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C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU转基因小鼠肝脏的组织病理学观察

第二军医大学学报 2005年第3期26卷 283-285页

作者：徐军訾晓渊余宏宇何金刘惠敏姚玉成李建秀张南巴月胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征。方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H E染色,并选取20 例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标... 详细信息

目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征。方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H E染色,并选取20 例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标本,免疫组化原位鉴定白细胞分化抗原的肝内分布。结果:37.5%的转基因小鼠肝脏出现人慢性轻度乙型肝炎样的病理改变,病变率随月龄增大显著增高;32.7%有更轻微的非特异性炎症反应;肝内浸润的单个核细胞多数为CD3+、CD4+细胞,未发现CD57+、CD8+细胞浸润。结论:乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏可出现不同程度的病理改变,与人慢性轻度乙肝组织学相类似。

关键词：肝炎病毒乙型小鼠转基因病理学肝

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常染色体显性多囊肾病Han:SPRD大鼠肾脏病理观察及其意义

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 83-86页

作者：李林戴兵孙田美颜永碧梅长林第二军医大学长征医院肾内科上海200003 基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:观察常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease, ADPKD)的Han:SPRD大鼠模型的肾脏病理变化,为揭示ADPKD发病机制提供证据与线索。方法:选取雄性2 周龄Han:SPRD纯合大鼠(cy/cy)和3 个月龄杂合大鼠(cy/+)... 详细信息

目的:观察常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease, ADPKD)的Han:SPRD大鼠模型的肾脏病理变化,为揭示ADPKD发病机制提供证据与线索。方法:选取雄性2 周龄Han:SPRD纯合大鼠(cy/cy)和3 个月龄杂合大鼠(cy/+),取其肾组织进行H E染色、PAS染色、Masson染色以及透射电镜观察。结果:光镜下发现Han:SPRD大鼠肾脏体积增大;囊肿衬里上皮细胞增殖显著;小管基膜增厚,可见灶性小管萎缩和较多蛋白管型;肾小球数目减少、体积缩小,渐趋废弃,呈明显缺血样改变,血管壁增厚。透射电镜可见肾小球毛细血管腔阻塞,基底膜薄厚不均,部分断裂;小管上皮细胞胞质脱落,微绒毛紊乱、部分缺如;细胞外间质成分稀少;囊肿衬里上皮细胞内可见大量线粒体,高尔基体、核糖体丰富。结论:Han:SPRD大鼠肾脏组织学和超微结构的改变可解释多囊肾病的部分临床表现;并观察到Han:SPRD大鼠肾小管上皮细胞微绒毛异常,为揭示疾病的发病机制提供了线索。

关键词：多囊肾病,常染色体显性动物模型 Han:SPRD大鼠

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HBV preS2-S DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 286-289页

作者：巴月訾晓渊张南熊俊张树忠李文林李建秀吴逸明胡以平郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进... 详细信息

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进行稳定表达;以此重组质粒免疫小鼠,ELISA方法检测免疫小鼠抗HBs抗体浓度。结果:构建了HBV preS2 S 基因的表达质粒pcDNAS2 S,该表达质粒可在7721 细胞中稳定高效表达;免疫接种小鼠2 周后抗HBs抗体浓度明显升高,接种后第4周布比卡因处理组小鼠抗HBs抗体的浓度达到峰值161.4 mIU/ml,布比卡因非处理组第5周抗HBs抗体的浓度可达133.7 mIU/ml。结论:所构建的pcDNAS2 S表达质粒能有效表达并诱导小鼠体液免疫应答。

关键词：肝炎病毒乙型抗原,表面免疫抗体生成

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C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达模式分析

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 279-282页

作者：訾晓渊熊俊张南张树忠巴月姚玉成李建秀王新民马凤云胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转... 详细信息

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达与小鼠的月龄、性别、遗传背景的相关性.结果:转基因小鼠在出生后1～3个月时,血清中HBsAg的表达较低或甚至不表达,8个月龄左右时最高,此后逐渐降低,但肝组织中HBsAg的表达相对稳定在较高水平,能真实反映转基因小鼠中HBsAg的表达.雄性小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达量高于雌性小鼠(P＜0.05).转基因小鼠与C57BL/6品系、DAB品系和129s品系正常小鼠交配后的子代,其血清和肝组织中HBsAg表达量均未发生变化.血清阳性的小鼠中肝组织HBsAg阳性率为94.05%,两者呈正相关关系(r=0.257,P＜0.01).结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达具有发育调节和性别差异.

关键词：病毒乙型肝炎小鼠转基因 HBsAg 血清肝

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HBV病毒蛋白在C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠中的表达

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 275-278页

作者：訾晓渊巴月熊俊张树忠姚玉成张南李建秀王新民马凤云叶煦亭丛文铭胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052 第二军医大学东方肝胆外科医院病理科上海200438

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和组织中病毒蛋白的表达及其特征.方法:以138只F6～F17代C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系的转基因小鼠为研究对象,采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法分... 详细信息

目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和组织中病毒蛋白的表达及其特征.方法:以138只F6～F17代C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系的转基因小鼠为研究对象,采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法分析病毒蛋白在转基因小鼠中的表达.结果:转基因小鼠血清中HBsAg和HBeAg的阳性率分别为55.18%和25.00%,血清中HBsAg的出现时间多在3个月龄之前(占93.33%),且持续时间在9个月以上(占95.56%),个体之间具有一定差异.转基因小鼠肝组织中至少可检测到一种病毒蛋白,HBsAg、HBcAg和X蛋白的检出率分别为85.82%、58.24%和49.61%.HBsAg分布于肝细胞质中,HBcAg和X蛋白既可分布于肝细胞核中,也可分布干肝细胞质中.HBsAg的表达具有细胞特异性(门管区周围的肝细胞)和组织特异性(肝和肾),X蛋白除在肝脏和肾脏中表达外,还可在脑组织中表达.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和肝肾等组织中有病毒蛋白的表达,病毒蛋白的分布具有组织细胞特异性和个体差异.

关键词：肝炎病毒乙型小鼠转基因病毒蛋白质类

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乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠的生物学特性

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第五届国际转基因动物学术研讨会

作者：訾晓渊朱海英王新民马凤云张树忠胡以平张南熊俊巴月姚玉成黄洁李文林李建秀叶煦亭第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)可引起人类的急、慢性乙型肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生有十分密切的关系,对人类的健康构成了严重的威胁.本研究利用我们实验室建立并优选的乙肝全基因组转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系为实验对象,从DNA、RNA、蛋白质、病毒学、病理学角度,综合研究了该品系转基因小鼠的生物学特性.

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠生物学特性

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氦氖激光穴位照射后缺氧缺血新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化

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中国临床康复 2005年第23期9卷 196-197页

作者：李宛青陈雪梅吴爱群刘伟刘华郑州师范高等专科学校生命科学系河南省郑州市450044 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室河南省郑州市450052 解放军第二军医大学解剖学教研室上海市200433 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所解剖与组织胚胎学系北京市100005 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南省郑州市450052

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄... 详细信息

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄不拘。随机分为3组,即假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组,每组10只。缺氧缺血组与激光穴位照射组动物均制作成缺氧缺血模型,在清醒状态下实施左侧颈总动脉结扎术,术后在室温中恢复1～4h后,置于常压缺氧仓中,通入8mL/L氧气、920mL/L氮气(体积比)的混合气体,2h后将动物取出。缺氧缺血组不加任何治疗。激光穴位照射组于缺氧缺血后第2天,采用氦氖激光照射百会、大椎两穴,功率4mW,光斑直径3mm,每次照射10min,1次/d,同一时间进行,10d为1个疗程,共3个疗程,各疗程间隔2d。百会穴在颅顶正中,大椎穴在C7～T1之间,背部正中。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,不缺氧。各组大鼠常规饲养34d后,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性,比色法测定丙二醛含量。结果:因缺氧缺血对动物造成了伤害,缺氧缺血组死亡3只,激光穴位照射组死亡2只。进入结果分析,假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组分别为10,7和8只。①大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性:缺氧缺血组显著低于假手术对照组和激光穴位照射组[(59.70±4.03)NU/mL,(76.24±2.43)NU/mL,(72.56±5.60)NU/mL,(t=5.03,4.83,P<0.05)]。②大鼠脑组织丙二醛含量:缺氧缺血组显著高于假手术对照组和激光穴位照射组[(267.58±30.55)mmol/L,(99.87±15.48)mmol/L,(135.29±32.76)mmol/L,(t=10.68,8.81,P<0.05)]。结论:氦氖激光穴位照射能提高、诱发缺氧缺血大鼠脑组织中超氧化物歧化酶的生成和活力,降低丙二醛水平。新生大鼠未成熟脑的可塑性较大,如果利用此关键时期进行氦氖激光穴位照射,可能对脑功能的恢复有一定帮助。

关键词：脑缺氧脑缺血氦氖激光超氧化物歧化酶丙二醛

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天鹅型记忆接骨器与钢板内固定术后软组织界膜的生物相容性

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第四军医大学学报 2004年第15期25卷 1394-1396页

作者：傅青格张春才许硕贵高堂成宝建中陆月良万岷王冠军第二军医大学长海医院骨科上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室电镜室上海200433

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内... 详细信息

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内固定病例 1 3例经随访发现骨折取得骨性愈合后 ,于内固定取出术中取与金属密切接触的局部软组织进行大体标本观察、光镜和电子显微镜观察 .结果 :SMC组局部软组织结构致密规则 ,炎症反应较轻或无 ,微观结构观察见为规则致密的纤维结缔组织 ,成纤维细胞为主要细胞成分 ,细胞周围可见排列规则致密、纵横交错的胶原纤丝 ;钢板组软组织结构多数紊乱 ,局部组织发黑或发灰 ,微观结构观察胶原纤维增生 ,透明变性 ,结构紊乱 ,并有不同程度的炎性反应或异物反应 (异物巨细胞反应、纤维素样坏死 )存在 .结论 :SMC具有良好的生物相容性。

关键词：内固定镍钛形状记忆合金生物相容性

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大鼠肺缺血再灌注损伤引起肺细胞的凋亡

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第二军医大学学报 2004年第3期25卷 295-297页

作者：谢东甫秦雄徐志飞第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院胸心外科上海200003

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转... 详细信息

目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的 d U TP缺口末端标记技术 (TU NEL)检测缺血再灌注损伤所引起的肺细胞凋亡的变化及其与再灌注时间的相关性 ;DNA电泳进行肺组织细胞 DNA片段分析 ;电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果 :在肺缺血再灌注后早期 (30 min)发生明显的肺细胞凋亡 ,凋亡细胞数峰值位于再灌注后 2 h,再灌注后 1 2 h凋亡细胞数与对照组无显著差别 ;缺血而无再灌注的肺细胞凋亡无明显变化。结论

关键词：大鼠肺缺血再灌注损伤肺细胞细胞凋亡

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乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠的建立

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郑州大学学报（医学版） 2004年第3期39卷 398-400页

作者：刘红张钦宪胡以平郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 第二军医大学细胞生物学教研室上海200433

目的 :建立乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠。方法 :构建乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体pcDNA3 HBc ;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中 ,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管 ;取其产 1 0d龄... 详细信息

目的 :建立乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠。方法 :构建乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体pcDNA3 HBc ;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中 ,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管 ;取其产 1 0d龄子代鼠进行鉴定。结果与结论 :表达载体内切酶酶切及序列分析结果与预期一致 ;PCR鉴定转基因阳性小鼠比例为 2 5 % (6 / 2 4 )。

关键词：乙型肝炎病毒核心基因真核表达载体转基因动物小鼠

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