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全国中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会暨浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十次学术年会

作者：苏佳灿张春才许硕贵王家林张雪松高堂成万岷宋田斌第二军医大学附属长海医院(上海) 第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室(上海)

骨折愈合离不开营养成分的提供,血管形成(angiogenesis)是骨折愈合的重要组成部分,一旦骨折部位血供遭到破坏或不能及时建立有效血液循环,将可能导致骨折断端的无菌性坏死、延迟愈合或骨不连.我们自行研制的SMC,在动物实验基础上,临床... 详细信息

骨折愈合离不开营养成分的提供,血管形成(angiogenesis)是骨折愈合的重要组成部分,一旦骨折部位血供遭到破坏或不能及时建立有效血液循环,将可能导致骨折断端的无菌性坏死、延迟愈合或骨不连.我们自行研制的SMC,在动物实验基础上,临床用于治疗各类长管状骨干骨折和骨不连,取得了很好的疗效,骨折愈合时间明显缩短,X线显示骨折端既无外骨痂形成,又未见板下骨质疏松.本研究结合X线检查、光镜、透射电镜对SMC、IN内固定治疗犬股骨中段骨折后,骨折愈合过程血管形成在形态学上进行了比较观察,以探讨记忆生物力学作用下骨折愈合过程中的血管形成特点.

关键词：骨折愈合记忆生物力学血管形成

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HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 47-50页

作者：余宏宇陈新龙宋维余永伟张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 长海医院烧伤科长征医院贵宾诊疗科长海医院病理科长海医院实验诊断科基础医学部细胞生物学教研室

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0... 详细信息

目的 :用乙型肝炎病毒 (HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及 HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答 ,以探讨其预防及治疗 HBV慢性感染的可行性。方法 :将 HBV S2 .S基因的真核表达载体 p CMV- S2 .S(PS)和相应的空载体 pc D-NA3.0分别免疫正常 C5 7BL/ 6小鼠及同一品系 HBV转基因小鼠 (n=5 )。每只小鼠肌内注射纯化质粒 1 0 0 μg。用 EL ISA方法检测小鼠血清抗 HBs和抗 pre S2效价及 HBV转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag的水平。注射基因疫苗后第 8周 ,活检取转基因小鼠肝脏组织 ,制备石蜡切片并行 H- E染色 ,光镜下观察其病理改变。结果 :PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗 HBs及抗pre S2 ,并且抗 pre S2的出现早于抗 HBs约 1～ 2周。PS免疫 8周后 ,转基因小鼠血清 HBs Ag和 HBe Ag为阴性。注射基因疫苗后第 8周病理检查转基因小鼠肝脏组织 ,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性 ,而相应的对照组无明显改变。免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化。结论 :研究表明 HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导 HBs Ag特异性的体液免疫应答 ,能够清除转基因小鼠血清中的 HBs Ag和 HBe Ag;初步的实验结果为研制治疗

关键词： HBV 基因疫苗转基因小鼠体液免疫免疫应答乙型肝炎病毒

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记忆生物力学作用下骨折愈合过程血管形成实验研究

记忆生物力学作用下骨折愈合过程血管形成实验研究

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全国中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十次学术年会

作者：苏佳灿张春才许硕贵王家林张雪松高堂成万岷宋田斌第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学附属长海医院第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室

骨折愈合离不开营养成分的提供,血管形成(angiogenesis)是骨折愈合的重要组成部分,一旦骨折部位血供遭到破坏或不能及时建立有效血液循环,将可能导致骨折断端的无菌性坏死、延迟愈合或骨不连。我们自行研制的SMC,在动物实验基础上,临床... 详细信息

骨折愈合离不开营养成分的提供,血管形成(angiogenesis)是骨折愈合的重要组成部分,一旦骨折部位血供遭到破坏或不能及时建立有效血液循环,将可能导致骨折断端的无菌性坏死、延迟愈合或骨不连。我们自行研制的SMC,在动物实验基础上,临床用于治疗各类长管状骨干骨折和骨不连,取得了很好的疗效,骨折愈合时间明显缩短,X线显示骨折端既无外骨痂形成,又未见板下骨质疏松。本研究结合X线检查、光镜、透射电镜对SMC、IN内固定治疗犬股骨中段骨折后,骨折愈合过程血管形成在形态学上进行了比较观察,以探讨记忆生物力学作用下骨折愈合过程中的血管形成特点。

关键词：骨折愈合过程骨不连接骨器 SMC 接骨板股骨干持骨部成骨细胞延迟愈合力学作用

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用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 145-147页

作者：胡火珍李丹李小玉姚玉成胡以平四川大学华西基础医学与法医学院细胞生物学教研室成都610041 上海第二军医大学细胞生物学教研室

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ... 详细信息

目的　探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒 X基因转基因小鼠的可行性。方法　构建乙肝病毒 X基因表达载体 pc DNA3- X;应用微量注射针将脂质体包裹的 pc DNA3- X表达载体直接注入 C57BL/ 6 N雄性小鼠睾丸的曲细精管内 ,于第一次注射后 6周 ,与雌鼠交配 ,用 PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源 DNA和肝组织中表达的 p X蛋白。结果　测序结果与文献报道一致 ,并且 X基因在 Hela细胞中表达 ;共产仔鼠 16只 ,其中 1只为阳性仔鼠 ,阳性率为 6 .2 5 %。结论　初步证明用精原干细胞介导法制备

关键词：乙肝病毒X基因转基因小鼠精原细胞

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重组乙型肝炎病毒变异s基因疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫应答

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 447-449,453页

作者：葛军辉刘惠敏何金李玉莉余宏宇叶忠张乐之胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法 :利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt5 87G→A的真核表达载体pCMV S2 .S +14 5R(PR)。用其转染人肝癌细胞系HepG2后 ,用EIA、ELISA... 详细信息

目的 :构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。方法 :利用限制性内切酶定位克隆构建s基因nt5 87G→A的真核表达载体pCMV S2 .S +14 5R(PR)。用其转染人肝癌细胞系HepG2后 ,用EIA、ELISA及免疫细胞化学法 ,观察其抗原性。以重组变异型s基因真核表达载体 (PR)和载体pcDNA3.0分别免疫C5 7BL/6小鼠各 5只。每只小鼠各肌肉注射纯化质粒 10 0 μg。用ELISA法检测血清抗 HBs及抗 HBs2抗体的效价。结果 :体外实验证实 ,变异型HBsAg可与抗 HBs结合 ;PR免疫小鼠可诱导其产生抗 HBs抗体及抗 HBs2抗体 ,但抗 HBs2抗体的出现早于抗 HBs抗体约 1～ 2wk。结论 :HBV变异s基因(nt5 87G→A)的真核表达载体的表达产物具有良好的抗原性 ,能够诱导C5

关键词：乙型肝炎表面抗原变异基因疫苗体液免疫应答

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电镜技术在病理学诊断中的应用

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 628-628,649页

作者：颜永碧陆月良王英第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

为摸索出适合临床超微结构病理诊断的电镜技术，更好地发挥其对疾病诊断的作用，现根据多年工作积累并结合临床实际，介绍本实验室在疾病诊断中电镜技术的应用情况。

关键词：病理学诊断电镜技术临床应用疾病诊断

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肾小球诊断样品由光镜的冰冻切片补做电镜制样的方法

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 60-60,69页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球病诊断的常规，尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而，有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺（肾穿）标本中找不到肾小球，但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光... 详细信息

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球病诊断的常规，尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而，有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺（肾穿）标本中找不到肾小球，但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光镜常规石蜡包埋的肾小球组织经脱蜡后改做电镜制样进行补救，但标本因固定和脱蜡等因素，效果并不太理想。我们通过摸索和比较几种补救措施，现介绍一种用冰冻切片的肾小球经光镜检测后再进行电镜制样的方法

关键词：肾小球冰冻切片电镜制样肾脏病诊断

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游离细胞内抗原的免疫电镜胶金标记方法

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 10-10,17页

作者：颜永碧王英陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大... 详细信息

免疫最镜胶金标记技术，经过20 多年的开发、探索，已经得到了广泛的发展与应用，特别是对于一些实质性组织细胞表面的标记，具有较好的标记效果~[1，2]。但是，如何做好游离细胞内的免疫最镜胶金标记，这方面的资料并不多。我们根据大量的工作积累，将游离细胞内免疫最镜标记方法的应用体会总结如下，以便与同道们相互交流。

关键词：游离细胞内抗原胶体金显微镜检查免疫组织化学

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敲除PKD1基因的小鼠胚胎干细胞的建立(英文)

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第二军医大学学报 2003年第1期24卷 5-10页

作者：郁胜强梅长林胡以平王新民第二军医大学长征医院肾内科上海200003 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,... 详细信息

目的 :通过 PK D1基因打靶载体的胚胎干细胞转染、药物筛选以及分子鉴定 ,获得发生同源重组的胚胎干细胞克隆 ,为产生 PK D 1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法 :体外培养小鼠胚胎干细胞 ,用电穿孔的方法进行 PK D1基因打靶载体的转移 ,并用 G4 18进行筛选培养 ,得到阳性克隆后 ,进一步扩大培养 ,抽提胚胎干细胞的基因组 DNA ,采用 DNA印迹法进行分子鉴定。结果 :经 G4 18筛选培养得到 192个阳性克隆 ,分子鉴定获得 2个发生同源重组的胚胎干细胞克隆。结论 :鉴定得到的 2个同源重组胚胎干细胞克隆 ,为进一步建立 PK

关键词：胚胎干细胞多囊肾病基因敲除

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硝酸银耳蜗光镜制片改做透射电镜样品的方法

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第二军医大学学报 2003年第9期24卷 936-936,940页

作者：张琰敏刁明芳颜永碧第二军医大学基础医学部生理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室

耳蜗标本的电镜制备难度较大，很难做出理想的标本。有关显示和制作耳蜗电镜标本方面的文章虽有很多，但大疗分资料是描述如何修正耳蜗螺旋器方向的定向、定位。本文介绍了同一份耳蜗标本，光镜观察与电镜观察相结合的样品制备方法。

关键词：硝酸银耳蜗光镜制片透射电镜

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