检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：周虎传杨劲曾益军位全芳何凤田赵谦李劲刘洋李杰第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所

目的:建 DNA 聚合酶 iota 在 HEK-293细胞中的高表达体系。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将已构建的带有目的基因的真核表达质粒 PCDNA3.1转 HEK-293细胞,通过 G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总 RNA,采用逆转录聚合酶链式反... 详细信息

目的:建 DNA 聚合酶 iota 在 HEK-293细胞中的高表达体系。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将已构建的带有目的基因的真核表达质粒 PCDNA3.1转 HEK-293细胞,通过 G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总 RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆。

关键词： DNA 聚合酶 iota HEK-293细胞 DNA 损伤 DNA 修复

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p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病K562细胞作用的研究

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实用医学杂志 2008年第5期24卷 700-703页

作者：王玮孙秉中刘庆春药立波解放军第175医院血液肿瘤科福建省漳州市363000 第四军医大学西京医院血液科西安市710032 第四军医大学生物化学和分子生物学教研室西安市710032

目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用。方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染... 详细信息

目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用。方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p16基因缺失的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株,Westernblot证实转染后有p16蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。结果:反复测序发现,从K562细胞中扩增的DNA片段属于非特异性扩增,证实K562细胞中p16基因缺失。转染p16基因后表达外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显减慢;伊马替尼作用于已转染p16-pcDNA3.1的K562细胞,其细胞存活率与伊马替尼作用未转染K562细胞及单纯转染p16-pcDNA3.1的K562细胞相比均明显降低。转染p16基因后G0/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,p16-pcDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升。结论:p16基因抑制K562细胞增殖并调节其周期,外源p16联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用。

关键词：白血病淋巴细胞慢性基因 p16 K562细胞伊马替尼基因克隆

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糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2008年第3期30卷 216-219页

作者：郝坡刘北忠欧阳峰王东生刘畅钟梁金丹婷王翀重庆医科大学医学检验系临床生物化学教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016 广东省人民医院皮肤性病科实验室广州510000

目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分... 详细信息

目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。

关键词：糖皮质激素受体结合域诱饵载体诱饵蛋白

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大黄鱼Peroxiredoxin 4氮端小β-sheet的重要性研究

大黄鱼Peroxiredoxin 4氮端小β-sheet的重要性研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：连福明滕衍斌江永亮何永兴母尹楠陈新华陈宇星周丛照中国科学技术大学生命科学院合肥微尺度物质科学国家实验室国家海洋局第三海洋研究所

Peroxiredoxin（Prx）是在动物、植物、酵母、细菌和古生菌中广泛存在的抗氧化蛋白。在含有巯基的氧还蛋白或小分子的作用下（如Thioredoxin,AhpF,GSH等）,Prx通过其Peroxidase活性催化HO还原为HO,从而消除HO对细胞的毒害作用。根据不... 详细信息

Peroxiredoxin（Prx）是在动物、植物、酵母、细菌和古生菌中广泛存在的抗氧化蛋白。在含有巯基的氧还蛋白或小分子的作用下（如Thioredoxin,AhpF,GSH等）,Prx通过其Peroxidase活性催化HO还原为HO,从而消除HO对细胞的毒害作用。根据不同的催化机制Prx可以分为三类:Typical 2-Cys Prx,Atypical 2-Cys Prx和1-Cys Prx。Prx4是属于Typical 2-Cys Prx,活性单位是二聚体,形成的与催化相关的二硫键位于二聚体的作用界面。该分子间二硫键是由一个分子中N端的Peroxidatic cysteine与二聚体中另一个分

关键词：大黄鱼 Peroxiredoxin 4 sheet 重要性研究

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浅谈生物化学绪论课教学

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西北医学教育 2008年第3期16卷 608-609页

作者：张璟尹战海李霞张健刘新平第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 西安交通大学医学院第一附属医院骨科陕西西安710061

生物化学是一门非常重要的医学基础课。由于生物化学课的内容抽象、繁杂、枯燥，要掌握它需要有较好的有机化学基础知识，学生对生物化学课的学习普遍具有畏难情绪。讲好生物化学的绪论部分可以帮助学生树立学习生物化学的信心和激发他... 详细信息

生物化学是一门非常重要的医学基础课。由于生物化学课的内容抽象、繁杂、枯燥，要掌握它需要有较好的有机化学基础知识，学生对生物化学课的学习普遍具有畏难情绪。讲好生物化学的绪论部分可以帮助学生树立学习生物化学的信心和激发他们的学习兴趣。结合生物化学绪论课的教学经验，笔者认为本节课可以通过对生物化学“是什么”、“学什么”、“为什么学”和“怎么学”这几个问题地讲解使学生明确学习目的，消除畏难情绪，培养他们学习生物化学的兴趣。

关键词：绪论生物化学教学

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麻痹性贝毒检测方法研究进展

麻痹性贝毒检测方法研究进展

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2008年中国水产学会学术年会

作者：张晓玲杨桥惠芸华冯兵于慧娟蔡友琼中国水产科学研究院东海水产研究所农业部水产品质量监督检验测试中心第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

由于有害赤潮发生日趋频繁,对水产养殖业及人类健康的危害越来越大,造成的经济损失也逐渐增加,因而有害赤潮已成为人们关注的焦点。麻痹性贝毒(Paralytic Shellfish Poisoning,PSP)毒素是藻毒素中分布最广、危害最大的一类毒素。本文作... 详细信息

由于有害赤潮发生日趋频繁,对水产养殖业及人类健康的危害越来越大,造成的经济损失也逐渐增加,因而有害赤潮已成为人们关注的焦点。麻痹性贝毒(Paralytic Shellfish Poisoning,PSP)毒素是藻毒素中分布最广、危害最大的一类毒素。本文作者针对性PSP贝毒,对其主要特征,化学结构式、毒性效应及分析检测方法技术作以介绍。以期为深入开展PSP检测方法的研究提供参考依据。

关键词：麻痹性贝毒素检测方法进展

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白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：吴剑万福生李华涂硕余乐涵南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室

目的观察白英水提物(SLT)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:常规法制备SLT;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入SLT终浓度分别为12.5 mg/ml、25 mg/ml和50 mg/ml。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧... 详细信息

目的观察白英水提物(SLT)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:常规法制备SLT;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入SLT终浓度分别为12.5 mg/ml、25 mg/ml和50 mg/ml。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl、bid、caspase-9 mRNA表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果:与正常对照组比较,三个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡呈显著性增多(P<0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;基因bcl-xl mRNA表达显著性下降(P<0.05),bid、caspase-9 mRNA表达有显著性升高(P<0.05),并随SLT浓度增加而加强,Caspaes-3活性均有显著性增高(P<0.01)。结论:SLT能剂量依赖性的诱导SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,其作用与调控bcl-xl、bid、caspase-9 mRNA表达和增强caspase-3活性相关。

关键词：白英凋亡基因表达 SGC-7901细胞

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白英抗癌活性组分的筛选及抗肺癌A549机制的观察

白英抗癌活性组分的筛选及抗肺癌A549机制的观察

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：付宏伟涂硕朱伟锋李华刘丽乔万福生南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室

目的:本研究旨在筛选白英抗癌活性组分并观测其对癌细胞增殖抑制、诱导凋亡作用机制,为开发和临床使用该中药治疗癌症提供实验数据。方法:取白英全草干品提取药物活性组分C2、C3、D3、D5和D8;体外培养人肺癌A549、鼠H22肝癌细胞,采用MT... 详细信息

目的:本研究旨在筛选白英抗癌活性组分并观测其对癌细胞增殖抑制、诱导凋亡作用机制,为开发和临床使用该中药治疗癌症提供实验数据。方法:取白英全草干品提取药物活性组分C2、C3、D3、D5和D8;体外培养人肺癌A549、鼠H22肝癌细胞,采用MTT法筛选出两个

关键词：白英肺癌A549 细胞凋亡 BALB/C小鼠 MVD

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反相离子对HPLC测定人血浆中二甲双胍研究

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重庆医学 2008年第19期37卷 2209-2210,2214页

作者：刘明张梦军张莉曹文轩张惠静韦城汪超葛晓翔蒲荣喜第三军医大学医学检验系分析化学教研室重庆400038 第三军医大学学员旅6队重庆400038

目的建立一种快速、准确测定人血浆中盐酸二甲双胍含量的反相离子对HPLC方法。方法在血浆中加入盐酸二甲双胍标样及内标阿替洛尔，用乙腈除蛋白，离心后取上清液加二氯甲烷萃取乙腈，再次离心后，取上清液直接进样分析；色谱柱为Diamons... 详细信息

目的建立一种快速、准确测定人血浆中盐酸二甲双胍含量的反相离子对HPLC方法。方法在血浆中加入盐酸二甲双胍标样及内标阿替洛尔，用乙腈除蛋白，离心后取上清液加二氯甲烷萃取乙腈，再次离心后，取上清液直接进样分析；色谱柱为Diamonsil C18（150×4．6mm，5μm），流动相组成：（0．01mol／L磷酸二氢钠＋0．0075mol／L十二烷基磺酸钠）（pH5．5）：乙腈（70：30），检测波长为235nm，柱温：30℃，流速为1．0mL／min，进样量为20μL。结果盐酸二甲双胍在0．05～4μg／mL的浓度范围内呈良好线性，r=0．9997，最低检测限为0．015μg／mL，方法回收率大于97．98％，萃取回收率大于89．35％，日间、日内变异系数均小于5％。结论该方法准确、快速、灵敏，可用于盐酸二甲双胍的治疗药物监测、人体内药代动力学及生物等效性研究。

关键词： HPLC 盐酸二甲双胍阿替洛尔血浆

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转基因棉花种植对土壤卡那霉素抗性细菌多样性的影响

转基因棉花种植对土壤卡那霉素抗性细菌多样性的影响

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第五次全国土壤生物和生物化学学术研讨会

作者：彭文涛汪峰崔中利曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

土壤微生物的多样性及其活性是保持农业生态系统稳定的基础,而种植不同的作物对土壤微生物的多样性结构和活性具有显著的影响。本研究通过菌体PCR的方法,用细菌通用引物63F和1387R对江苏省大丰市三龙镇上海农场中卡那霉素抗性菌株的16S ... 详细信息

土壤微生物的多样性及其活性是保持农业生态系统稳定的基础,而种植不同的作物对土壤微生物的多样性结构和活性具有显著的影响。本研究通过菌体PCR的方法,用细菌通用引物63F和1387R对江苏省大丰市三龙镇上海农场中卡那霉素抗性菌株的16S rDNA片段进行扩增,扩增产物用两种限制性内切酶HhaⅠ和Rsa 1分别酶切,获得该土壤250个卡那霉素抗性菌落酶切图谱来研究转基因棉花根际土壤中卡那霉素抗性细菌的多样性及群落构成。结果表明,转基因棉花较常规棉花根系土壤中卡那霉素抗性细菌的多样性和种群结构产生了一定影响。转基因植物的大量种植可能存在一定得生态风险。本研究为进一步研究江苏省大丰市三龙镇上海农场微生物生态功能提供了基础资料。

关键词：转基因棉花卡那霉素抗性土壤微生物 RFLP分析

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