检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2019年第11期35卷 1225-1233页

作者：林张军李倩芮耀诚第二军医大学药学院药理学教研室

Nogo-B在血管损伤、组织修复和炎症反应中发挥重要作用。然而,Nogo-B在动脉粥样硬化中的作用仍不明确。本研究拟在巨噬细胞中探讨Nogo-B对巨噬细胞泡沫化的影响。在RAW264.7细胞中沉默Nogo-B后,采用氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)或DiI修饰的... 详细信息

Nogo-B在血管损伤、组织修复和炎症反应中发挥重要作用。然而,Nogo-B在动脉粥样硬化中的作用仍不明确。本研究拟在巨噬细胞中探讨Nogo-B对巨噬细胞泡沫化的影响。在RAW264.7细胞中沉默Nogo-B后,采用氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)或DiI修饰的Ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化;通过激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞中荧光脂质,并在透射电镜下观察各组细胞中自噬泡;采用Western印迹分析Plin2、p62和LC3-Ⅱ的蛋白质水平;采用实时荧光定量PCR检测p62 mRNA水平;采用氯喹处理以及mRFP-GFP-LC3双荧光体系分析自噬流功能;进一步过表达Nogo-B后,比较巨噬细胞中脂质负荷程度以及Plin2、p62和LC3-Ⅱ的蛋白质水平。结果显示,DiI-Ox-LDL处理后,Nogo-B沉默组细胞中脂质负荷程度高于对照组(2.34±0.67 vs.0.69±0.14,P<0.05);Ox-LDL处理后,Nogo-B沉默组细胞中自噬泡数量(8.67±0.58 vs.4.33±0.58,P<0.01)、Plin2(4.65±0.50 vs.3.24±0.71,P<0.05)、p62(10.13±1.79 vs.5.76±1.84,P<0.05)和LC3-Ⅱ(4.38±0.20 vs.2.33±1.56,P<0.01)的蛋白质水平均显著高于对照组,而p62 mRNA水平无差异(P>0.05);进一步研究发现,Nogo-B沉默组的自噬流被抑制了;过表达Nogo-B后,虽然p62蛋白质水平无明显变化,但是细胞中脂质负荷程度显著低于对照组(1.68±1.06 vs.4.94±0.70,P<0.05),Plin2和LC3-Ⅱ的蛋白质水平也明显降低。上述结果表明,Nogo-B通过促进自噬流抑制了Ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化,Nogo-B可能具有抗动脉粥样硬化的作用。

关键词： Nogo-B 氧化低密度脂蛋白巨噬细胞自噬动脉粥样硬化

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视黄酸诱导的小鼠神经管畸形基因表达趋势分析

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第7期44卷 859-870页

作者：曹睿卫凯鑫张晓娜刘雨榕张丽山西医科大学出生缺陷与细胞再生山西省重点实验室太原030001 山西医科大学转化医学研究中心太原030001 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系太原030001 山西医科大学第一医院肝胆胰外科及肝移植中心太原030001

目的·探究小鼠胚胎在视黄酸(retinoic acid,RA)诱导下产生神经管畸形的分子调控机制,揭示小鼠神经管闭合阶段基因表达规律。方法·基于已获得的小鼠胚胎神经管闭合关键期[胚胎发育第8.5日(embryonic day 8.5,E8.5)、E9.5、E10... 详细信息

目的·探究小鼠胚胎在视黄酸(retinoic acid,RA)诱导下产生神经管畸形的分子调控机制,揭示小鼠神经管闭合阶段基因表达规律。方法·基于已获得的小鼠胚胎神经管闭合关键期[胚胎发育第8.5日(embryonic day 8.5,E8.5)、E9.5、E10.5]高质量脑泡转录组数据,利用短时间序列表达挖掘器(Short Time-series Expression Miner,STEM)软件分别得到RA处理组和正常组在3个时间点的基因表达趋势数据。对处理组与正常组基因表达趋势不一致的基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,并随机筛选候选基因以验证测序数据可靠性。利用RA诱导构建神经管畸形小鼠模型,分为处理组和正常组,每组各9只。处理组和正常组孕鼠在E7.5分别接受28 mg/kg RA和香油灌胃处理,在E8.5、E9.5、E10.5收集胎鼠脑泡组织,对筛选的候选基因进行实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)验证。结果·正常组共检测出18255个基因的表达量数据,处理组共检测出19037个基因的表达量数据;正常组基因可归纳至7个具有显著意义的表达模式中,处理组基因可归纳至6个具有显著意义的表达模式中;正常组和处理组检测到表达的基因数目足够、表达的模式相似,具有可比性。进一步分析发现正常组中呈现上升表达趋势但在处理组中呈现下降表达趋势的基因共有46个,在生物学过程层面富集在器官发育、神经元凋亡的正负调控、少突胶质细胞增殖、成纤维生长因子信号通路等;在细胞组分层面,主要参与组成细胞、神经元的基本结构;在分子功能层面,主要与成纤维细胞生长因子受体结合有关。正常组中呈现下降表达趋势而在处理组中呈现上升表达趋势的61个基因,在生物学过程层面富集在细胞溶解、氨基酸/离子转运等功能上;在细胞组分层面,富集在胞内分子、皮质颗粒、胞外区域、细胞间隙等;在分子功能层面,与一系列酶及转运蛋白的活性有关。RT-qPCR验证结果显示转录组测序数据真实可靠。结论·RA干预使小鼠胚胎发育过程中发生基因表达失调和应激反应,导致胚胎发育异常,机体自我保护相关信号通路激活,维持胚胎正常发育的基因受到抑制。

关键词：视黄酸神经管畸形基因表达趋势分析

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内皮细胞代谢调控在血管性疾病中的研究进展

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心脏杂志 2021年第2期33卷 218-222页

作者：李嘉言田宗渭周栋栋晏贤春孙嘉星空军军医大学西京医院眼科全军眼科研究所陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员二大队陕西西安710032

内皮细胞(endothelial cell,EC)代谢在机体正常发育和疾病发生中发挥着重要作用。与其他类型细胞相比,EC高度依赖糖酵解、脂肪酸氧化和氨基酸代谢等,以使其具备将血液中氧气和营养物质运输至周围组织以及在乏氧无血管区域进行血管生成... 详细信息

内皮细胞(endothelial cell,EC)代谢在机体正常发育和疾病发生中发挥着重要作用。与其他类型细胞相比,EC高度依赖糖酵解、脂肪酸氧化和氨基酸代谢等,以使其具备将血液中氧气和营养物质运输至周围组织以及在乏氧无血管区域进行血管生成的能力。随着研究深入,越来越多代谢途径被发现参与调控EC增殖、迁移和血管生成等过程。异常的内皮细胞代谢导致EC增殖、迁移以及血管生成等能力丧失或增强,进而引发动脉粥样硬化、心肌梗死、肢体缺血等血管性疾病发生,靶向EC代谢方式是血管性疾病的潜在治疗靶点。本文就EC代谢调控在血管性疾病中作用的研究进展进行阐述,以期为血管性疾病的防治提供新思路。

关键词：内皮细胞血管性疾病代谢血管生成糖酵解

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内皮旁分泌因子调控心脏生长的研究进展

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心脏杂志 2021年第3期33卷 307-310,329页

作者：田宗渭周栋栋孙嘉星李嘉言梁亮韩骅晏贤春空军军医大学基础医学院学员二大队陕西西安710032 空军军医大学西京医院眼科全军眼科研究所陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学肿瘤生物学国家重点实验室陕西西安710032

血管生成是维持心脏组织适应性生长、再生的关键因素。内皮细胞(endothelial cell,EC)是血管的主要组成部分,除了形成血管为心脏组织提供氧气和营养物质以外,还可以通过旁分泌多种细胞外因子调控组织稳态、生长和再生等过程。近年来研... 详细信息

血管生成是维持心脏组织适应性生长、再生的关键因素。内皮细胞(endothelial cell,EC)是血管的主要组成部分,除了形成血管为心脏组织提供氧气和营养物质以外,还可以通过旁分泌多种细胞外因子调控组织稳态、生长和再生等过程。近年来研究发现EC可分泌神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG-1)等因子调控心肌细胞肥大、增殖和凋亡等过程,是影响生理病理性心脏生长以及心肌梗死等过程的重要因素。因此,深入了解EC旁分泌因子的类型及其作用机制可为预防和治疗心血管疾病提供新的靶点和策略。

关键词：内皮细胞血管生成旁分泌因子心肌肥大心肌细胞

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CALR在胃癌转移中的作用及机制研究

CALR在胃癌转移中的作用及机制研究

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作者：陈军中国人民解放军陆军军医大学

学位级别：博士

研究背景胃癌(gastric cancer,GC)在恶性肿瘤特别是消化系统肿瘤中是最常见的类型之一,据国家癌症中心发布的最新全国癌症统计数据,胃癌的发病率以及死亡率均高居我国恶性肿瘤前三位。胃癌是一种分子和表型高度异质性的疾病,侵袭、转移... 详细信息

研究背景胃癌(gastric cancer,GC)在恶性肿瘤特别是消化系统肿瘤中是最常见的类型之一,据国家癌症中心发布的最新全国癌症统计数据,胃癌的发病率以及死亡率均高居我国恶性肿瘤前三位。胃癌是一种分子和表型高度异质性的疾病,侵袭、转移能力强,患者平均生存期较短。外科手术是治疗胃癌的主要手段,腹腔转移是影响胃癌患者预后的主要因素。由于胃癌起病较为隐匿,尚缺乏早期特异性诊断标志物,在我国大部分胃癌患者初次就诊时即已处于进展期,且其中不少患者因合并肿瘤转移,无法进行根治性切除手术,即使接受了胃癌根治性切除手术,也有相当比例的患者在术后的治疗和随访过程中被诊断为肿瘤复发或者转移,导致其五年生存率总体较低,预后不佳。因此,探寻胃癌转移的可能过程及相应机制,对寻找胃癌患者精准化治疗新靶点、积极改善患者预后,具有非常重要的意义。钙网蛋白(Calreticulin,CALR),作为一种高度保守的内质网钙结合蛋白,主要分布在细胞的内质网腔中,同时在细胞核被膜也有分布,对于人类而言,它的存在是普遍的。CALR具有多种生物学功能,例如调节钙离子平衡、参与抗原提呈,同时还有调节血管生成、辅助蛋白质的加工及折叠等功能。在既往研究中,CALR在诸如食管癌、胰腺癌等肿瘤中呈显著高表达,并且在其与肿瘤侵袭、预后等因素研究中亦发现了它们有着明显相关性。CALR与其他不同类型肿瘤的关系也得到了科研工作者饶有兴趣的关注,在胃癌中,有研究者通过临床样本及TCGA、Oncomine大数据库分析发现CALR在胃癌组织中存在高表达现象,且可能与胃癌的淋巴结转移、生存率等因素相关;然而,CALR调控胃癌转移分子机制的深入研究却甚少。因此,进一步探究CALR在胃癌转移中的可能作用及相关分子机制,有望为胃癌精准治疗提供新的研究方向。研究目的1、明确CALR在胃癌组织和细胞中的表达及其临床意义。1、明确CALR在体内外诱导胃癌转移的作用。2、探讨CALR诱导胃癌转移的可能分子机制。研究方法1、胃癌组织及细胞中CALR的表达及临床意义。1)检索TCGA数据库,分析CALR在胃癌组织与癌旁组织中的表达水平,以及胃癌中CALR的表达量与患者临床病理资料的关系。2)采用免疫组织化学染色技术、RT-q PCR技术,检测CALR在胃癌细胞、胃癌组织和癌旁组织中的蛋白及m RNA表达水平。3)通过临床信息随访及oncomine数据库(2019)分析CALR与临床病理资料的相关性,分析胃癌组织中CALR表达与胃癌病人生存率的相关性(利用Kaplan-Meier曲线)。4)通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胃癌患者及正常人血清中CALR的表达量,采用ROC曲线及AUC面积评估血清中CALR含量作为新型胃癌诊断标志物的可能潜在价值。2、明确CALR在体内外诱导胃癌转移的作用。1)首先由上海汉恒生物技术公司构建CALR慢病毒敲低载体,上海吉玛制药技术有限公司构建CALR慢病毒过表达载体,基于1中胃癌细胞中CALR表达水平,分别感染胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901后,筛选稳定敲低CALR的MGC-803细胞株及稳定过表达CALR的SGC-7901细胞株。2)在体外,通过Transwell、划痕实验,检测在胃癌细胞中过表达或干扰CALR后,对胃癌细胞的迁移能力所产生的不同影响。3)建立体内腹腔播散模型,探索CALR对胃癌细胞转移能力的影响。在该实验中,动物分为两组:干扰组、对照组;干扰组给每只裸鼠经腹腔注射1×10^6个稳定干扰CALR的MGC-803细胞,对照组同样方法腹腔注射对照细胞,4周后通过小动物活体成像实验体内探索CALR对胃癌细胞转移能力的影响,实验完毕后处死小鼠,观察并统计腹腔转移灶的大小数量并拍照。3、探讨CALR诱导胃癌转移的分子机制。1)通过转录组测序技术,检测稳定过表达CALR后差异表达的分子及相关信号通路分子。2)收集稳定干扰或稳定过表达CALR胃癌细胞株RNA及蛋白,通过RT-q PCR技术、免疫印迹技术验证测序结果,检测EMT相关标志物和细胞粘附相关分子的变化。3)通过MS assays和IP实验等方法,进一步探讨CALR诱导胃癌转移的可能分子机制。研究结果1、胃癌组织及细胞中CALR的表达及临床意义。1.1胃癌组织及细胞中CALR的表达首先通过TCGA数据库基因表达谱的数据分析,提示CALR在胃癌组织中的表达水平较癌旁组织明显升高。接着,将新鲜癌组织及癌旁组织50对进行配对,通过RT-q PCR技术检测CALR m RNA水平的表达;同时,通过免疫组化染色技术检测了芯超芯片中129对配对胃癌组织及癌旁组织CALR蛋白水平的表达;显示了一致性的结果:在胃癌组织中CALR的表达明显上调。此外,我们还检测了CALR在胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中以及不同胃癌细

关键词：胃癌 CALR 上皮-间质转化 G9a H3K9 甲基化肿瘤转移

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乳腺癌患者血清中20种氨基酸的检测及在乳腺癌筛查中的意义

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第二军医大学学报 2021年第11期42卷 1238-1245页

作者：何永鹏郑晓东徐灵莉雷海科林昌海付晓琴邓浩月李沁栖任秋宇朱娟甘淋西南医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室泸州646000 重庆大学附属肿瘤医院/肿瘤研究所肿瘤转移与个体化诊治转化研究重庆市重点实验室重庆400030

目的考察乳腺癌患者与正常体检者血清中氨基酸水平的差异,并探讨其在乳腺癌筛查中的意义。方法招募2019年4-6月重庆大学附属肿瘤医院病理科确诊的女性乳腺癌患者59例作为乳腺癌组,以正常女性体检者53例作为对照组。采用高效液相色谱-质... 详细信息

目的考察乳腺癌患者与正常体检者血清中氨基酸水平的差异,并探讨其在乳腺癌筛查中的意义。方法招募2019年4-6月重庆大学附属肿瘤医院病理科确诊的女性乳腺癌患者59例作为乳腺癌组,以正常女性体检者53例作为对照组。采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)检测招募者血清中20种氨基酸水平,分析乳腺癌组与对照组间、乳腺癌不同分子亚型组间、早期乳腺癌组与晚期乳腺癌组间氨基酸水平的差异。采用ROC曲线对差异血清氨基酸在乳腺癌筛查中的效能进行评估。结果乳腺癌组血清中丙氨酸(Ala)、天冬酰胺(Asn)、瓜氨酸(Cit)、谷氨酸(Glu)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、鸟氨酸(Orn)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、苏氨酸(Thr)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)的水平均高于对照组(P均<0.05),精氨酸(Arg)水平低于对照组(P=0.003)。ROC曲线分析表明,在乳腺癌患者血清中升高的14种氨基酸中,Ala和Pro单独筛查乳腺癌的效能较高,AUC均为0.75;Ile单独筛查乳腺癌时有最高的灵敏度,达0.82;Lys单独筛查乳腺癌时有最高的特异度,达0.94;这14种氨基酸联合检测时能够提高乳腺癌的筛查效能,AUC为0.88,灵敏度为0.69,特异度为0.94。早期乳腺癌(TNM分期Ⅰ期和Ⅱ期)患者血清Val水平高于晚期(TNM分期Ⅲ期和Ⅳ期)患者(P=0.044),其他19种氨基酸水平在早期和晚期乳腺癌患者之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。20种血清氨基酸水平在Luminal A型、Luminal B型、三阴性型、人表皮生长因子受体2(HER2)阳性型乳腺癌组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论乳腺癌患者血清中15种氨基酸水平与正常体检者相比存在差异,有助于乳腺癌筛查;14种在乳腺癌患者血清中升高的氨基酸的联合检测有利于提高乳腺癌筛查效能,是有潜力的生物学标志物。

关键词：乳腺肿瘤血清氨基酸类筛查高效液相色谱-质谱法肿瘤生物标记

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RNA中m⁵C和m⁶A双重分析逻辑光电化学传感方法

RNA中m<Sup>5</Sup>C和m<Sup>6</Sup>A双重分析逻辑光电化学传感...

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作者：郑峻松朱全敬李艳方立超李承红邓均黄辉刘华敏汪莉娜刘飞雪 400000 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号

本发明属于生物基因技术领域，公开了一种RNA中m5C和m6A双重分析逻辑光电化学传感方法，RNA中m5C和m6A双重分析的逻辑光电化学传感方法包括构建H型纳米支架；进行DNA步行器的构建；进行DNA折纸的构建；进行电极表面修饰和光电信号检测... 详细信息

标准号: CN113740401B

本发明属于生物基因技术领域，公开了一种RNA中m⁵C和m⁶A双重分析逻辑光电化学传感方法，RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法包括构建H型纳米支架；进行DNA步行器的构建；进行DNA折纸的构建；进行电极表面修饰和光电信号检测。本发明检测灵敏度高，具有临床实验室推广应用前景；不同浓度的m⁵C靶序列不影响m⁶A靶序列的光电信号；当不同浓度的m6A靶序列与10^‑7M m⁵C靶序列共同孵育后在同一根电极表面检测的625nm波长下的光电信号，不同浓度的m⁶A靶序列不影响m⁵C靶序列的光电信号，说明具有同时检测两种靶序列的能力。

关键词：靶序列光电信号构建光电化学双重分析传感电极表面修饰光电信号检测检测灵敏度电极表面纳米支架生物基因步行器检测波长孵育

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信息化精准教学在基础化学实验中的探索

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基础医学教育 2021年第11期23卷 797-800页

作者：贺建张定林杨静杨小超陆军军医大学基础医学院化学教研室重庆400038 陆军军医大学生物医学工程与影像医学系生物医学材料学教研室

精准教学的内涵和意义已较为明了,但如何在具体学科中实施精准教学仍是亟待解决的问题。为达到基础化学实验精准化教学的目的,文章提出了基于信息化教学平台和信息化资源的实施策略。继而先从理论角度分析了其实施的意义,再选取实验准... 详细信息

精准教学的内涵和意义已较为明了,但如何在具体学科中实施精准教学仍是亟待解决的问题。为达到基础化学实验精准化教学的目的,文章提出了基于信息化教学平台和信息化资源的实施策略。继而先从理论角度分析了其实施的意义,再选取实验准入考核、实验考核和实验报告三个评价点对实施效果进行分析。发现该策略能有效帮助学生掌握实验安全知识,规范实验操作、实验报告格式,训练实验讨论能力。

关键词：基础化学实验教学精准教学

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pCDH-NLRX1慢病毒质粒的构建及NLRX1在A549细胞中稳定表达

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第2期36卷 152-156页

作者：董宇航张晓晓王芳应旗康冯禹楠刘蓉蓉吴兴安空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的构建核苷酸结合寡聚结构域样受体家族成员X1(NLRX1)慢病毒质粒以及能够稳定过表达NLRX1的细胞系。方法利用分子克隆方法从pCMV3-NLRX1质粒中克隆出NLRX1 cDNA全长片段,将全长的NLRX1片段插入pCDH-CMV-MCSEF1-Puro中得到过表达慢病... 详细信息

目的构建核苷酸结合寡聚结构域样受体家族成员X1(NLRX1)慢病毒质粒以及能够稳定过表达NLRX1的细胞系。方法利用分子克隆方法从pCMV3-NLRX1质粒中克隆出NLRX1 cDNA全长片段,将全长的NLRX1片段插入pCDH-CMV-MCSEF1-Puro中得到过表达慢病毒质粒pCDH-NLRX1;将pCDH-NLRX1与包装质粒pMD2和pAX2共转染HEK293T细胞后包装、浓缩得到慢病毒颗粒并感染A549细胞,进而利用嘌呤霉素对感染后的A549细胞进行筛选得到稳定过表达NLRX1的A549细胞系。利用实时定量PCR检测感染A549细胞中NLRX1的mRNA水平,Western blot法检测其蛋白水平,免疫荧光细胞化学法检测NLRX1的表达。结果成功构建pCDH-NLRX1质粒,pCDH-NLRX1与包装质粒共转染HEK293T细胞后,得到滴度约1×105转导单位(TU)/mL的慢病毒颗粒;包装成熟的pCDH-NLRX1慢病毒颗粒感染A549细胞后,利用嘌呤霉素对A549细胞进行筛选,得到NLRX1过表达稳转细胞系。感染的A549细胞中NLRX1表达明显,其mRNA水平和蛋白含量明显增加。结论成功构建了过表达NLRX1的慢病毒质粒并建立了NLRX1过表达的稳定感染细胞系。

关键词：固有免疫模式识别受体 NLR蛋白

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缺铁性贫血药物的研究进展

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空军军医大学学报 2023年第12期44卷 1225-1228页

作者：马玉颖吴海杨铁虹陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 国药集团西南医药有限公司四川成都610045 空军军医大学药学系药物化学与药物分析学教研室陕西西安710032

本文基于缺铁性贫血(IDA)对近年补铁剂的开发与应用研究展开综述,为补铁剂的研发与临床选择提供新思路。重点介绍了IDA不同阶段、补铁剂型选择、适应证及不良反应等,并对一些处于临床研究阶段的补铁剂进行了介绍。随着抗贫血研究的深入... 详细信息

本文基于缺铁性贫血(IDA)对近年补铁剂的开发与应用研究展开综述,为补铁剂的研发与临床选择提供新思路。重点介绍了IDA不同阶段、补铁剂型选择、适应证及不良反应等,并对一些处于临床研究阶段的补铁剂进行了介绍。随着抗贫血研究的深入,研究热点将聚焦于利用植物、微生物及海洋生物等资源,有望开发出用药更安全、吸收利用度更高、起效更快的新型补铁剂。

关键词：缺铁缺铁性贫血口服补铁剂静脉补铁剂

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