃腺癌细胞株中ICAM-1配体的表达情况。结果随着TNF-α与IL-1β处理浓度的不断增加,人腹膜间皮细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1及CD44 mRNA表达水平逐渐升高,各炎症因子处理组与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);人胃腺癌细胞株AGS、SGC-7901、MKN-45中的黏附分子LFA-1、CD44与VLA-4 mRNA均呈阳性表达。结论炎症因子TNF-α与IL-1β通过提高人腹膜间皮细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1及CD44 mRNA的表达水平促进胃癌细胞与腹膜间皮细胞之间相互黏附,在胃癌细胞腹腔种植转移中发挥促进作用。

关键词：胃癌间皮细胞黏附分子炎症因子

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北沙参中挥发油成分的鉴定

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第二军医大学学报 2013年第11期34卷 1271-1275页

作者：张艺馨卢小玲刘小宇第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础部生物技术队上海200433

目的对北沙参药材中的挥发油成分进行鉴别,并对比不同产地北沙参药材中的挥发油成分及含量的不同。方法自2012年9月至2013年3月收集不同产地的北沙参药材共16批,然后进行研磨打粉。对北沙参粉末样品参照《中华人民共和国药典》附录方法... 详细信息

目的对北沙参药材中的挥发油成分进行鉴别,并对比不同产地北沙参药材中的挥发油成分及含量的不同。方法自2012年9月至2013年3月收集不同产地的北沙参药材共16批,然后进行研磨打粉。对北沙参粉末样品参照《中华人民共和国药典》附录方法提取挥发油。将挥发油样品进行气相色谱-质谱法(GC-MS)检测,对所得的质谱结果利用NIST 11.0数据库进行比对。结果和结论从16个批次共48个北沙参挥发油样品中获得12个共有组分,都可作为北沙参挥发油的指标性成分,其中以法卡林醇为其挥发油中的主要成分。产于河北的3批样品中的挥发油成分及含量均较少。去皮加工的北沙参样品中挥发油总体含量比不去皮加工的北沙参少,并且发现二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)仅存在于有皮的样品中。去皮加工方式会使一些有效成分的含量降低,如EPA,可能会影响北沙参的药用活性。

关键词：北沙参挥发油气相色谱-质谱法鉴定法卡林醇

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ER_α通路代偿性激活在乳腺癌细胞的拉帕替尼获得性耐药中的作用

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第二军医大学学报 2013年第6期34卷 616-622页

作者：李喆常涛石林祥房林杨生生方国恩同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科上海200072 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院普通外科上海200433

目的了解雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)通路代偿性激活在乳腺癌细胞BT474的拉帕替尼获得性耐药发生过程中的作用和可能机制。方法利用real-time PCR和蛋白质印迹检测BT474被拉帕替尼作用后人表皮生长因子受体2(HER2)通路和ER... 详细信息

目的了解雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)通路代偿性激活在乳腺癌细胞BT474的拉帕替尼获得性耐药发生过程中的作用和可能机制。方法利用real-time PCR和蛋白质印迹检测BT474被拉帕替尼作用后人表皮生长因子受体2(HER2)通路和ERα通路活性的改变;利用拉帕替尼浓度递增、持续培养的方法建立乳腺癌细胞BT474的拉帕替尼获得性耐药细胞(rBT474)模型;采用流式细胞术检测拉帕替尼对rBT474细胞凋亡的影响,进一步以蛋白质印迹法分析BT474和rBT474在HER2通路和ER通路上的差别;应用MTT法检测rBT474在拉帕替尼和氟维司群作用下的生长情况;利用克隆形成实验观察双靶点治疗对预防拉帕替尼获得性耐药的可能性。结果 Real-time PCR和蛋白质印迹检测显示拉帕替尼抑制BT474细胞HER2磷酸化,同时诱导叉头蛋白3A(FOXO3a)和孕激素受体(PR)的表达升高;成功获得的耐药细胞株rBT474在含有5μmol/L拉帕替尼的培养液中仍可持续生长;蛋白质印迹结果显示,rBT474细胞与BT474细胞相比,其磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路受抑制,而促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)通路激活,ER通路的活化更加明显;MTT法检测结果显示,与单用拉帕替尼相比,联合使用拉帕替尼和氟维司群可抑制rBT474细胞活力(P<0.01);克隆形成实验结果表明,与二甲亚砜组、拉帕替尼组和氟维司群组相比,拉帕替尼和氟维司群联合用药组可抑制BT474细胞克隆形成(P<0.01),具有预防获得性耐药发生的可能。结论 ERα通路的代偿性激活可能是导致HER2(+)/ERα(+)的乳腺癌细胞对拉帕替尼产生获得性耐药的机制之一,而PI3K/AKT抑制和MAPK激活可能是ERα代偿激活的主要原因。

关键词：拉帕替尼乳腺肿瘤肿瘤抗药性雌激素受体α erbB-2受体

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