检索结果-内蒙古大学图书馆

生命的化学 2013年第4期33卷 381-388页

作者：周建生杨生生缪明永焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

DNA甲基化是真核细胞基因组中常见的可遗传的表观遗传修饰,在调节细胞增殖、分化、个体发育等方面起重要作用,并且DNA甲基化水平异常与肿瘤的发生发展密切相关。DNA甲基化及被动去甲基化主要是在DNA甲基转移酶家族参与下完成的,而DNA的... 详细信息

DNA甲基化是真核细胞基因组中常见的可遗传的表观遗传修饰,在调节细胞增殖、分化、个体发育等方面起重要作用,并且DNA甲基化水平异常与肿瘤的发生发展密切相关。DNA甲基化及被动去甲基化主要是在DNA甲基转移酶家族参与下完成的,而DNA的主动去甲基化机制尚不是很明确。在肿瘤细胞中DNA的整体甲基化水平显著降低,但抑癌基因的启动子区域却出现高甲基化。目前尽管有DNA去甲基化药物用于癌症的临床治疗,但药物特异性较差,因而研究特定基因的主动去甲基化机制有助于研发特异性高的药物用于癌症的治疗。

关键词： DNA甲基化 DNA去甲基化癌症表观遗传治疗

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医学院校本科生“创新能力培养计划”实践

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中华医学教育探索杂志 2013年第7期12卷 687-689页

作者：孙铭娟王梁华钟山焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

第二军医大学自2009年开始实施以本科生创新能力培养为目的的“校级大学生创新能力培养计划”。通过使本科生参与科研课题的设计与实验操作，撰写科技论文和进行学术交流等形式，提高了学生的创新思维，增强了实践能力和协作精神，实现... 详细信息

第二军医大学自2009年开始实施以本科生创新能力培养为目的的“校级大学生创新能力培养计划”。通过使本科生参与科研课题的设计与实验操作，撰写科技论文和进行学术交流等形式，提高了学生的创新思维，增强了实践能力和协作精神，实现了研究与教学的统一。

关键词：医学本科生创新能力培养计划

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医学院校大学生创新课题的实践与效果评价

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中国医药科学 2013年第10期3卷 138-139,146页

作者：孙铭娟王梁华焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

大学生创新能力培养计划是促进学生创新型思维,培养创新医学专业高等人才的重要举措。学校自2009年开始实施以来,取得了丰硕的科研成果,促进了学生理论与实践相结合的学习能力,同时也存在一些问题,在今后的实施过程中将进一步深入完善。

关键词：医学大学生创新课题实践评价

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深化实验教学改革培养学生创新能力

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西北医学教育 2013年第4期21卷 756-758页

作者：张艺馨刘小宇卢小玲焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学基础部生物技术队上海200433

在本科生的教学实践中,学生创新能力的培养越来越受到众多高校的重视。实验课更是培养动手能力和创新能力的主战场。但目前的实验课授课方式却严重阻碍了这种能力的培养。在本学期的《生物制药设备与分离纯化技术》课程改革中,尝试了由... 详细信息

在本科生的教学实践中,学生创新能力的培养越来越受到众多高校的重视。实验课更是培养动手能力和创新能力的主战场。但目前的实验课授课方式却严重阻碍了这种能力的培养。在本学期的《生物制药设备与分离纯化技术》课程改革中,尝试了由有一定经验的学生做实验带教教师的方式。实践表明,这种授课方式的改革不仅锻炼了学生的综合素质,更重要的是这种方式激发了学生发现问题、解决问题的能力,能更有效地调动学生的参与度,培养创新能力,值得推广。

关键词：实验改革角色转换培养能力

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核酸适配体研究进展

核酸适配体研究进展

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第18次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：刘德婧郑欣胡波王梁华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

上世纪90年代发现适配体,是一种短RNA,可折叠为三维结构,并可与不同的非核酸靶物质特异性地结合.在随机合成的单链寡核苷酸库中,通过与靶分子不断地重复孵育,分离,PCR或RT-PCR扩增,可得到一定量的适配体,即SELEX技术.许多科学家通过该... 详细信息

上世纪90年代发现适配体,是一种短RNA,可折叠为三维结构,并可与不同的非核酸靶物质特异性地结合.在随机合成的单链寡核苷酸库中,通过与靶分子不断地重复孵育,分离,PCR或RT-PCR扩增,可得到一定量的适配体,即SELEX技术.许多科学家通过该方法陆续发现许多种适配体,它们可与离子、小分子代谢产物、蛋白质、糖环、脂质甚至整个细胞相结合.适配体具有高度选择结合物质的能力，有潜力成为纳米生物技术中的优质工具，可与抗体相比肩。适配体应用在检验方面，可以满足高敏感性，及时性，低成本，高特异性，可重复性，无副反应等各项要求。适配体在治疗方面应用广泛，既可用来抑制靶分子，也可作为受体激动剂。

关键词：短核糖核酸适配体实验技术医学诊断临床治疗

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以葡萄糖代谢为中心开展物质代谢教学体会

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基础医学教育 2013年第7期15卷 671-673页

作者：缪明永杨生生陈欢高云张建鹏第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

物质代谢是生物化学理论体系中的重要内容,其丰富知识和复杂的代谢网络使物质代谢教与学成为了教师和学生的难点。由于葡萄糖代谢是物质代谢网络的中心,而血糖平衡又是物质代谢调节的中心,同时葡萄糖代谢紊乱是许多疾病的基础。因此,葡... 详细信息

物质代谢是生物化学理论体系中的重要内容,其丰富知识和复杂的代谢网络使物质代谢教与学成为了教师和学生的难点。由于葡萄糖代谢是物质代谢网络的中心,而血糖平衡又是物质代谢调节的中心,同时葡萄糖代谢紊乱是许多疾病的基础。因此,葡萄糖代谢就是整个物质代谢的"纲",紧紧围绕葡萄糖代谢来展开物质代谢理论知识的教学,就能纲举目张地统领整个物质代谢这张大网,从而取得良好的教学效果。

关键词：物质代谢葡萄糖代谢教学方法

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ANGPTL1在肿瘤细胞转移中的作用初探

ANGPTL1在肿瘤细胞转移中的作用初探

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第18次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：孙铭娟胡燃许小泉王梁华焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海 200433

ANGPTL1基因是ANGPTLs(血管生成素相关蛋白)家族的一个成员,它对血管发生、内皮细胞的保护及胚胎器官发生等方面有重要作用.为探究血管生成素相关蛋白1(ANGPTL1)在肿瘤转移进程中的作用机制,从人肝cDNA文库中经PCR扩增出ANGPLT1基因及其... 详细信息

ANGPTL1基因是ANGPTLs(血管生成素相关蛋白)家族的一个成员,它对血管发生、内皮细胞的保护及胚胎器官发生等方面有重要作用.为探究血管生成素相关蛋白1(ANGPTL1)在肿瘤转移进程中的作用机制,从人肝cDNA文库中经PCR扩增出ANGPLT1基因及其C端FD domain,经纯化、回收目的片段,将其插入克隆载体pcDNA3.1/His-Myc(-)B,构建ANGPTL1的过表达载体,转染肿瘤细胞,筛选阳性克隆,通过细胞划痕实验,粘附实验检测ANGPTL1对肿瘤细胞迁移能力的影响.进而通过pull down,CoIP结合质谱技术,以及激光共聚焦发现并验证ANGPTL1相互作用蛋白.在ANGPLT1过表达的肿瘤细胞株中，细胞的迁移能力减弱，粘附能力增强，提示ANGPLT1在介导细胞迁移和运动性中发挥重要作用。通过pull down寻找到与ANGPLT1相互作用蛋白MACF1(微管微丝交联因子)，并通过免疫共沉淀结合质谱鉴定以及免疫荧光共聚焦技术验证了ANGPLT1与MACF1间的相互作用。进一步机制研究将深入探讨ANGPTL1与MACF1相互作用可能在Wnt通路传递以及肿瘤EMT进程中的重要作用。

关键词：血管生成素1 肿瘤细胞转移蛋白相互作用微管微丝交联因子

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FasL基因修饰的DC对人NSCLC血管内皮细胞凋亡的影响

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安徽医科大学学报 2013年第4期48卷 357-360页

作者：周俊平李敏玉楼国良孙铭娟安徽医科大学解放军临床学院肿瘤中心合肥230031 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院特诊科上海200433 中国人民解放军第二军医大学生物化学和分子生物学教研室上海200433

目的探讨FasL基因修饰的树突状细胞(DC)对人非小细胞肺癌血管内皮细胞(NSCLC-VECs)凋亡的影响。方法用携带有FasL基因的重组腺病毒转染人外周血来源的DC;从NSCLC患者手术切除标本中原代培养NSCLC-VECs;采用免疫荧光法检测NSCLC-VECs胞膜... 详细信息

目的探讨FasL基因修饰的树突状细胞(DC)对人非小细胞肺癌血管内皮细胞(NSCLC-VECs)凋亡的影响。方法用携带有FasL基因的重组腺病毒转染人外周血来源的DC;从NSCLC患者手术切除标本中原代培养NSCLC-VECs;采用免疫荧光法检测NSCLC-VECs胞膜上Fas的表达;FasL-DC与NSCLC-VECs共培养,流式细胞术(FACS)检测FasL-DC对NSCLC-VECs凋亡的影响。结果人外周血来源的DC成功转染FasL基因;倒置荧光显微镜观察显示NSCLC-VECs胞膜上表达Fas;FACS结果显示FasL-DC处理后的NSCLC-VECs凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论转染FasL基因的DC可诱导NSCLC-VECs凋亡,为基因治疗NSCLC提供实验依据。

关键词： FasL 树突状细胞非小细胞肺癌血管内皮细胞基因治疗

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B细胞淋巴瘤因子6高表达对大鼠肝细胞凋亡的抑制作用

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第二军医大学学报 2012年第4期33卷 349-354页

作者：潘传涌杨生生傅海龙缪明永焦炳华第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 第二军医大学长征医院麻醉科上海200003

目的克隆大鼠B细胞淋巴瘤因子6(B-cell lymphoma 6,Bcl6)基因,构建绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Bcl6,初步探讨大鼠Bcl6转录因子在大鼠肝细胞中的生物学作用。方法首先提取大鼠肝脏总RNA,经反转录和巢式PCR扩增Bcl6编码区的CDS序列后... 详细信息

目的克隆大鼠B细胞淋巴瘤因子6(B-cell lymphoma 6,Bcl6)基因,构建绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Bcl6,初步探讨大鼠Bcl6转录因子在大鼠肝细胞中的生物学作用。方法首先提取大鼠肝脏总RNA,经反转录和巢式PCR扩增Bcl6编码区的CDS序列后,通过基因重组的方法构建pEGFP-Bcl6重组质粒并鉴定;然后利用脂质体转染法将重组质粒转入大鼠肝细胞BRL-3A中,利用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测其表达;最后应用流式细胞术分析转染融合表达质粒后肝细胞的凋亡,采用MTT法检测肝细胞的增殖情况。结果 PCR法和测序法鉴定重组质粒pEGFP-Bcl6构建成功,实时定量PCR法和蛋白质印迹法鉴定重组质粒瞬时转染成功,流式细胞术证实Bcl6具有抑制肝细胞凋亡的作用,MTT法证实Bcl6具有促进肝细胞增殖的作用。结论成功克隆了大鼠Bcl6基因,构建了Bcl6绿色荧光蛋白表达载体,在大鼠肝细胞中初步证明Bcl6具有促进肝细胞增殖和抑制凋亡的作用。

关键词：肝细胞 Bcl6 细胞增殖细胞凋亡

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海洋亚硫酸杆菌M44的代谢产物研究

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中国抗生素杂志 2012年第4期37卷 254-257页

作者：龙聪刘小宇卢小玲焦炳华长江大学附属第一医院检验科荆州434000 第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的研究一株海洋细菌M44的化学成分。方法采用ODS C18反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及高效液相色谱等分离手段对发酵得到的乙酸乙酯相进行分离、纯化;利用理化性质和波谱学分析对单体化合物进行结构鉴定并用MTT法评价其... 详细信息

目的研究一株海洋细菌M44的化学成分。方法采用ODS C18反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及高效液相色谱等分离手段对发酵得到的乙酸乙酯相进行分离、纯化;利用理化性质和波谱学分析对单体化合物进行结构鉴定并用MTT法评价其体外细胞毒活性。结果从海洋细菌Sulfitobacter sp.(M44)发酵物中分离得到6个环二肽类化合物,分别鉴定为Cyclo-(L-Leu-D-val)(1)、Cyclo-(L-Phe-D-val)(2)、Cyclo-(L-Phe-L-Leu)(3)、Cyclo-(L-Leu-L-Ile)(4)、Cyclo-(D-Phe-L-Ile)(5)、Cyclo-(L-Trp-L-Pro)(6)。体外活性实验表明:化合物2,4对HepG2细胞株均表现出一定的生长抑制活性,其IC50分别为88μg/mL和105μg/mL,其中化合物4还对Hep2细胞株表现出生长抑制活性,其IC50为115μg/mL。结论以上化合物均为首次从该属细菌的代谢产物中分离得到,为进一步开发利用东海微生物资源奠定了一定的基础。

关键词：海洋细菌亚硫酸杆菌次级代谢产物环二肽细胞毒

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