检索结果-内蒙古大学图书馆

医学研究杂志 2011年第3期40卷 28-31页

作者：王燕周露婷章卫平谢志芳第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝... 详细信息

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。

关键词：小鼠肝细胞分离灌注原代培养

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当今医学细胞生物学教学框架中不容忽视的环节--肿瘤细胞

当今医学细胞生物学教学框架中不容忽视的环节--肿瘤细胞

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中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：张树患李文林苏娟李建秀张红霞胡以平第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

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生物技术专业细胞工程实验教学的设计与体会

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2011年第5期13卷 457-459页

作者：李建秀张红霞谢东甫訾晓渊胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

为了能使学生的专业技术能力得到强化训练、开拓学生视野、提高学生创新能力,按照新修订的《生物技术四年制本科人才培养方案》,结合学员的实际情况,设计并形成了一套开放性自主综合性实验教学体系,介绍了该实验体系的教学目标、教学内... 详细信息

为了能使学生的专业技术能力得到强化训练、开拓学生视野、提高学生创新能力,按照新修订的《生物技术四年制本科人才培养方案》,结合学员的实际情况,设计并形成了一套开放性自主综合性实验教学体系,介绍了该实验体系的教学目标、教学内容和教学体会。

关键词：细胞工程实验教学教学方法

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小鼠成熟T淋巴细胞的分离培养及其慢病毒转导效率的体外研究

小鼠成熟T淋巴细胞的分离培养及其慢病毒转导效率的体外研究

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：叶丽伟张树忠攸璞于兵胡以平上海第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海 200433

诱导性多能干细胞(IPS细胞)重编程研究中,如何选用来源便捷、数目充足的成熟体细胞为重编程靶细胞是当今IPS领域的热点之一.具备上述选材条件的外周血成熟T淋巴细胞却存在体外成活时间短和病毒转导效率极低等技术难题.目的本研究旨在... 详细信息

诱导性多能干细胞(IPS细胞)重编程研究中,如何选用来源便捷、数目充足的成熟体细胞为重编程靶细胞是当今IPS领域的热点之一.具备上述选材条件的外周血成熟T淋巴细胞却存在体外成活时间短和病毒转导效率极低等技术难题.目的本研究旨在建立适合小鼠成熟活化T淋巴细胞体外长时间培养以及慢病毒转导的技术平台.方法采用Ficoll梯度离心法分离小鼠外周血单个核细胞,分别用刀豆蛋白A(ConA)和Anti-CD3等方法活化T淋巴细胞,流式细胞法检测T细胞表面CD3+CD44highCD62Llow等活化标志,羧基荧光素双乙酸盐-琥珀酰亚胺酯(CFSE)示踪活化细胞分裂,超离纯化的GFP重组慢病毒直接转导上述T淋巴细胞.结果发现：可从3月龄的雌性Balb/c小鼠(SPF级)1ml外周血中分离到约2×106单个核细胞;96孔"U"型板经Anti-CD3、Anti-CD28(终浓度分别为2μg/ml、4μg/ml)包被后,可使2.0×105个细胞/孔在第三天(D3)迅速增殖至1.6×106个细胞/孑孔,活化T淋巴细胞占CD3+细胞总数的78.34％,且CFSE强阳性细胞由原来90.20％降至16.34％,该活化T淋巴细胞在含IL2(终浓度30ng/ml)CTL培养基中维持生长(D14后细胞数为1.5×106个细胞/孔);经纯化GFP重组慢病毒转导上述T淋巴细胞3d后,GFP阳性率达35.41％.有关进一步提高慢病毒对该T淋巴细胞转导效率的研究目前仍在进行中.结论该技术体系的建立将为下一步用肝特异性转录因子共转导成熟T淋巴细胞以直接筛选出重编程的肝细胞创造了条件.

关键词： IPS细胞慢病毒转导 T淋巴细胞 FACS

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《细胞生物学与细胞工程》课程的改革与实施

《细胞生物学与细胞工程》课程的改革与实施

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：訾晓渊李建秀张红霞谢东甫朱海英何志颖胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海 200433

《细胞生物学与细胞工程》课程是我校硕士研究生的专业基础课，是联系医学与药学、基础医学与临床医学之间的桥梁学科，是学习基础医学、临床医学和军事医学课程的必备课程，是搭建医学人才合理与完善知识结构的关键学科，在医学人才培... 详细信息

《细胞生物学与细胞工程》课程是我校硕士研究生的专业基础课，是联系医学与药学、基础医学与临床医学之间的桥梁学科，是学习基础医学、临床医学和军事医学课程的必备课程，是搭建医学人才合理与完善知识结构的关键学科，在医学人才培养中具有不可替代的作用。为了培养学生的创新能力以及独立科研能力，并能促使学生将细胞生物学的技术方法引入到各自学科的科学研究中去，我们对《细胞生物学与细胞工程》课程从教学理念、教学内容、考核方法等方面做了一些改革，形成了"把细胞学活"、"把细胞放入个体发育的时空状态来理解"的新的教学理念，从内涵上将细胞生物学融入到了医学科学教育的知识体系;优选了以"一些具有共性意义的重大问题或热点问题所相关的细胞生物学知识及其前沿动态的概念性介绍和批判性讨论"为内容的理论课教学内容，适应我校研究生创新教育的要求;建立了以"MEF细胞培养为主线、ES细胞培养为特色、结合经典细胞生物学实验"的自主综合性系列实验，充分发挥了学生自主学习的能力，培养了独立科研能力、合作能力和创新能力，达到了使学生能够将细胞生物学的技术方法引入各自学科的科学研究这一教学目标;建立了以"实验结果汇报"为主的科学考核方式，充分体现了考核方式对教和学的导向作用，提高了学生分析问题和解决问题的能力，加强了学生的科研诚信素养，实现了"教"和"学"的合理评价。经对选课的研究生的考核和调查问卷显示，该教学体系的实施达到了使学生能够将细胞生物学的技术方法引入各自学科的科学研究这一教学目标，受到学生的肯定和高度评价。

关键词：细胞生物学细胞工程教学改革

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本科生导师制的指导模式

本科生导师制的指导模式

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：訾晓渊李建秀张红霞朱海英谢东甫何志颖胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

本科生导师制是近年来我国大多数高等院校为培养创新性人才，提高本科生教育质量所采取的一项措施。国内外实践证明：本科生导师制有利于培养学生独立分析问题、解决问题的能力和创新能力;有利于提高学生的思想道德素质、文化素质和专... 详细信息

本科生导师制是近年来我国大多数高等院校为培养创新性人才，提高本科生教育质量所采取的一项措施。国内外实践证明：本科生导师制有利于培养学生独立分析问题、解决问题的能力和创新能力;有利于提高学生的思想道德素质、文化素质和专业素质;有利于提高学生的实践能力、适应社会竞争能力和工作能力，促进学生知识、能力和素质的协调发展。目前我国各层次、各类型的高校均已开始实施本科生导师制，然而，各高等院校的本科生导师指导模式不尽相同，没有形成统一的规范和完整的体系。我们总结分析了国内高校较普遍采用的七种本科是导师制(全程导师制、高年级导师制、低年级导师制、英才导师制、学生宿合导师制、导师组制和综合导师制)的优缺点及其适用性，以促进本科生导师制的广泛推行，使本科生导师制更好、更有效地为本科生教育服务。

关键词：本科生导师制指导模式

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提高本科生导师指导效率的分析

提高本科生导师指导效率的分析

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：訾晓渊李建秀张红霞谢东甫朱海英何志颖胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海 200433

本科教育是高等教育的基础和根本，只有优秀的本科教育才能培养出高质量的创新性人才。近年来，随着国际交流的日益增多，我国高等教育正面临着国际化挑战，社会对高校人才培养的质量要求更高。面对这些挑战，要求高等院校必需转变教育... 详细信息

本科教育是高等教育的基础和根本，只有优秀的本科教育才能培养出高质量的创新性人才。近年来，随着国际交流的日益增多，我国高等教育正面临着国际化挑战，社会对高校人才培养的质量要求更高。面对这些挑战，要求高等院校必需转变教育思想观念，改进原有的教育和管理模式，提高育人质量。为此，我国已采取了多项措施以提高高等院校本科生的教育质量，其中本科生导师制是近年来我国大多数高等院校为培养创新性人才，提高本科生教育质量所采取的一项重要措施。我们实施本科生导师的实践显示：通过制定科学合理的总体指导规划和个性化指导规划，采用本科生导师集体指导与单独指导相结合的综合导师制模式指导学员，将大大提高本科生导师的指导效率。

关键词：本科生导师制指导效率

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细胞工程实验课的设计与实施

细胞工程实验课的设计与实施

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：李建秀张红霞谢东甫訾晓渊胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海 200433

细胞工程是现代生物技术的基本组成部分之一,也是现代生命科学研究的重要技术工具,为生命科学提供了桥梁和载体。《细胞工程》课程是我校生物技术本科专业课程体系中的一门专业必修课,学习该课程对学生学习其他专业课程以及实习和工作... 详细信息

细胞工程是现代生物技术的基本组成部分之一,也是现代生命科学研究的重要技术工具,为生命科学提供了桥梁和载体。《细胞工程》课程是我校生物技术本科专业课程体系中的一门专业必修课,学习该课程对学生学习其他专业课程以及实习和工作都有重要作用。为了能使学生专业技术能力得到强化训练、开拓学生视野、提高学生创新能力,我们根据我校的实际情况,按照我校新修订的《生物技术四年制本科人才培养方案》,本着使学生在学习《细胞工程》实验课的过程中,"逐渐建立科学研究的基本概念,训练科研相关的基本技能和操作技术,培养对科学研究和军事生物学工作的兴趣和爱好"这一教学目标,从生物技术专业本科生的实际需求出发,以学生为主体来设计《细胞工程》实验课,形成了一套能够引导学生自主学习、批判性学习并能培养学生创新思维能力的开放性自主综合性实验教学体系。该教学体系以MEF细胞培养为主线,ES细胞培养和改造为特色的开放性自主综合性实验教学体系,由5个模块共17次实验组成,实施后的效果显示,该实验体系能够使学生达到"逐渐建立科学研究的基本概念,训练科研相关的基本技能和操作技术,培养对科学研究和军事生物学工作的兴趣和爱好"这一教学目标,同时能够提高学生的动手能力,激发学生自主学习的兴趣和创新精神,而且能够对学生平时的学习情况和学习态度给予引导和监督,提高学生的综合素质,为接下来的生产实习和工作奠定基础。

关键词：细胞工程实验教学胚胎干细胞基因转染

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新的医学细胞生物学课程体系的建立

新的医学细胞生物学课程体系的建立

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：訾晓渊谢志芳胡以平张红霞李建秀朱海英何志颖苏娟谢东甫张树忠李文林第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海 200433

细胞生物学已经成为了现代生物学的重叠核心学科(overlapping core discipline)之一。它的理论知识已经渗透到了医学科学的各个领域，成为了医学科学的基本组成部分，而且也是医学科学高水平发展的重要基础。在我国的医学教育中，开设... 详细信息

细胞生物学已经成为了现代生物学的重叠核心学科(overlapping core discipline)之一。它的理论知识已经渗透到了医学科学的各个领域，成为了医学科学的基本组成部分，而且也是医学科学高水平发展的重要基础。在我国的医学教育中，开设细胞生物学的时间还不长(于1997年才被列入医学本科教育的学科目录)，本教研室于1983年为本科生率先开设了《细胞生物学》课程，并建立了较完善的课程体系。近几年来，随着医学科学和细胞生物学本身的快速发展，医学教育对于细胞生物学的需求日益增加，客观讲我们上世纪建立的细胞生物学教学体系已经不适应当今我国医学教育的发展。

关键词：医学细胞生物学教学体系教学理念教学改革

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锌指蛋白Zbtb20肝细胞特异性基因敲除小鼠对CCl4损伤的敏感性及其分子机理研究

锌指蛋白Zbtb20肝细胞特异性基因敲除小鼠对CCl4损伤的敏感性及其...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：谢志芳周露婷麻献华章卫平胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海 200433 第二军医大学基础医学部病理生理学教研室上海 200433

zbtb20在出生后的肝脏中开始上调表达,到出生后8周达到成年水平。为了深入研究zbtb20的体内生物学作用,我们利用Cre/LoxP条件基因打靶技术,成功建立了zbtb20的肝细胞特异性基因敲除小鼠模型。通过对该小鼠模型的体内研究以及体外实验表...

zbtb20在出生后的肝脏中开始上调表达,到出生后8周达到成年水平。为了深入研究zbtb20的体内生物学作用,我们利用Cre/LoxP条件基因打靶技术,成功建立了zbtb20的肝细胞特异性基因敲除小鼠模型。通过对该小鼠模型的体内研究以及体外实验表明,zbtb20是调控肝脏甲胎蛋白基因转录的重要转录抑制因子。然而目前还不清楚zbtb20对肝细胞的体内物质代谢和解毒功能有何影响。为了揭示zbtb20基因缺失后的肝细胞的药物代谢和解毒能力,我们建立了四氯化碳(CCL4)所致的急性肝损伤和慢性肝纤维化模型,结果发现,zbtb20肝细胞特异性基因敲除后引起细胞色素P450 2El(Cyp2E1)mRNA和蛋白水平下调,从而导致该小鼠对CCL4诱导的急性肝毒作用和慢性肝纤维化作用产生抵抗性。导致该小鼠肝细胞中Cyp2E1mRNA水平下调的机制可能通过非HNF1α和β-catenin途径介导。以上结果表明zbtb20除了调控甲胎蛋白基因转录外,还可能参与调控肝细胞的物质代谢和解毒功能。

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