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中国生理学会张锡钧基金会第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：任安经张欢汪凯麻献华 John N.Wood David Z.He 丁玉强袁文俊谢志芳章卫平第二军医大学病理生理学教研室英国伦敦大学生物学系同济大学医学院解剖和神经生物学系宁夏医科大学生理学和神经生物学系第二军医大学细胞生物学教研室

锌指蛋白ZBTB20是章卫平教授课题组白主克隆、并在国际上率先报道的新转录因子,全身ZBTB20基因敲除可导致小鼠低血糖、未成年死亡和海马发育严重障碍,ZBTB20在神经系统中高表达,但ZBTB20在神经系统的生物学功能还知之甚少。我们利用基... 详细信息

锌指蛋白ZBTB20是章卫平教授课题组白主克隆、并在国际上率先报道的新转录因子,全身ZBTB20基因敲除可导致小鼠低血糖、未成年死亡和海马发育严重障碍,ZBTB20在神经系统中高表达,但ZBTB20在神经系统的生物学功能还知之甚少。我们利用基因打靶技术分别建立了海马CA1区特异性ZBTB20敲除(CA1-ZB20KO)和外周伤害性感受神经元特异性ZBTB20敲除(peripheral nociceptor-specific ZBTB20 knockout,PN-ZB20KO)小鼠。研究发现CA1-ZB20KO小鼠海马的结构、发育和基础突触兴奋性未出现明显异常,但海马依赖性学习记忆能力明显下降,长时程(LTP)和NMDA受体介导的兴奋性突触后电流降低,而且,海马CA1区的ERK和CREB的磷酸化水平下降。PN-ZB20KO小鼠DRG发育未见明显异常,TRP通道家族TRPV1,TRPA1和TRPM8表达显著降低,而且这些通道激动剂诱发的钙内流以及通道电流下降。PN-ZB20KO小鼠对热刺激、机械刺激和免疫刺激引起的疼痛反应减弱。上述结果表明海马CA1区ZBTB20在LTP和记忆形成中起着重要的作用,其机制通过调节NMDAR的激活和下游的ERK和CREB的激活。ZBTB20可通过调节伤害性感受神经元TRP通道的表达调控伤害感受和痛觉。

关键词：锌指蛋白学习记忆疼痛神经元

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光刺激体外培养的NG2细胞对海马神经元内Ca^(2+)活性和电活动的影响

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转化医学杂志 2015年第4期4卷 208-212页

作者：郭大志刘怿君潘树义何成段树民海军总医院高压氧科北京100048 浙江大学神经科学研究所浙江杭州310058 第二军医大学神经生物学教研室上海200433

目的观察选择性光刺激NG2细胞对海马神经元内Ca2+活性和电活动的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法体外纯化培养新生SD大鼠NG2细胞,通过脂质体转染的方法,在NG2细胞中特异性表达光敏感通道(channelrhodopsin-2,ChR2)蛋白DNA,并与体... 详细信息

目的观察选择性光刺激NG2细胞对海马神经元内Ca2+活性和电活动的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法体外纯化培养新生SD大鼠NG2细胞,通过脂质体转染的方法,在NG2细胞中特异性表达光敏感通道(channelrhodopsin-2,ChR2)蛋白DNA,并与体外培养7 d的海马神经元共培养48 h,采用蓝光(470 nm、5 s、5 m W/cm2)选择性刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞,利用Ca2+成像和电生理的方法记录NG2细胞周围海马神经元中的Ca2+浓度变化和电流改变情况,同时比较加入/未加入γ-氨基丁酸A型受体抑制剂情况下神经元的电流变化特点。结果当蓝光刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞后,首先NG2细胞内的Ca2+信号增强,随后其周围海马神经元内的Ca2+升高约20%;Ca2+缓慢下降后再次出现一个Ca2+峰,幅度较第1次小;NG2细胞周围海马神经元的电流频率增加,振幅增大。而当预先在细胞外液中加入50μmol/Lγ-氨基丁酸A受体抑制剂后,海马神经元的电流频率和振幅较未加抑制剂组明显减小(P<0.05)。结论选择性光刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞可使其兴奋,且可能通过释放γ-氨基丁酸来调节神经元活动。

关键词： NG2细胞光敏感通道神经元 γ-氨基丁酸

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小鼠成胚胎成纤维细胞重编程为肝干细胞

小鼠成胚胎成纤维细胞重编程为肝干细胞

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中国细胞生物学学会2015年全国学术大会

作者：于兵何志颖攸璞韩庆旺陈费王敏君王欣胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学干细胞与医学研究中心上海200433 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010070

谱系重编程是指将已经分化成熟的细胞转换为另一种成熟细胞或干/祖细胞,而不经过多能性干细胞阶段的重编程策略。本研究以谱系重编程的方法,用Hnf1β和Foxa3两个转录因子将小鼠胚胎成纤维细胞诱导转分化为诱导型肝干细胞(inducedhepatic... 详细信息

谱系重编程是指将已经分化成熟的细胞转换为另一种成熟细胞或干/祖细胞,而不经过多能性干细胞阶段的重编程策略。本研究以谱系重编程的方法,用Hnf1β和Foxa3两个转录因子将小鼠胚胎成纤维细胞诱导转分化为诱导型肝干细胞(inducedhepatic stem cells,iHepSCs),iHepSCs表达肝干细胞的标志物(EpCAM,Lgr5,Sox9),但不表达成熟肝细胞的功能性标志物(G6pd,Tat,Aat)。

关键词：肝干细胞肝细胞胆管细胞重编程细胞移植

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透射电镜生物样品常规制备中定位技术的探讨

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解剖学杂志 2014年第6期37卷 823-824页

作者：范晓燕林方兴杨勇骥第二军医大学基础部生物物理学教研室暨电镜中心上海200433

由于电子显微镜的放大倍率很高,所观察到的视野又很小,因此,在透射电镜生物样品制备过程中,对拟观察样品的感兴趣部位作精确定位,就显得尤为重要.样品所定位置是否准确、定位质量的好坏,将直接影响超薄切片的质量及样品的电镜观察.

关键词：电镜生物样品制备过程定位技术透射电子显微镜放大倍率精确定位电镜观察

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锌指蛋白ZBTB20在学习记忆和疼痛中的作用及其机制研究

锌指蛋白ZBTB20在学习记忆和疼痛中的作用及其机制研究

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中国生理学会张锡钧基金第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流会暨中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：任安经张欢汪凯麻献华 John N.Wood David Z.He 丁玉强袁文俊谢志芳章卫平第二军医大学病理生理学教研室上海200433 英国伦敦大学生物学系伦敦WC1E 6BT 美国克瑞顿大学生物医学系奥马哈68102 同济大学医学院解剖和神经生物学系上海200092 宁夏医科大学生理学和神经生物学系宁夏银川750004 第二军医大学病理生理学教研室上海200433 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433

锌指蛋白ZBTB20是章卫平教授课题组自主克隆、并在国际上率先报道的新转录因子,全身ZBTB20基因敲除可导致小鼠低血糖、未成年死亡和海马发育严重障碍,ZBTB20在神经系统中高表达,但ZBTB20在神经系统的生物学功能还知之甚少.我们利用基因... 详细信息

锌指蛋白ZBTB20是章卫平教授课题组自主克隆、并在国际上率先报道的新转录因子,全身ZBTB20基因敲除可导致小鼠低血糖、未成年死亡和海马发育严重障碍,ZBTB20在神经系统中高表达,但ZBTB20在神经系统的生物学功能还知之甚少.我们利用基因打靶技术分别建立了海马CA1区特异性ZBTB20敲除(CA1-ZB20KO)和外周伤害性感受神经元特异性ZBTB20敲除(peripheral nociceptor-specific ZBTB20 knockout,PN-ZB20KO)小鼠.研究发现CA1-ZB20KO小鼠海马的结构、发育和基础突触兴奋性未出现明显异常,但海马依赖性学习记忆能力明显下降,长时程(LTP)和NMDA受体介导的兴奋性突触后电流降低,而且,海马CA1区的ERK和CREB的磷酸化水平下降.PN-ZB20KO小鼠DRG发育未见明显异常,TRP通道家族TRPV1,TRPA1和TRPM8表达显著降低,而且这些通道激动剂诱发的钙内流以及通道电流下降.PN-ZB20KO小鼠对热刺激、机械刺激和免疫刺激引起的疼痛反应减弱.上述结果表明海马CA1区ZBTB20在LTP和记忆形成中起着重要的作用,其机制通过调节NMDAR的激活和下游的ERK和CREB的激活.ZBTB20可通过调节伤害性感受神经元TRP通道的表达调控伤害感受和痛觉.

关键词：锌指蛋白学习记忆疼痛神经元

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活性氧对背根神经节P2X3受体介导的痛信号功能的影响

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第二军医大学学报 2014年第4期35卷 443-446页

作者：吕虎徐娟娟陈辉许华孙继虎蔡志扬熊源长第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础部生理学教研室上海200433 武警8710部队医院麻醉科莆田351133

目的探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)对P2X3受体介导的神经病理性疼痛作用的影响。方法用成年雌性SD大鼠建立背根神经节慢性压迫(CCD)神经病理性疼痛模型,建模成功后随机分为4组(每组10只),经腹腔分别注射生理盐水(NS)、PBN 10... 详细信息

目的探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)对P2X3受体介导的神经病理性疼痛作用的影响。方法用成年雌性SD大鼠建立背根神经节慢性压迫(CCD)神经病理性疼痛模型,建模成功后随机分为4组(每组10只),经腹腔分别注射生理盐水(NS)、PBN 100mg/kg、PBN 30mg/kg、PBN 10mg/kg,给药30min后,经足底注射P2X3受体特异性激动剂α,β-meATP 50nmol,体积为50μL,持续观察注射后15min内的自发缩足次数和主动悬足时间,并整合计算每2min内的综合悬足时间(PLTPM)。结果 PBN能够剂量依赖性抑制由α,β-meATP引发的自发性痛行为,与NS组比较,PBN100mg/kg组在前6min内能明显抑制自发性疼痛,差异具有统计学意义(P<0.05),而PBN 30mg/kg组大鼠仅在2至4min时间单位表现出差异有统计学意义(P<0.05)。结论氧自由基清除剂可以有效缓解由CCD模型引发的神经病理性疼痛及P2X3受体激动剂诱发的自发痛,ROS可能作为信号分子参与了P2X3受体介导的痛觉信息的传递。

关键词：活性氧 P2X3受体背根神经节慢性压迫神经病理性疼痛自由基清除剂

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我国航海医学科学研究的可视化分析

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中华航海医学与高气压医学杂志 2014年第6期21卷 401-405页

作者：宋茂海贾泽军孟宪奎邓晓群第二军医大学基础部生物信息学教研室上海200433 《第二军医大学学报》编辑部上海200433 海军北海舰队门诊部

目的通过对我国航海医学领域的中文科技论文进行文献计量分析,对该学科的研究热点、核心群体、核心作者及合作关系等进行可视化分析.方法以重庆维普中文科技期刊数据库、中国知网学术期刊全文数据库、万方数据学术期刊数据库为统计来... 详细信息

目的通过对我国航海医学领域的中文科技论文进行文献计量分析,对该学科的研究热点、核心群体、核心作者及合作关系等进行可视化分析.方法以重庆维普中文科技期刊数据库、中国知网学术期刊全文数据库、万方数据学术期刊数据库为统计来源,以“关键词=海军医学”或“关键词=航海医学”或“分类号=R83”为检索式,对上述3个数据库收录的1995-2013年间发表的航海学科文献进行检索及计量分析,考察航海学科论文的时间分布、期刊分布、机构分布和作者分布情况.进一步利用Bibexcel软件生成关键词共词矩阵,再用SPSS 19.0软件进行聚类分析,考察研究热点分布;利用NetDraw绘制网络图谱,考察研究群体的活跃程度及合作情况.结果共检索到符合要求的论文2 461篇;该学科论文合著率为80.3％,作者合作度为3.77,单位合作度为1.63,普赖斯指数为48.5％,核心团体有12个,热点领域有6类.结论我国航海医学的专业期刊和研究群体以军队院校和军队医院为核心,研究领域以海上急救、航海心理、晕船防治、航海卫生、海水淹溺和高压氧医疗为热点,以团队合作为主要研究方式.

关键词：文献计量学航海医学信息可视化

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下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第5期30卷 471-475页

作者：周春辉杨帆席文锦魏铭郑国旭王微杨安钢张剑宁温伟红海军总医院神经外科北京100037 第二军医大学研究生院上海200433 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710032 第四军医大学西京医院泌尿外科陕西西安710032

目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF... 详细信息

目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。

关键词： RNF2 胶质瘤 RNA干扰放射敏感性

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中华按蚊丝氨酸蛋白酶抑制因子14(SRPN14)基因的多态性和进化研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第4期33卷 241-246页

作者：冯欣宇马雅军徐建农梁江涛夏爱第二军医大学热带医学与公共卫生系热带传染病学教研室上海200433 美国新墨西哥州立大学生物系拉斯克鲁塞斯88003 南京农业大学昆虫学系南京210095 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的鉴定和定位中华按蚊丝氨酸蛋白酶抑制因子14（SRPN14）基因，分析其在不同群体中的多态性，以及进化中的选择压力。方法依据中华按蚊基因组测序数据，设计引物，建立扩增SRPN14基因部分片段的体系，荧光原位杂交进行染色体定... 详细信息

目的鉴定和定位中华按蚊丝氨酸蛋白酶抑制因子14（SRPN14）基因，分析其在不同群体中的多态性，以及进化中的选择压力。方法依据中华按蚊基因组测序数据，设计引物，建立扩增SRPN14基因部分片段的体系，荧光原位杂交进行染色体定位。测定采自我国12省（市）18个采集地的中华按蚊群体的SRPN14基因部分片段序列，计算其在群体内与群体间的遗传差异，以及适应性进化的选择压力。结果本研究获得的中华按蚊SRPN14基因部分序列长度为429 bp，与冈比亚按蚊SRPN14基因的对应位置在核苷酸和氨基酸水平的序列一致性分别为77%和88%，位于唾腺染色体的2L：23C亚区。采自我国13个群体411个个体中，SRPN14的等位基因数目共204个，其中51个在群体间共享，占25.00%。13个群体的中华按蚊SRPN14等位基因数目范围为11（辽宁群体LN）-33（重庆群体CQ），核苷酸多态性为0.008（LN）-0.024（海南群体HAN）。AMOVA分析结果显示，群体内变异显著大于群体间，群体内变异占总变异的95.79%，群体间差异小，遗传分化指数（FST）值为0.042。中华按蚊各群体SRPN14基因核苷酸同义替换位点数明显多于非同义替换位点数，ω均小于1。结论 SRPN14基因在中华按蚊群体中存在一定的多态性，其进化受到负选择压力。

关键词：中华按蚊丝氨酸蛋白酶抑制因子14 多态性进化

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不同发育阶段视神经移植物对横断成年大鼠视神经再生修复的影响

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西部医学 2015年第6期27卷 802-806页

作者：何家全杨忠蔡文琴川北医学院第二临床医学院南充市中心医院神经外科四川南充637000 第三军医大学基础部组织胚胎学教研室重庆400038

目的观察不同发育阶段大鼠视神经移植物对成年大鼠中枢神经损伤再生的影响。方法将不同发育阶段的视神经移植到成年大鼠视神经的断端,并与其自身的坐骨神经移植物作对照,运用HE染色、镀银染色及神经示踪等方法观察不同发育阶段大鼠的视... 详细信息

目的观察不同发育阶段大鼠视神经移植物对成年大鼠中枢神经损伤再生的影响。方法将不同发育阶段的视神经移植到成年大鼠视神经的断端,并与其自身的坐骨神经移植物作对照,运用HE染色、镀银染色及神经示踪等方法观察不同发育阶段大鼠的视神经移植物对成年大鼠横断视神经修复的影响。结果胚胎18天大鼠视神经移植物与坐骨神经移植物一样,在移植到成年大鼠视神经后20天,有大量的轴突穿过了移植区,经HRP伤侧眼球内注射顺行示踪显示,在视神经到达的靶区上丘出现了阳性标记的神经元,但这种现象在出生后大鼠视神经移植物的移植后从未见到,但如果移植物愈早,那么成年大鼠视神经近侧断端长出的纤维就愈多愈长。结论在大鼠中枢神经系统成熟少突胶质细胞的膜上可能存在着抑制神经元突起生长的物质,这些物质可抑制损伤中枢神经系统神经纤维的再生延长及功能重建。

关键词：视神经移植中枢神经系统损伤再生

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