检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2006年第7期27卷 474-478页

作者：冀凯宏熊俊向正华胡凯猛王英刘厚奇第二军医大学发育生物学研究中心组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学发育生物学研究中心生物化学教研室上海200433

目的优化培养条件,获得体外克隆化培养的成年大鼠骨髓多能成体祖细胞(rMAPC),并对其进行表型分析及分化潜能鉴定。方法选择低血清条件培养基全骨髓直接贴壁法初步分离大鼠骨髓干细胞,用极限稀释法进行克隆化培养;用流式细胞术及免疫细... 详细信息

目的优化培养条件,获得体外克隆化培养的成年大鼠骨髓多能成体祖细胞(rMAPC),并对其进行表型分析及分化潜能鉴定。方法选择低血清条件培养基全骨髓直接贴壁法初步分离大鼠骨髓干细胞,用极限稀释法进行克隆化培养;用流式细胞术及免疫细胞化学法对克隆化培养的 rMAPC 进行表型分析,并进行体外成脂肪、成骨及成神经细胞诱导,RT-PCR 检测 Oct 4及三个胚层早期标志物,确定其表型及分化潜能。结果单个细胞来源 rMAPC 在体外扩增至20代仍保持良好的生长状态;流式细胞术及细胞免疫组化检测结果显示 CD71、α-SMA 及 Vimentin 表达阳性;CD34、CD44、CD45表达阴性;细胞周期分析显示 S+G_2+M 期细胞约占17%,而处于 G_0/G_1期的细胞占83%:rMAPC 体外可被诱导向脂肪细胞、骨细胞及神经细胞分化;RT-PCR 检测到 Oct 4及三个胚层早期标志物的表达。结论体外克隆化培养的 rMAPC 能维持良好的干细胞生物学特性。

关键词：骨髓多能成体祖细胞单克隆培养

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LIF受体胞内功能域调节白血病细胞增殖分化

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第二军医大学学报 2007年第11期28卷 1165-1168页

作者：姚云王静刘厚奇第二军医大学基础部组织胚胎学教研室发育生物学研究中心上海200433

目的:探讨白血病抑制因子受体(LIFR)浕亚基胞内游离功能域gp190CT3对启动靶细胞内信号转导通路(JAK/STAT3),使白血病细胞HL-60向粒细胞方向分化的作用。方法:采用免疫细胞化学、RT-PCR以及流式细胞术等技术和方法,观测pcDNA3.0-gp190CT... 详细信息

目的:探讨白血病抑制因子受体(LIFR)浕亚基胞内游离功能域gp190CT3对启动靶细胞内信号转导通路(JAK/STAT3),使白血病细胞HL-60向粒细胞方向分化的作用。方法:采用免疫细胞化学、RT-PCR以及流式细胞术等技术和方法,观测pcDNA3.0-gp190CT3重组质粒稳定转染CHO细胞中靶基因的表达;以及稳定转染的CHO细胞与HL-60细胞共培养后,HL-60细胞的形态学、STAT3磷酸化水平、细胞表面抗原CD15表达的变化。结果:(1)重组质粒转染的CHO细胞表达目的基因gp190CT3,并获得稳定表达目的基因的细胞株;(2)重组质粒转染的CHO细胞与野生型HL-60细胞共培养可使HL-60细胞体积变大,形态不规则,STAT3磷酸化水平和细胞表面抗原CD15表达升高。结论:LIF受体α亚基胞内游离片段表达的功能蛋白gp190CT3能够启动靶细胞内JAK/STAT3信号转导通路,从而发挥其调节白血病细胞增殖分化的效能。

关键词：白血病白血病抑制因子受体细胞分化信号转导

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黑素瘤细胞诱导人胚上皮干细胞的恶性转化

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第二军医大学学报 2007年第11期28卷 1161-1164页

作者：孙红玉胡凯猛刘厚奇第二军医大学基础部组织胚胎学教研室发育生物学研究中心上海200433

目的:探索体外肿瘤微环境中正常成体干细胞是否可以发生恶性转化而具有相关肿瘤学特性。方法:利用共培养池建立黑素瘤A-375细胞诱导表皮干细胞转化的模型,应用相差显微镜观察诱导前后表皮干细胞形态变化,免疫荧光法检测诱导后表皮干细... 详细信息

目的:探索体外肿瘤微环境中正常成体干细胞是否可以发生恶性转化而具有相关肿瘤学特性。方法:利用共培养池建立黑素瘤A-375细胞诱导表皮干细胞转化的模型,应用相差显微镜观察诱导前后表皮干细胞形态变化,免疫荧光法检测诱导后表皮干细胞E-钙黏着蛋白、肿瘤相关抗原P53突变蛋白的表达变化和双层软琼脂实验鉴定诱导后表皮干细胞克隆形成能力情况。结果:7d后与黑素瘤细胞A-375直接接触共培养的表皮干细胞开始克隆样生长,细胞E-钙黏着蛋白表达下降,部分细胞表达P53突变蛋白,软琼脂培养克隆形成率为0.55%。结论:表皮干细胞经黑素瘤细胞直接诱导后,可以具有肿瘤细胞的相关生物学特性。结果表明,肿瘤微环境可以造成干细胞自我更新能力的失控。

关键词：黑素瘤表皮干细胞肿瘤干细胞钙黏着蛋白蛋白质P53 突变

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人皮下脂肪来源脂肪干细胞的分离培养及鉴定

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第二军医大学学报 2007年第8期28卷 813-816页

作者：张迅轶仵敏娟刘厚奇第二军医大学基础部组织胚胎学教研室发育生物学研究所上海200433

目的:建立从切除得到的人皮下脂肪组织分离及培养脂肪干细胞(ADSC)的方法。方法:以人皮下脂肪组织为材料来源,分离、培养、扩增ADSC,并应用针对相对特异性分子的免疫组化、流式细胞术及多向诱导分化等方法鉴定干细胞特性。结果:本实验... 详细信息

目的:建立从切除得到的人皮下脂肪组织分离及培养脂肪干细胞(ADSC)的方法。方法:以人皮下脂肪组织为材料来源,分离、培养、扩增ADSC,并应用针对相对特异性分子的免疫组化、流式细胞术及多向诱导分化等方法鉴定干细胞特性。结果:本实验培养的ADSC具有干细胞生长特性并表达相对特异分子,有多向分化的潜能,并且具有遗传稳定性。结论:从切取的人皮下脂肪组织可成功分离得到ADSC,为组织工程提供了新的来源丰富、提取方便的种子细胞。

关键词：脂肪组织间质干细胞细胞分离组织工程

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人参皂苷Rh2对白血病HL60细胞生长的调节作用

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中华中医药杂志 2013年第3期28卷 798-801页

作者：姚云蒋俊锋王强利赵英侠郭春荣王奕徐维蓉上海中医药大学组织胚胎学教研室上海201203 第二军医大学基础部组织胚胎学教研室发育生物学研究中心上海200433

目的:观察人参皂苷Rh2对人白血病细胞株HL60增殖及凋亡的调节作用。方法:利用流式细胞术检测白血病细胞株HL60在人参皂苷Rh2处理过程中细胞增殖周期的改变及凋亡发生的情况;另一方面通过动物实验,将药物处理前后的细胞株注射裸鼠,验证... 详细信息

目的:观察人参皂苷Rh2对人白血病细胞株HL60增殖及凋亡的调节作用。方法:利用流式细胞术检测白血病细胞株HL60在人参皂苷Rh2处理过程中细胞增殖周期的改变及凋亡发生的情况;另一方面通过动物实验,将药物处理前后的细胞株注射裸鼠,验证该药物是否能够有效抑制HL60细胞在动物体内的恶性增殖及白血病症状。结果:药物处理后的HL60细胞在G1期比例降低,S期比例显著升高(P<0.05),药物处理后HL60细胞早期及中晚期细胞凋亡率为40%左右,明显高于未处理组HL60细胞,人参皂苷Rh2通过介导S期阻滞作用从而使HL60细胞进入凋亡程序。通过动物实验证明了人参皂苷Rh2能够抑制HL60细胞在体内的恶性增殖。结论:人参皂苷Rh2能够抑制人白血病细胞株HL60的恶性增殖并促进其发生凋亡。

关键词：人参皂苷Rh2 白血病细胞增殖细胞凋亡

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190CT3-myc融合多肽的制备及鉴定

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第11期30卷 1348-1351,1371页

作者：姚云姜丹丹孙擎刘厚奇上海中医药大学组织胚胎学教研室上海201203 上海达安医学检测中心科研部上海201203 第二军医大学基础部组织胚胎学教研室发育生物学研究中心上海200433

目的通过基因重组的方法构建带有myc标签的190CT3功能多肽(190CT3-myc)。方法采用PCR技术对编码190CT3-myc融合多肽的cDNA序列进行扩增,克隆于T载体上,酶切及测序鉴定正确后构建带有myc标签的190CT3真核表达载体,通过脂质体转染入中国... 详细信息

目的通过基因重组的方法构建带有myc标签的190CT3功能多肽(190CT3-myc)。方法采用PCR技术对编码190CT3-myc融合多肽的cDNA序列进行扩增,克隆于T载体上,酶切及测序鉴定正确后构建带有myc标签的190CT3真核表达载体,通过脂质体转染入中国仓鼠卵巢癌(CHO)细胞中;经G418筛选,获得稳定表达目的基因的CHO细胞株,免疫荧光化学法鉴定。应用抗原抗体亲和层析柱纯化190CT3-myc融合多肽,SDS-PAGE后考马斯亮蓝染色和Westernblotting分析鉴定。结果 PCR扩增得到编码为190CT3-myc的cDNA片段,经酶切和测序鉴定正确。免疫荧光化学法鉴定显示,转染重组质粒的CHO细胞稳定表达190CT3-myc。考马斯亮蓝染色显示,融合多肽190CT3-myc表达量占细胞总蛋白的10%左右,纯度≥90%;Western blotting分析表明,纯化融合多肽的相对分子量约为17000,与目的蛋白大小相符。结论成功制备190CT3-myc重组多肽,为抗白血病分子医药研究提供了新的思路。

关键词：融合多肽真核表达载体转染蛋白纯化

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肿瘤微环境与趋化因子家族

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国外医学（肿瘤学分册） 2005年第4期32卷 246-250页

作者：胡凯猛熊俊刘厚奇第二军医大学发育生物学研究中心组织胚胎学教研室上海200433

肿瘤微环境中趋化因子及其受体在以下几个方面影响着肿瘤的生长与转移:调控免疫细胞向肿瘤组织的迁移;影响机体对肿瘤细胞的清除能力;调节肿瘤组织的血管新生;刺激肿瘤以自分泌或旁分泌形式产生生长分子;影响肿瘤细胞的浸润和转移。现... 详细信息

肿瘤微环境中趋化因子及其受体在以下几个方面影响着肿瘤的生长与转移:调控免疫细胞向肿瘤组织的迁移;影响机体对肿瘤细胞的清除能力;调节肿瘤组织的血管新生;刺激肿瘤以自分泌或旁分泌形式产生生长分子;影响肿瘤细胞的浸润和转移。现综述近年来有关趋化因子及其受体与肿瘤细胞免疫逃逸,以及在肿瘤免疫治疗等方面的研究进展。

关键词：趋化因子免疫耐受肿瘤逃逸

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连接黏附分子A的研究进展

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生命科学 2013年第9期25卷 865-870页

作者：周童仵敏娟第二军医大学临床医学系 2009级五年制上海200433 第二军医大学发育生物学研究中心基础医学部组织胚胎学教研室上海200433

连接黏附分子A(junctional adhesion moleculeA,JAM-A)属于免疫球蛋白超家族,是一种跨膜蛋白,在胚胎发育、正常组织结构维持、炎症与免疫应答、创伤修复、肿瘤转移等多种生理病理过程中具有重要作用。JAM-A具有跨膜结构的I型膜蛋白,胞... 详细信息

连接黏附分子A(junctional adhesion moleculeA,JAM-A)属于免疫球蛋白超家族,是一种跨膜蛋白,在胚胎发育、正常组织结构维持、炎症与免疫应答、创伤修复、肿瘤转移等多种生理病理过程中具有重要作用。JAM-A具有跨膜结构的I型膜蛋白,胞外有两个V型的免疫球蛋白环样结构,可通过顺式二聚体与胞内PDZ结构域结合,执行不同生物学功能。有关JAM-A和生物学功能的研究很多,其在不同种系细胞增殖中截然相反的作用更是引起大家的关注。就JAM-A在细胞增殖、肿瘤迁移和炎症性肠炎等三方面的研究进展作一综述。

关键词：连接黏附分子A 细胞增殖肿瘤转移

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