检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肾脏病杂志 2006年第7期22卷 440-444页

作者：张树忠胡以平梅长林第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433 长征医院肾内科

常染色体显性遗传型多囊肾病（ADPKD）是一种十分常见的遗传病，发病率为1‰，我国目前约有150万患者。其临床表现为多发性肾脏囊肿、持续性高血压和泌尿系感染等症状，由于缺乏有效治疗手段，多数患者发展为终末期肾衰而不得不进行肾... 详细信息

常染色体显性遗传型多囊肾病（ADPKD）是一种十分常见的遗传病，发病率为1‰，我国目前约有150万患者。其临床表现为多发性肾脏囊肿、持续性高血压和泌尿系感染等症状，由于缺乏有效治疗手段，多数患者发展为终末期肾衰而不得不进行肾脏替代治疗或肾移植手术。目前已知ADPKD的主要致病基因有Ⅰ型和Ⅱ型多囊肾致病基因（PKD1和PKD2），分别占ADPKD患者的85％和15％。

关键词：常染色体显性遗传型多囊肾病致病基因 PKD2 Ⅱ型 ADPKD 突变持续性高血压肾脏替代治疗泌尿系感染肾移植手术

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应用变性高效液相色谱技术检测汉族人Ⅰ型多囊肾致病基因突变

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中华医学遗传学杂志 2006年第3期23卷 283-288页

作者：张树忠张宇红张殿勇梅长林第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433 中国人民解放军第148医院第二军医大学附属长征医院肾内科解放军肾脏病中心上海200433

目的通过采用变性高效液相色谱(denaturinghigh performanceliquidchromatography,DHPLC)技术检测汉族人常染色体显性多囊肾病(autosomaldominantpolycystickidneydisease,ADPKD)Ⅰ型致病基因PKD1的突变,建立更为快速、敏感的突变筛查系统。方法以来源于19个ADPKD家系的67名成员血样标本的基因组DNA为模板,通过长链PCR和巢式PCR联合扩增的方法扩增PKD1全编码区,然后采用DHPLC方法进行初步筛查,将存在异常色谱图的扩增产物经核苷酸测序,确定突变的具体位点和类型,并与以往采用单链构象多态性(singlestrandconformationpolymorphism,SSCP)方法检测出的突变结果相比较。结果共检测出14个致病突变,包括10个错义突变、1个插入突变、1个缺失突变、2个无义突变,其中12个突变位点与之前SSCP的检测结果相同,另新发现nt32819G→A和nt37137T→C两个突变位点,突变检出率为73.7%。结论DHPLC方法可以作为更为有效筛查汉族人ADPKDPKD1突变位点的检测途径。

关键词：多囊肾病变性高效液相色谱单链构象多态性检测核苷酸多态性致病基因突变

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关于《细胞生物学》教学的思考

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继续医学教育 2006年第32期20卷 30-32页

作者：汤莹杨勇骥第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

细胞生物学是研究细胞的形态结构和功能以及细胞的生命现象和活动规律的科学,是一门重要的现代医学基础学科。学好《细胞生物学》对于学生今后的学习、工作是十分重要的。在教学中,我们应注意:(1)加强与学生的交流,建立良好的师生关系;... 详细信息

细胞生物学是研究细胞的形态结构和功能以及细胞的生命现象和活动规律的科学,是一门重要的现代医学基础学科。学好《细胞生物学》对于学生今后的学习、工作是十分重要的。在教学中,我们应注意:(1)加强与学生的交流,建立良好的师生关系;(2)授课内容的连贯和完整性;(3)充分利用多媒体技术,激发学员的学习兴趣;(4)调动学生主动学习的积极性;(5)培养学生的科研思路;(6)课后及时总结。

关键词：细胞生物学教学方法教学体会

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二乙基亚硝胺诱导转化的肝癌肝组织小鼠中SP细胞的观察

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医学研究生学报 2006年第5期19卷 424-427,i0010页

作者：张朵朱海英谢东甫王新民李建秀胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究小鼠肝癌组织中的SP细胞,从而推测肝癌干细胞(CSC)存在的可能性。方法:首先用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱导B6C3F1雄性小鼠发生肝癌,在无菌条件下,将肝癌组织消化成单细胞悬液,然后用荧光染料Hoechst 33342对细胞悬液进行染色... 详细信息

目的:研究小鼠肝癌组织中的SP细胞,从而推测肝癌干细胞(CSC)存在的可能性。方法:首先用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱导B6C3F1雄性小鼠发生肝癌,在无菌条件下,将肝癌组织消化成单细胞悬液,然后用荧光染料Hoechst 33342对细胞悬液进行染色分析。结果:在原代分离的小鼠肝癌细胞群中观察到SP细胞的存在。结论:实验结果推测,在药物诱导转化的小鼠肝癌组织中很可能存在CSC。

关键词：转化 SP细胞肝癌二乙基亚硝胺

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凋亡素2配体与抗肿瘤治疗

凋亡素2配体与抗肿瘤治疗

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：王梁华周生余焦炳华倪健冯奉仪第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室上海200433 中国医学科学院肿瘤医院北京

细胞凋亡或程序性死亡是基因控制的细胞自主性死亡过程,它与组织器官的发育、机体的生理活动、疾病的发生及细胞癌变有着密切的关系.本文论述了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)或称凋亡素2配... 详细信息

细胞凋亡或程序性死亡是基因控制的细胞自主性死亡过程,它与组织器官的发育、机体的生理活动、疾病的发生及细胞癌变有着密切的关系.本文论述了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo-2 ligand,Apo2L)是近几年来发现的肿瘤坏死因子家族新成员,能选择性诱导肿瘤细胞凋亡对正常组织无明显损伤.本文论述了Apo2L的发现、Apo2L的生物学功能、Apo2L的生物学活性、Apo2L的研究现状以及Apo2L的临床应用前景。

关键词：干拢素细胞凋亡肿瘤坏死因子

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荧光染料Hoechest33342与干细胞研究

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生命的化学 2005年第1期25卷 52-53页

作者：朱海英张朵谢东甫胡以平第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

Hoechest33342是一种可以与DNA结合的荧光染料,在细胞周期研究方面得到广泛的应用。最近研究发现,某些癌细胞和干细胞可以将进入细胞的Hoechest33342排出细胞外,利用流式细胞仪可以将这些不着色的细胞加以分离。现在已经从许多组织中分... 详细信息

Hoechest33342是一种可以与DNA结合的荧光染料,在细胞周期研究方面得到广泛的应用。最近研究发现,某些癌细胞和干细胞可以将进入细胞的Hoechest33342排出细胞外,利用流式细胞仪可以将这些不着色的细胞加以分离。现在已经从许多组织中分离得到了这种细胞。许多研究也提出了利用该方法分离干细胞的可能性。

关键词：荧光染料Hoeehest 33342 干细胞 MXR/BCRP/ABCG2基因

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转基因操作后小鼠受精卵的移植数量与其胚胎发育率的关系

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 298-299页

作者：李建秀胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究不同受精卵移植数量与小鼠胚胎发育率的关系,以提高转基因小鼠制备效率.方法:取正常(共966枚受精卵,分6组,每组10～12例)及已进行显微操作的小鼠受精卵(共2349枚受精卵,分为5组),移入假孕的受体小鼠输卵管内,统计分析其生产率... 详细信息

目的:研究不同受精卵移植数量与小鼠胚胎发育率的关系,以提高转基因小鼠制备效率.方法:取正常(共966枚受精卵,分6组,每组10～12例)及已进行显微操作的小鼠受精卵(共2349枚受精卵,分为5组),移入假孕的受体小鼠输卵管内,统计分析其生产率及得仔率.结果:正常组移植小鼠移植1～5,6～10,11～15,16～20卵组与移植21～25,26～30组比较得仔率高(P＜0.01).转基因组小鼠单侧输卵管内移卵11～15枚或16～20枚的组,其得仔率较其他(移植1～5、6～10、21～25枚各组)高(P＜0.01).结论:受精卵移植数量与转基因小鼠胚胎发育率有关,以一次移卵11～20枚效果最好.

关键词：受精卵移植数量胚胎发育率转基因小鼠

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条件培养液改进小鼠胚胎干细胞嵌合体制备效率的观察

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 294-297页

作者：何志颖王新民李建秀李文林胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受... 详细信息

目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受体(GR)工程化ES细胞进行培养并筛选,通过囊胚注射制作嵌合体来比较2种不同培养液培养ES细胞后嵌合体制备效率的差别。结果:未工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为25.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到53.8%(P< 0.05);GR工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为15.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到52.3%(P<0.05)。结论:应用TX WES培养液改善小鼠ES细胞的培养条件可提高嵌合体的制备效率,该方法为基因剔除小鼠研究的顺利开展奠定了良好的基础。

关键词：胚胎干细胞 TX-WES培养液嵌合体

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基于Cre/loxP系统的糖皮质激素受体基因条件性打靶嵌合鼠的获得

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 290-293页

作者：何志颖姚玉成李建秀王新民胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件。方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交... 详细信息

目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件。方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交筛选发生正确同源重组的ES细胞,囊胚注射法制备嵌合体并进行生殖系检测及纯化建系。结果:成功构建了针对GR基因第2外显子的诱导型目标载体,转染ES细胞获得了工程化的ES细胞,经囊胚注射获得了由工程化的ES细胞和体细胞共同发育而来的嵌合体小鼠。结论:基于Cre/loxP系统的GR基因条件性打靶嵌合鼠的获得,为得到理想的诱导型GR基因剔除小鼠模型奠定了基础。

关键词：受估糖皮质激素嵌和体 Cre/loxP系统胚胎干细胞

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小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型研究(英文)

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第二军医大学学报 2005年第4期26卷 355-360页

作者：熊俊胡凯猛冀凯宏汤淑萍王英刘厚奇第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化。方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测α- SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电... 详细信息

目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化。方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测α- SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电镜观察肾小管基底膜的变化情况,明胶酶谱分析观察肾脏中MMP2和MMP9的表达情况。结果:成功地建立了小鼠肾间质纤维化模型,并被组织学分析证实。免疫组化分析显示肾脏中出现了大量表达α-SMA的细胞,肾基底膜六胺银染色和透射电镜分析显示小鼠肾间质纤维化早期肾脏出现了肾小管基底膜局部断裂和肾小管上皮细胞迁出的改变,明胶酶谱分析显示小鼠肾脏中MMP2和MMP9于肾间质纤维化早期有一过性增高变化。结论:肾小管基底膜局部断裂,肾小管上皮细胞迁出以及MMP2和MMP9的表达变化参与了小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞间充质细胞转型的过程。

关键词：肾间质纤维化肌成纤维细胞肾基底膜基质金属蛋白酶

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