检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：李文林苏娟陶欣荣姚玉成王新民李建秀胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

利用两步胶原酶消化法,从倒千里光碱损伤的小鼠再生肝脏中分离并建立克隆化的上皮样肝祖细胞系(livei progenitor cell lines,LEPCs)。该细胞系不仅表达肝干细胞／卵园细胞的标志分子,如 CK19,c-kit,Thy-1;而且在体外具有双向分化潜能。... 详细信息

利用两步胶原酶消化法,从倒千里光碱损伤的小鼠再生肝脏中分离并建立克隆化的上皮样肝祖细胞系(livei progenitor cell lines,LEPCs)。该细胞系不仅表达肝干细胞／卵园细胞的标志分子,如 CK19,c-kit,Thy-1;而且在体外具有双向分化潜能。当LEPCs在Matrigel中聚团生长时,添加50ng／ml 的表皮细胞生长因子可使LEPCs定向分化为成熟的肝细胞;而在20ng／ml的肝细胞生长因子的作用下LEPCs向胆管细胞分化。当把LEPCs移植到四氯化碳损伤的小鼠肝脏后,LEPCs可以在小鼠肝脏实质中整合并分化为成熟的肝细胞。以上结果表明LEPCs具有肝干细胞的基本特征。该细胞系的建立不仅为研究肝脏发育过程的分子机制提供了良好的细胞模型,而且可以用于研究肝干细胞在肝脏相关疾病细胞治疗方面的潜在应用价值。

关键词：肝干细胞双向分化

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肝癌细胞中存在SP细胞

肝癌细胞中存在SP细胞

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：张朵朱海英谢东莆胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

SP细胞是指能够将进入细胞核的荧光染料Hoechst33342排出胞外的一类细胞。它是1996年 Goodell等在研究造血干细胞时发现的。现已在多种生物的多种组织中检测到有SP细胞的存在,并且它们在表面分子标志以及功能方面与相应的组织干细胞具... 详细信息

SP细胞是指能够将进入细胞核的荧光染料Hoechst33342排出胞外的一类细胞。它是1996年 Goodell等在研究造血干细胞时发现的。现已在多种生物的多种组织中检测到有SP细胞的存在,并且它们在表面分子标志以及功能方面与相应的组织干细胞具有一致性。癌干细胞是指异体移植后能够重新形成肿瘤组织,并且具有自我更新和分化潜能的一类肿瘤细胞。目前在乳腺癌细胞系、脑瘤细胞系、肺癌细胞系以及原代分离的胶质瘤细胞中都检测到了SP细胞的存在,推测它可能是一类癌于细胞。在本研究中,不仅在药物诱导的小鼠肝癌组织中检测到了SP细胞的存在,而且在人肝癌细胞系P2-HCC和PRIM-HCC1中也检测到了SP细胞的存在。进一步的研究结果显示:P2-HCC中的 sP细胞比non-SP细胞具有更高的增殖能力,并且SP细胞可以进行不对称分裂,即SP细胞可以增殖形成SP细胞和non-SP细胞。此外还发现具有SP细胞的肝癌细胞系P2-HCC在多方面表现了癌干细胞的特性,例如具有强大的肿瘤形成能力以及分化潜能等。本课题的研究为研究肿瘤细胞中的sP 细胞与癌干细胞的关系以及肝癌干细胞的存在提供了一个很好的实验基础。

关键词：肝癌细胞 HCC

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乙型肝炎病毒preS2蛋白在Hela细胞中的表达

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延边大学医学学报 2005年第4期28卷 245-248页

作者：金艳花杨康鹃张子波金雄吉胡以平延边大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室第二军医大学细胞生物学教研室

[目的]构建乙型肝炎病毒含3′末端缺失的preS/S基因表达载体并转染细胞,观察所构建载体在体外培养的真核细胞中的表达.[方法]采用基因重组技术构建含有CMV启动子及preS/S基因(adr亚型)开放阅读框的preS/S基因表达载体pcDNA 3.1-preS/St... 详细信息

[目的]构建乙型肝炎病毒含3′末端缺失的preS/S基因表达载体并转染细胞,观察所构建载体在体外培养的真核细胞中的表达.[方法]采用基因重组技术构建含有CMV启动子及preS/S基因(adr亚型)开放阅读框的preS/S基因表达载体pcDNA 3.1-preS/St,并将其转染至Hela细胞,利用免疫细胞化学方法检测其表达情况.[结果]免疫细胞化学检测发现preS 2蛋白可在Hela细胞中表达.

关键词：乙型肝炎病毒蛋白,preS2 癌,肝细胞

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变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

变性高压液相层析技术在遗传性多囊肾病突变检测中的应用

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：张树忠胡以平梅长林第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海长征医院肾内科

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导... 详细信息

常染色体显性遗传型多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种十分常见、但目前尚缺乏有效治疗手段的遗传性肾脏疾病。其发病与Ⅰ、Ⅱ型致病基因(PKD1、PKD2) 突变有关,其中85％ADPKD的发生由PKD1异常所导致。由于PKD1基因结构复杂及同源序列的干扰,使其突变检测不仅操作繁琐,而且影响了结果的准确性。本研究采用变性高压液相层析技术 (denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)分别对涵盖PKD1全部编码区(含46 个外显子)的72组PCR扩增片段进行分析,结果分别从85位健康者和19个汉族人ADPKD家系的67位家庭成员中检测出9个正常多态性位点和11个致病突变,后者包括8个错义突变、2个无义突变和1个移码突变,有10个致病突变是新发现的。突变检出率达到57．89％。并发现检出的突变存在以下特点:(1)突变散布在PKD1各外显子内,未见突变热点出现;(2)突变以DNA碱基转换为主;(3)大多数突变位于基因中GC重复序列区附近;(4)均以杂合基因的形式存在,支持“二次打击”致病假说;(5)致病突变常引发编码氨基酸所带电荷与亲水性的改变;(6)PKD1突变位点可能影响起病时的表现症状,尤其是同一家系的个体间表现更为突出。总之,同以前采用单链构象多态性方法(SSCP)相比,DHPLC分析技术不仅操作周期短,而且突变检出率明显提高,随着该检测条件的进一步完善和检测费用的降低,有望成为进行ADPKD患者发病前基因突变检测,甚至产前诊断的有效常规途径。

关键词：多囊肾病高压液相层析突变检测 ADPKD

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乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

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第五届国际转基因动物学术研讨会

作者：訾晓渊朱海英王新民马凤云张树忠胡以平张南熊俊巴月姚玉成黄洁李文林李建秀叶煦亭第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系为实验对象,从DNA、RNA、蛋白质、病毒学、病理学角度,综合研究了该品系转基因小鼠的生物学特性.

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠生物学特性

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氦氖激光穴位照射后缺氧缺血新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化

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中国临床康复 2005年第23期9卷 196-197页

作者：李宛青陈雪梅吴爱群刘伟刘华郑州师范高等专科学校生命科学系河南省郑州市450044 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室河南省郑州市450052 解放军第二军医大学解剖学教研室上海市200433 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所解剖与组织胚胎学系北京市100005 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南省郑州市450052

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄... 详细信息

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄不拘。随机分为3组,即假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组,每组10只。缺氧缺血组与激光穴位照射组动物均制作成缺氧缺血模型,在清醒状态下实施左侧颈总动脉结扎术,术后在室温中恢复1～4h后,置于常压缺氧仓中,通入8mL/L氧气、920mL/L氮气(体积比)的混合气体,2h后将动物取出。缺氧缺血组不加任何治疗。激光穴位照射组于缺氧缺血后第2天,采用氦氖激光照射百会、大椎两穴,功率4mW,光斑直径3mm,每次照射10min,1次/d,同一时间进行,10d为1个疗程,共3个疗程,各疗程间隔2d。百会穴在颅顶正中,大椎穴在C7～T1之间,背部正中。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,不缺氧。各组大鼠常规饲养34d后,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性,比色法测定丙二醛含量。结果:因缺氧缺血对动物造成了伤害,缺氧缺血组死亡3只,激光穴位照射组死亡2只。进入结果分析,假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组分别为10,7和8只。①大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性:缺氧缺血组显著低于假手术对照组和激光穴位照射组[(59.70±4.03)NU/mL,(76.24±2.43)NU/mL,(72.56±5.60)NU/mL,(t=5.03,4.83,P<0.05)]。②大鼠脑组织丙二醛含量:缺氧缺血组显著高于假手术对照组和激光穴位照射组[(267.58±30.55)mmol/L,(99.87±15.48)mmol/L,(135.29±32.76)mmol/L,(t=10.68,8.81,P<0.05)]。结论:氦氖激光穴位照射能提高、诱发缺氧缺血大鼠脑组织中超氧化物歧化酶的生成和活力,降低丙二醛水平。新生大鼠未成熟脑的可塑性较大,如果利用此关键时期进行氦氖激光穴位照射,可能对脑功能的恢复有一定帮助。

关键词：脑缺氧脑缺血氦氖激光超氧化物歧化酶丙二醛

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天鹅型记忆接骨器与钢板内固定术后软组织界膜的生物相容性

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第四军医大学学报 2004年第15期25卷 1394-1396页

作者：傅青格张春才许硕贵高堂成宝建中陆月良万岷王冠军第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室上海200433

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内... 详细信息

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内固定病例 1 3例经随访发现骨折取得骨性愈合后 ,于内固定取出术中取与金属密切接触的局部软组织进行大体标本观察、光镜和电子显微镜观察 .结果 :SMC组局部软组织结构致密规则 ,炎症反应较轻或无 ,微观结构观察见为规则致密的纤维结缔组织 ,成纤维细胞为主要细胞成分 ,细胞周围可见排列规则致密、纵横交错的胶原纤丝 ;钢板组软组织结构多数紊乱 ,局部组织发黑或发灰 ,微观结构观察胶原纤维增生 ,透明变性 ,结构紊乱 ,并有不同程度的炎性反应或异物反应 (异物巨细胞反应、纤维素样坏死 )存在 .结论 :SMC具有良好的生物相容性。

关键词：内固定镍钛形状记忆合金生物相容性

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大鼠肺缺血再灌注损伤引起肺细胞的凋亡

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 295-297页

作者：谢东甫秦雄徐志飞第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院胸心外科上海200003

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转... 详细信息

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的 d U TP缺口末端标记技术 (TU NEL)检测缺血再灌注损伤所引起的肺细胞凋亡的变化及其与再灌注时间的相关性 ;DNA电泳进行肺组织细胞 DNA片段分析 ;电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果 :在肺缺血再灌注后早期 (30 min)发生明显的肺细胞凋亡 ,凋亡细胞数峰值位于再灌注后 2 h,再灌注后 1 2 h凋亡细胞数与对照组无显著差别 ;缺血而无再灌注的肺细胞凋亡无明显变化。结论

关键词：大鼠肺缺血再灌注损伤肺细胞细胞凋亡

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乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠的建立

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郑州大学学报（医学版） 2004年第3期39卷 398-400页

作者：刘红张钦宪胡以平郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠。方法 :构建乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体pcDNA3 HBc ;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中 ,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管 ;取其产 1 0d龄... 详细信息

目的 :建立乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠。方法 :构建乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体pcDNA3 HBc ;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中 ,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管 ;取其产 1 0d龄子代鼠进行鉴定。结果与结论 :表达载体内切酶酶切及序列分析结果与预期一致 ;PCR鉴定转基因阳性小鼠比例为 2 5 % (6 / 2 4 )。

关键词：乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体转基因动物小鼠

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加压钢板与髓内钉影响骨折愈合血管形成的特点比较

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中国临床康复 2004年第14期8卷 2642-2643,F009页

作者：陈维华苏佳灿宋田斌上海市杨浦区市东医院骨科上海市200433 解放军第二军医大学长海医院骨科上海市200433 解放军第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室上海市200433

目的:对比加压钢板(CP)与髓内钉(IN)固定下骨折愈合过程的血管形成,探讨不同内固定下骨折愈合血管形成的特点。方法:42只家犬两侧股骨中段横型截骨,左侧以CP、右侧分别以IN固定,术后2,4,8周行X线摄片、光镜、电镜观察。结果:CP组骨折部... 详细信息

目的:对比加压钢板(CP)与髓内钉(IN)固定下骨折愈合过程的血管形成,探讨不同内固定下骨折愈合血管形成的特点。方法:42只家犬两侧股骨中段横型截骨,左侧以CP、右侧分别以IN固定,术后2,4,8周行X线摄片、光镜、电镜观察。结果:CP组骨折部位血管长入时间明显提前,血管数量较丰富,发育程度优于IN组,8周时CP组即可见完整血管内壁,内皮细胞发育成熟。结论:与IN相比,CP组骨折端血管长入的时间较早,数量较为丰富,保证骨折愈合所需营养成分的供给,有利于促进骨折愈合。

关键词：骨折固定术,内内皮,血管康复

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