检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 554-557页

作者：崔瑞耀王永久由振东青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021 第二军医大学神经生物学研究室上海200433

Oxytocinreceptor(OTR)isamemberofG -proteincoupledreceptor ,whichhasbeen foundinmanytumorsandcancercelllines .Manystudiesrevealedoxytocin(OT)mayinhibitthetumorand cancercellgrowthandproliferation ,butthemechanismofthisinhibitionisnotwellknown .Someexperiments indicatedcAMP -PKAsystemparticipatesinthesignaltransductionthatoxytocininhibitsthecancercellpro liferation .However ,otherexperimentsshowedthesignaltransductionforoxytocinintheHs5 78Tcarcinosaco macellisthesameasthatinthenormalcells .Inthisreview ,therelationshipbetweenOTRandtumorsare summarized . [

关键词：催产素受体肿瘤信号转导

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重组人淋巴毒素随机点突变组合文库的构建

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生物工程学报 2004年第1期20卷 43-48页

作者：沈毅珺潘卫徐容潘欣王罗春王征曹峰谭靖伟吴劲松吴芳刘彦君第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 上海复旦张江生物医药股份有限公司上海201203

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因... 详细信息

构建重组人淋巴毒素 (rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究。应用含随机核苷酸序列的引物 ,通过OverlapPCR的方法分别对rhLT的 4 6、10 6和 130位氨基酸进行定点随机突变 ,获得各单点随机突变体库。通过基因操作将这三个单点随机突变体库拼接并克隆于pMD_18T载体建立三点组合突变体文库 ,DNA测序鉴定突变位点的随机性和多样性 ,原核表达该变异体库 ,体外测定生物学活性。成功获得rhLT三点随机点突变组合文库 ,其转化克隆数达到 1 5× 10 5,是多样性理论值的 4 5倍。 5 0个样品的序列分析显示各个位点的核苷酸和氨基酸序列的突变都呈随机性分布。对原核表达的 30个样品进行生物学活性测定 ,结果 70 % (2 1个 )的样品无活性、2 3 3% (7个 )的样品活性低于rhLT、6 7% (2个 )的样品活性高于rhLT。成功构建了rhLT随机点突变组合文库 ,该库不仅在一级结构上具有良好的随机性和多样性 ,而且具有生物学活性的多样性 ,为应用噬菌体展示等高通量筛选策略对淋巴毒素进行体外分子进化和结构与功能的深入研究打下了基础。

关键词：淋巴毒素随机突变分子进化点突变组合文库

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HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

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安徽医科大学学报 2009年第1期44卷 5-9页

作者：李存枚潘卫曹洁王锦红黄德圣庞强廖文婷邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的构建HIV-1HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌***21(DE3)中进行高效表达和纯化。方法应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64～111位核苷酸,22～37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(△C)的... 详细信息

目的构建HIV-1HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌***21(DE3)中进行高效表达和纯化。方法应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64～111位核苷酸,22～37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(△C)的N末端,获得其突变体序列(Tat(CN)DNA),构建其原核表达质粒pET32a-Tat(CN),并转入大肠杆菌*** BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,经SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,纯化后的产物用间接ELISA进行鉴定。结果构建了pET32a-Tat(CN)突变体,pET32a-Tat(CN)融合蛋白在大肠杆菌中表达水平为5.17mg/ml,相对分子质量为31ku。间接的ELISA结果表明,pET32a-Tat(CN)能与Tat兔抗血清呈特异反应。结论成功构建了HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区移位至TatN端的突变体,并能在大肠杆菌中高效表达,其纯化的蛋白pET32a-Tat(CN)很好地保留了与HIV-1Tat兔抗血清的免疫反应性,为HIV-1Tat的疫苗基础研究提供了一有价值的研究结论。

关键词： HIV-1/遗传学大肠杆菌/遗传学基因产物 tat 基因表达

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内毒素耐受导致肾上腺皮质内分泌细胞功能不全的机制

内毒素耐受导致肾上腺皮质内分泌细胞功能不全的机制

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：朱晓燕刘书娟刘宇健王山第二军医大学基础部生理学教研室第二军医大学基础部病理生理学教研室

目的:脓毒症患者常伴有肾上腺功能不全,患者皮质醇基础分泌降低或对促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激反应低下,其机制仍未阐明。方法:荧光免疫组织化学方法检测原代分离培养的大鼠肾上腺网状带/束状带(F/R)细胞中TLR4表达;EIA试剂盒检测皮质... 详细信息

目的:脓毒症患者常伴有肾上腺功能不全,患者皮质醇基础分泌降低或对促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激反应低下,其机制仍未阐明。方法:荧光免疫组织化学方法检测原代分离培养的大鼠肾上腺网状带/束状带(F/R)细胞中TLR4表达;EIA试剂盒检测皮质酮浓度;荧光实时定量PCR和Western blotting方法观察F/R细胞中皮质酮合成相关酶mRNA和蛋白表达。结果:(1)肾上腺组织和F/R细胞有TLR4表达;(2)内毒素(LPS)刺激F/R细胞分泌皮质酮,同时诱导StAR、CYP11B1表达。ACTH促进StAR和皮质酮合成相关酶CYP11A1、HSD3B、CYP21和CYP11 B1表达;(3)LPS预处理使F/R细胞接受后续LPS和ACTH刺激时皮质酮生成量减少;(4)LPS抑制TLR4表达。同时F/R细胞经LPS预处理后,后续LPS诱导的StAR和CYP11B1表达被抑制;(5)LPS抑制ACTH受体表达。然而LPS预处理仅抑制了后续ACTH诱导的CYP11A1、HSD3B和

关键词：内毒素耐受皮质酮肾上腺功能不全肾上腺皮质内分泌细胞

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构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库

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安徽医科大学学报 2010年第6期45卷 729-733页

作者：黄德圣潘卫曹洁庞强唐萍廖文婷李存枚陈秋莉邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通... 详细信息

目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3'端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANT-AB5S,克隆产物转化***5α,提取原代库质粒转化***1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为1.87×107cfu,滴度为1.3×1014TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性。结论成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求。

关键词：细菌噬菌体/遗传学

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结合学科特色开展病理生理学第二课堂教学的实践与体会

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医学研究杂志 2012年第4期41卷 182-184页

作者：张晔张海王燕任安经章卫平第二军医大学病理生理学教研室上海200433

在现代高等医学教育中，“第二课堂”科研实践活动作为“第一课堂”教学的有益补充和重要辅助形式，对促进学生的素质教育与能力培养具有不可替代的积极作用。与传统的“第一课堂”不同的是，“第二课堂”通常是在教学大纲或课程标准的... 详细信息

在现代高等医学教育中，“第二课堂”科研实践活动作为“第一课堂”教学的有益补充和重要辅助形式，对促进学生的素质教育与能力培养具有不可替代的积极作用。与传统的“第一课堂”不同的是，“第二课堂”通常是在教学大纲或课程标准的要求范围之外，利用一定的教学资源，组织一定的学生群体，在“第一课堂”以外的时间，

关键词：第二课堂教学病理生理学学科特色高等医学教育学生群体实践活动能力培养素质教育

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肺泡表面活性物质结合蛋白

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国外医学（分子生物学分册） 1991年第2期13卷 74-77页

作者：冯涛李少华第二军医大学病理生理学教研室上海200433

肺泡表面活性物质结合蛋白(pulmonary surfactant-associated protein,SP)是肺泡表面活性物质(pulmonary surfactant,PS)中非血清源性蛋白成份。近年来的研究表明SP在PS的代谢过程以及发挥生理作用等方面具有重要作用。

关键词： SP 基因结合蛋白结构功能

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消炎痛、SRI63-441和1,25二羟维生素D3可降低磷脂酶A2所致的内皮细胞单层通透性升高

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中国病理生理杂志 1992年第5期 557-557页

作者：陈思锋,费侠,丁凤英,李少华第二军医大学病理生理学教研室第二军医大学病理生理学教研室第二军医大学病理生理学教研室第二军医大学病理生理学教研室

磷脂酶A2（PLA2100U/ml）预处理大鼠主动脉血管内皮细胞单层30分钟,可使单层通透性升高数倍。消炎痛（环氧化酶抑制剂）、SRI 63-441（血小板激活因子特异的受体拮抗剂）和1,25（OH）2维生素D3可降低

关键词：通透性细胞单层 A2 消炎痛内皮维生素

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Hedghog/Gli信号通路对乳腺癌细胞黏附、迁移和凋亡的影响及其可能的机制

Hedghog/Gli信号通路对乳腺癌细胞黏附、迁移和凋亡的影响及其可...

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会（第十一届）暨中国病理生理学会心血管专业委员会（第十四届）、受体与信号转导专业委员会（第九届）学术会议

作者：许娟张宗静王燕黄高翔张明焯卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室

Hedghog(Hh)/Gli信号通路是一条经典的胚胎发育信号系统,转录因子Gli1既是Hh通路激活的下游效应分子,其表达也受Hh信号通路的调节。我们前期的工作发现Gli1的高表达能抑制雌激素受体(ERα)的表达,并能促进乳腺癌细胞雌激素非依赖性的增... 详细信息

Hedghog(Hh)/Gli信号通路是一条经典的胚胎发育信号系统,转录因子Gli1既是Hh通路激活的下游效应分子,其表达也受Hh信号通路的调节。我们前期的工作发现Gli1的高表达能抑制雌激素受体(ERα)的表达,并能促进乳腺癌细胞雌激素非依赖性的增殖。在此基础上,我们采用稳定高表达Gli1的MCF-7和T47D细胞系,观察了高表达Gli1对乳腺癌细胞黏附、

关键词：乳腺癌细胞高表达信号通路 Hedghog/Gli 细胞黏附

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大剂量糖皮质激素作用的受体机制——低亲和力糖皮质激素受体的研究

大剂量糖皮质激素作用的受体机制——低亲和力糖皮质激素受体的研...

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全国首届新学说新观点学术讨论会

作者：乐颖影第二军医大学基础部病理生理学教研室

用Scatchard分析、Pseudoscatchard分析和置换曲线分析③种方法证实大鼠肝胞液不仅存在经典的高亲和力、低容量糖皮质激素受体（GH）,还存在一类低亲和力糖皮质激素结合部位（GCBS）,GCBS的Kd值在10mol/L数量级,其与糖皮质激素（GC）的...

用Scatchard分析、Pseudoscatchard分析和置换曲线分析③种方法证实大鼠肝胞液不仅存在经典的高亲和力、低容量糖皮质激素受体（GH）,还存在一类低亲和力糖皮质激素结合部位（GCBS）,GCBS的Kd值在10mol/L数量级,其与糖皮质激素（GC）的结合具有特异性,且可介导大剂量氢化可的松对原代培养大鼠肝细胞酷氨酸转按酶的诱导,因此可称为低亲和力GC变体（GR）。与GR的变化不同,血浆GC浓度升高对GR呈正向调节,应激时GR变化不明显,推测应激等病理性情况下虽然GR减少,且使用大剂量GC可使GR进一步减少,但GR变化不明显,其可介导大剂量GC的作用。GR与GR分子的抗原决定基有很高的同源性,两者可能由同一基因编码。

关键词：

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