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地塞米松对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞酪氨酸转氨酶活性诱导能力丧失的机制研究

第二军医大学学报 2008年第6期29卷 630-633页

作者：李忆东刘宇健卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的:通过测定人肝癌SMMC 7721细胞酪氨酸转氨酶(TAT)cDNA序列,并观察其糖皮质激素受体(GR)通路是否存在异常,以探讨地塞米松(Dex)丧失诱导SMMC-7721细胞TAT活性的机制。方法:RT-PCR扩增SMMC-7721细胞全长TAT cDNA并进行测序;采用实时定... 详细信息

目的:通过测定人肝癌SMMC 7721细胞酪氨酸转氨酶(TAT)cDNA序列,并观察其糖皮质激素受体(GR)通路是否存在异常,以探讨地塞米松(Dex)丧失诱导SMMC-7721细胞TAT活性的机制。方法:RT-PCR扩增SMMC-7721细胞全长TAT cDNA并进行测序;采用实时定量PCR观察Dex对SMMC-7721细胞TAT mRNA表达的影响,并与HepG2细胞作对照;采用电穿孔法将GR特异性报告基因GRE-tk-LUC及GRE-MMTV CAT分别瞬时转入SMMC-7721细胞中,观察Dex对荧光素酶(LUC)和氯酶素乙酰转移酶(CAT)表达的影响,并与HepG2细胞作对照。结果:SMMC-7721细胞TAT cDNA中第576位碱基存在同义突变;Dex能够诱导SMMC-7721细胞中TAT mRNA的表达,最大诱导倍数为2.22,明显低于HepG2细胞(15.1倍,P<0.01);Dex诱导了SMMC-7721细胞LUC及CAT的表达,与HepG2细胞无显著差异。结论:Dex对SMMC-7721细胞TAT mRNA诱导水平降低,可能是TAT活性不增高的主要原因。

关键词：糖皮质激素受体酪氨酸转氨酶转录激活

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睾丸女性化综合征患者外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体的研究

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中华医学遗传学杂志 1995年第5期12卷 275-278页

作者：卢建吴嘉渔张金山徐晓春第二军医大学基础部病理生理学教研室南通医学院病理生理学教研室

以培养的外阴部皮肤成纤维细胞（ＧＳＦ）为材料，以人工合成的雄激素（￣３Ｈ－Ｒ１８８１）为配体，采用完整细胞及核特异结合以及受体热稳定性的测定方法，对６例完全型及不完全型睾丸女性化（ＴＦＭ）综合征患者ＧＳＦ的雄激素受体... 详细信息

以培养的外阴部皮肤成纤维细胞（ＧＳＦ）为材料，以人工合成的雄激素（￣３Ｈ－Ｒ１８８１）为配体，采用完整细胞及核特异结合以及受体热稳定性的测定方法，对６例完全型及不完全型睾丸女性化（ＴＦＭ）综合征患者ＧＳＦ的雄激素受体（ＡＲ）进行了研究，实验显示，６个患者中有３个ＧＳＦ系与￣３Ｈ－Ｒ１８８１的特异结合量明显减少，１个患者ＧＳＦ系的核与￣３Ｈ－Ｒ１８８１的特异结合量降低，另外两患者ＧＳＦ系的所测指标没发现有明显异常。上述结果表明ＡＲ质或量的异常是导致ＴＦＭ综合征的主要原因。

关键词：睾丸女性化综合征成纤维细胞雄激素受体

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转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白对肝脏糖脂代谢的调节作用

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第二军医大学学报 2011年第3期32卷 318-322页

作者：周露婷章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

肝脏是体内糖脂代谢的重要器官,转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是调节肝脏糖酵解及脂肪合成的重要转录因子。ChREBP与Max样蛋白X以异二聚体的形式调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异... 详细信息

肝脏是体内糖脂代谢的重要器官,转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是调节肝脏糖酵解及脂肪合成的重要转录因子。ChREBP与Max样蛋白X以异二聚体的形式调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异性敲除ChREBP基因后能明显改善其脂肪肝及胰岛素抵抗。阐明ChREBP对糖脂代谢的调控机制及其生物学功能,可进一步解释葡萄糖诱导脂肪形成的过程,并有望为脂肪肝等代谢性疾病的干预治疗提供新的思路。本文对ChREBP的结构特征、调控机制、生物学功能及其与疾病的关系等最新进展进行综述。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白糖酵解脂肪生成脂肪肝

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大鼠肝胞液糖皮质激素受体的免疫亲和层析纯化

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第二军医大学学报 1991年第2期12卷 172-174页

作者：张斌徐仁宝第二军医大学训练部病理生理学教研室

受体的纯化是受体研究十分重要的课题。这是因为研究受体的物理化学性质必须有受体的纯品,而制备受体的抗血清以至单克隆抗体(McAb)就更离不开受体的提纯。

关键词：糖皮质激素受体纯化亲和层析

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猪肺表面活性物质对大鼠早期脂多糖性急性肺损伤的治疗作用

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中国病理生理杂志 2007年第8期23卷 1583-1586页

作者：王轶群孙瑜杨瑞钟纪根卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的:观察猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对大鼠早期脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组、低、中、高3个不同剂量PPS给药组,各组动物均气道内滴注LPS1.5 ***-1,30 min后分别经气管滴注100 ***-1... 详细信息

目的:观察猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对大鼠早期脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组、低、中、高3个不同剂量PPS给药组,各组动物均气道内滴注LPS1.5 ***-1,30 min后分别经气管滴注100 ***-1、150 ***-1、200 ***-1PPS(PPS组)或等量生理盐水(对照组)。之后观察6 h,监测大鼠的PaO2和PaCO2,计算各组大鼠存活率。大鼠处死后检测肺系数(LI),肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量,白细胞(WBC)数和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,并观察肺病理组织学改变。结果:与生理盐水组相比,LPS损伤大鼠早期气道内滴入外源性PPS可提高PaO2,降低PaCO2,提高存活率,减轻肺水肿及肺毛细血管膜的通透性,PPS150组、PPS200组的治疗效果优于PPS100组。结论:PPS早期给药对LPS气道内滴注致ALI具有明显的治疗作用。

关键词：急性肺损伤脂多糖类猪肺表面活性剂大鼠

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粉防己碱对大鼠心肌细胞电压依赖性钙通道的作用

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中国药理学通报 1996年第3期12卷 226-228页

作者：陈金明陈思聪钟纪根张国元龚肖崎吴宗贵第二军医大学长征医院心内科第二军医大学病理生理学教研室

运用钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，检测了粉防己碱（Ｔｅｔ）对成年大鼠心室肌细胞电压依赖性钙通道的影响。结果显示：基础状态下心肌细胞内钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）为１６２．６±７．３ｎｍｏｌ·Ｌ－１，５０ｍｍ... 详细信息

运用钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，检测了粉防己碱（Ｔｅｔ）对成年大鼠心室肌细胞电压依赖性钙通道的影响。结果显示：基础状态下心肌细胞内钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）为１６２．６±７．３ｎｍｏｌ·Ｌ－１，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１氯化钾能使［Ｃａ２＋］ｉ增加至４８０．８±９．３ｎｍｏｌ·Ｌ－１（Ｐ＜０．０１），在无细胞外钙条件下，这种增加作用消失，而预先给予Ｔｅｔ和维拉帕米（Ｖｅｒ）则能阻断高钾升高［Ｃａ２＋］ｉ的作用。结果提示：Ｔｅｔ是通过阻断电压依赖性钙通道而发挥作用的。

关键词：钙离子粉防己碱心肌细胞钙拮抗作用防己

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维生素D_3的生物效应及其作用的分子机制

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生理科学进展 1991年第2期22卷 147-152页

作者：宋亮年第二军医大学病理生理学教研室上海200433

除调节钙磷代谢外,1,25(OH)_2D_3对细胞生长分化、免疫系统功能及中枢神经系统功能也都有重要调节作用。这为用维生素D_3制剂治疗某些皮肤疾患、肿瘤、免疫系统功能障碍和神经内分泌系统功能紊乱提供了理论依据和潜在可能性。1,25(OH)_2... 详细信息

除调节钙磷代谢外,1,25(OH)_2D_3对细胞生长分化、免疫系统功能及中枢神经系统功能也都有重要调节作用。这为用维生素D_3制剂治疗某些皮肤疾患、肿瘤、免疫系统功能障碍和神经内分泌系统功能紊乱提供了理论依据和潜在可能性。1,25(OH)_2D_3受体(VDR)cDNA的克隆成功,又为进一步阐明受体结构与功能的关系以及维生素D_3作用的分子机制创造了条件。

关键词：维生素D3 生物效应代谢调节

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Hedgehog信号通路与肿瘤

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第4期20卷 493-497页

作者：黄高翔卢建第二军医大学病理生理学教研室上海200433

Hedgehog(Hh)信号通路可以调控细胞的增殖、迁移和分化等许多过程,并且在胚胎发育时期起重要作用。根据Hh信号通路激活后是否依赖Gli蛋白发挥生物学效应,可分为经典的Hh/Gli信号通路和非经典的Hh信号通路。其中,非经典的Hh信号通路可通... 详细信息

Hedgehog(Hh)信号通路可以调控细胞的增殖、迁移和分化等许多过程,并且在胚胎发育时期起重要作用。根据Hh信号通路激活后是否依赖Gli蛋白发挥生物学效应,可分为经典的Hh/Gli信号通路和非经典的Hh信号通路。其中,非经典的Hh信号通路可通过小G蛋白Rho家族信号和钙离子依赖的信号通路调控细胞骨架形态、细胞增殖、凋亡及迁移;经典与非经典的Hh信号通路形成相互联系的信号通路网络介导Hh信号的功能。Hh信号通路的异常持续的激活是许多肿瘤发生、发展的原因之一,Hh信号通路还与肿瘤干细胞的调控、肿瘤血管形成和肿瘤的侵袭转移密切相关,对Hh信号通路的深入研究有利于以Hh信号通路蛋白为靶点的抗肿瘤药物的研发与应用。

关键词： Hedgehog Gli 信号通路肿瘤

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热应激对大鼠肝组织及人前列腺癌PC-3细胞RhoB表达的影响

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第二军医大学学报 2007年第4期28卷 381-384页

作者：刘亚萍李忆东王晓慧杨瑞卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和West... 详细信息

目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和Western印迹分析测定RhoB mRNA和蛋白水平,并以正常大鼠肝脏组织作对照(n=6)。制备人前列腺癌PC-3细胞热应激模型,热应激后0．5、1、2、4、8 h取细胞检测RhoB的表达,并以未处理细胞作对照。结果:烫伤后4 h,大鼠肝组织RhoB mRNA表达量最高,为正常对照的3．2倍(P<0．01),8 h开始下降;而RhoB蛋白表达量在烫伤后8 h最高(P<0．01)。PC-3细胞RhoB mRNA在热应激后2 h时开始上调;4 h时达到最大值,约为对照的2．8倍(P<0．01);热应激后8 h RhoB蛋白表达量最高(P<0．01)。结论:在体内、体外实验中热应激均能上调小G蛋白RhoB mRNA和蛋白的表达。

关键词：热应激烫伤小G蛋白 RhoB 肝前列腺肿瘤

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大鼠烫伤复合内毒素血症致急性肺损伤时肺微循环的变化

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中华整形烧伤外科杂志 1991年第1期7卷 51-53页

作者：龚肖崎沈慧卿张亚霏第二军医大学病理生理学教研室 200433

我们建立了烫伤复合内毒素血症致急性肺损伤的动物模型。应用此模型,以"胸膜窗"法观察活体肺微循环变化;制备肺微血管铸型标本,在扫描电镜下观察肺微循环构筑学变化:在光镜和透射电镜下观察肺组织学和超微结构变化。实验结果... 详细信息

我们建立了烫伤复合内毒素血症致急性肺损伤的动物模型。应用此模型,以"胸膜窗"法观察活体肺微循环变化;制备肺微血管铸型标本,在扫描电镜下观察肺微循环构筑学变化:在光镜和透射电镜下观察肺组织学和超微结构变化。实验结果表明:烫伤复合内毒素血症,肺微循环变化为肺细动脉持续收缩;血管周围渗出进行性加重;肺间质增宽,毛细血管扩张、充血,继而发展为间质及肺泡水肿;肺间质有大量中性粒细胞浸润;肺微循环有白细胞和血小板聚集。实验结果提示:肺微循环障碍是烫伤复合内毒素血症致急性肺损伤的发病机理之一。

关键词：肺微循环烫伤内毒素血症电镜

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