检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第6期21卷 537-540页

作者：卢洋黎怀星李建秀傅继梁第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分... 详细信息

目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分别移入 45只受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 44只 ,存活 35只 ,采用 PCR,PCR- Southern和基因组 Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠。以 4只经基因组 Southern杂交证实在基因组 DNA中整合有多拷贝结构完整的 p MTR1质粒的小鼠作Founder小鼠 ,进行转基因小鼠的建系工作。对每个 Founder小鼠已有的 F1代及 F2代转基因小鼠的基因组 DNA进行p MTR1质粒回收实验。结果 :从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的 p MTR1质粒。结论 :(1)建立了在基因组 DNA中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ;(2 )

关键词：转基因小鼠基因突变 PMTR1质粒

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TNF家族的新成员TRAIL cDNA的克隆及其在***中的表达

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癌变．畸变．突变 2000年第2期12卷 65-68页

作者：胡以平姚玉成第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的 :克隆Trail基因cDNA全长 ,构建Trail的原核表达载体 ,从而建立其原核表达体系。方法 :通过抽提外周血淋巴细胞总RNA进行RT -PCR克隆TrailcDNA ,构建Trail的原核表达载体 ,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定 ,以温度进行诱导表达 ,通过... 详细信息

目的 :克隆Trail基因cDNA全长 ,构建Trail的原核表达载体 ,从而建立其原核表达体系。方法 :通过抽提外周血淋巴细胞总RNA进行RT -PCR克隆TrailcDNA ,构建Trail的原核表达载体 ,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定 ,以温度进行诱导表达 ,通过SDS -page分析表达产物。结果 :(1)克隆了Trail基因cDNA全长 ,DNA测序结果与报道的完全一致 ;(2 )构建了Trail基因原核表达载体 ;(3)将构建好的载体转化相应的宿主菌 ,诱导后得到了Trail蛋白表达产物。结论 :Trail基因cDNA的克隆将对于其抗肿瘤作用研究有重要意义。

关键词： Trail 基因克隆原核表达

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微波技术在超微结构病理诊断标本制备中的应用

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海军军医大学学报 2000年第6期21卷 589-589页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室!上海200433

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知.但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断.近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备.结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足... 详细信息

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知.但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断.近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备.结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足电镜诊断要求.现已成为本室制备超微结构病理诊断标本的常规技术,介绍如下.

关键词：微波超微结构显微镜检查,电子

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视网膜表面膜的电镜标本制备方法

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海军军医大学学报 2000年第6期21卷 507-507页

作者：颜永碧谢志芳陆月良第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室!上海200433

病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,但其不仅组织薄,而且非常软,手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起,须飘浮在液体表面才能展开.视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次.为了能很好地观察表面膜组织中... 详细信息

病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,但其不仅组织薄,而且非常软,手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起,须飘浮在液体表面才能展开.视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次.为了能很好地观察表面膜组织中各种细胞形态及它们相互之间的关系,我们摸索出了一种简单、方便、易行的方法,现报告如下.

关键词：视网膜表面膜超薄切片显微镜检查,电子

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诊断电镜样品的快速制备方法

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电子显微学报 2000年第6期19卷 846-846页

作者：陆月良颜永碧第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

电镜作为生物科学研究和某些疾病病理检查的基本工具,已为科研工作者所熟知.但由于电镜样品制备的周期较长,影响了科研和检查的进度,特别对病理检查来说时间太长.近年来,随着诊断电镜学的发展,诊断电镜样品的快速制备方法受到国内外电... 详细信息

电镜作为生物科学研究和某些疾病病理检查的基本工具,已为科研工作者所熟知.但由于电镜样品制备的周期较长,影响了科研和检查的进度,特别对病理检查来说时间太长.近年来,随着诊断电镜学的发展,诊断电镜样品的快速制备方法受到国内外电镜工作者的关注.本文通过大量实验,摸索出一套比较满意的诊断电镜样品的快速制备方法.

关键词：电镜样品诊断快速制备病理检查

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镉离子诱发的氧自由基对肝细胞损伤及钙离子分布的影响

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中华预防医学杂志 2000年第4期34卷 256-256页

作者：叶煦亭沙继宏周雍杨勇骥胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海市200433

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糖皮质激素受体基因片段的克隆和目标载体的构建

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 726-728页

作者：姚玉成胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的：构建针对糖皮质激素受体（ＧＲ）基因第２外显子的目标载体，为获得糖皮质激素受体基因缺陷型胚胎干细胞准备条件。方法：通过限制性酶切对ＤＮＡ片段进行了结构分析，克隆相应ＤＮＡ片段进行ＤＮＡ序列测定，利用ｐＴＫ－Ｎｅ... 详细信息

目的：构建针对糖皮质激素受体（ＧＲ）基因第２外显子的目标载体，为获得糖皮质激素受体基因缺陷型胚胎干细胞准备条件。方法：通过限制性酶切对ＤＮＡ片段进行了结构分析，克隆相应ＤＮＡ片段进行ＤＮＡ序列测定，利用ｐＴＫ－Ｎｅｏ质粒框架和同源片段构建载体。结果：详细分析了ＧＲ基因第２外显子及其侧翼的基因组ＤＮＡ片段结构，克隆了同源片段，构建了目标载体。结论：这一载体的构建将为进一步建立ＧＲ基因剔除小鼠奠定基础。

关键词：糖皮质激素受体目标载体克隆 GR基因

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乙型肝炎病毒纯合子转基因小鼠(adr 1.2)的培育

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第二军医大学学报 1999年第9期20卷 598-600页

作者：胡卫江戴德顺李建秀王新民孙伟郝光荣胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学实验动物中心

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的ＨＢＶ转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生ｆｏｕｎｄｅｒ小鼠以后，将正常小鼠与转基因小鼠交配，通过ＰＣＲ，Ｄｏｔｂｌｏｔｔｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈ... 详细信息

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的ＨＢＶ转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生ｆｏｕｎｄｅｒ小鼠以后，将正常小鼠与转基因小鼠交配，通过ＰＣＲ，Ｄｏｔｂｌｏｔｔｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ等方法检测ＨＢＶＤＮＡ在转基因小鼠体内的整合状况，阳性率达５０％左右后，进行近亲交配。结果：共得到了７代ＨＢＶ转基因小鼠，其中包含有整合ＨＢＶ基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，并得到了整合有ＨＢＶ基因的纯合子转基因小鼠。

关键词：小鼠转基因纯合子乙型肝炎病毒

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乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 212-215页

作者：胡卫江李建秀余宏宇戴德顺王新民孙伟郝光荣王肖鹏胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学教保处实验动物中心

目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ... 详细信息

目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法，研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制。应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变。结果：得到了４只整合有ＨＢＶ基因组的建立者小鼠，并证明ＨＢＶ基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，在肝、肾组织内可特异性表达、复制，并在肝细胞内发现了Ｄａｎｅ颗粒。转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变。结论：获得了ＨＢＶ的转基因小鼠，其病毒基因可以表达，并有病毒颗粒形成。该小鼠对于ＨＢＶ的各个基因产物是免疫耐受的，其基本生物学特性与人类的ＨＢＶ携带者特征相似。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠 Dane颗粒 adr亚型

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早期补液对烧伤大鼠心脏心肌细胞及血管内皮细胞的影响

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第二军医大学学报 1999年第10期20卷 780-782页

作者：沙继宏叶煦亭唐洪泰郑尊杨勇骥第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 第二军医大学长海医院烧伤科

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管... 详细信息

目的：研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞（ＥＣ）的变化及早期补液对它们的影响。方法：应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法。结果：烧伤后０．５ｈ血管ＥＣ肿胀，烧伤后４ｈ血管ＥＣ可向血管腔伸出较长突起，血管腔外有明显渗出，心肌细胞线粒体明显肿胀。过氧化氢细胞化学反应为血管ＥＣ血管腔面有较多致密沉积物。烧伤后８ｈ心肌细胞及血管ＥＣ损伤进一步加重。补液组烧伤后１，４，８ｈ，心肌细胞及血管ＥＣ损伤明显减轻，过氧化氢细胞化学反应电子致密沉积物也较少。烧伤后８ｈ细胞损伤开始恢复，血管ＥＣ出现大量吞饮泡，血管外液体重吸收。结论：烧伤后心肌细胞及血管ＥＣ发生损伤，早期补液对损伤有明显减轻作用。

关键词：烧伤血管内皮细胞补液大鼠心肌细胞

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