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微生物与感染 2015年第1期10卷 13-18页

作者：高婷婷秦照玲王岩陶清源任浩赵平戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

为探讨PTEN、细胞白噬与登革病毒2型(DENV-2)感染之间的关系及可能机制,本研究将DENV-2以不同感染复数(MOI)和不同持续时间感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),蛋白免疫印迹法检测PTEN表达及指示细胞自噬的LC3型别转换情况;进一步构建pLen... 详细信息

为探讨PTEN、细胞白噬与登革病毒2型(DENV-2)感染之间的关系及可能机制,本研究将DENV-2以不同感染复数(MOI)和不同持续时间感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),蛋白免疫印迹法检测PTEN表达及指示细胞自噬的LC3型别转换情况;进一步构建pLenti-PTEN和pLenti-shPTEN表达质粒,包装成慢病毒,感染HUVEC以建立稳定表达细胞系,并检测PTEN过表达及敲低对自噬标记尤其是LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、DENV-2 capsid蛋白和mRNA水平及子代病毒颗粒感染性的影响。结果显示,PTEN下调可抑制细胞自噬水平,继而降低DENV-2 capsid蛋白表达和子代病毒颗粒释放,提示DENV-2感染HUVEC发生的PTEN蛋白表达下调很可能是宿主细胞本身的一种针对DENV-2感染的保护性反应。

关键词：登革病毒人脐静脉血管内皮细胞 PTEN 自噬

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埃博拉病毒2014年毒株的基因组变异特征分析

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第二军医大学学报 2015年第6期36卷 612-618页

作者：朱永强戚中田王升跃董辉上海人类基因组研究中心上海市疾病与健康基因组学重点实验室上海201203 复旦大学生命科学学院上海200433 第二军医大学热带医学和公共卫生学系生物防御(微生物)教研室上海200433

目的通过对埃博拉病毒2014年毒株基因组共102株序列的分析,研究其变异特征,探讨病毒基因组变异与其流行病学特征改变之间的关系。方法选取NCBI公共数据库中埃博拉病毒全基因组序列,应用Mummer3.0软件分析病毒基因组变异特征;使用MEGA5... 详细信息

目的通过对埃博拉病毒2014年毒株基因组共102株序列的分析,研究其变异特征,探讨病毒基因组变异与其流行病学特征改变之间的关系。方法选取NCBI公共数据库中埃博拉病毒全基因组序列,应用Mummer3.0软件分析病毒基因组变异特征;使用MEGA5软件进行蛋白进化分析;应用CPHmodels和PyMOL软件,根据蛋白同源性模拟蛋白的三维构型。结果埃博拉病毒2014年毒株(扎伊尔型)基因组中,共有606个位点发生变异,其中有49个变异位点是2014年毒株特有的、并导致所编码的氨基酸发生非同义突变。特别是NP蛋白第128位、GP蛋白第82位和L蛋白第1 951位氨基酸,不仅在2014年之前所有的扎伊尔型毒株中是保守不变的,而且在其余埃博拉病毒亚型之间也是高度保守的,但在2014年毒株中却发生了特异性的变异。结论埃博拉病毒2014年毒株基因组具有独特的变异特征,使得NP、GP和L蛋白发生变异,特别是GP蛋白第82位氨基酸由丙氨酸突变为缬氨酸,将影响其所在的α螺旋的稳定性,这可能是2014年毒株致死能力减弱和传播能力增强的原因之一。基因组变异是否直接导致此次疫情中病毒流行病学特征改变,还需要进一步的实验研究证实。

关键词：埃博拉病毒病毒基因组变异(遗传学) 计算生物学

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乙型脑炎病毒入侵人神经细胞的内吞机制

乙型脑炎病毒入侵人神经细胞的内吞机制

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中华医学会2015年医学病毒学大会

作者：徐庆强曹明媚宋洪元陈生林钱汐晶赵平任浩唐海琳王岩朱勇喆戚中田第二军医大学微生物学教研室全军医学微生物学重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海 200433

背景：乙型脑炎病毒(JEV)是一种蚊媒传播病毒，其感染具有嗜神经性，易造成严重的中枢神经系统(CNS)疾病及其并发症.JEV 入侵神经细胞是导致乙型脑炎发生的先决条件，而目前对于JEV 侵入神经细胞的作用机制仍不清楚.

关键词：乙型脑炎病毒神经细胞入侵肌动蛋白表皮生长因子受体

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埃博拉病毒及其检测技术与疫苗研发

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中华传染病杂志 2014年第9期32卷 513-514页

作者：赵平第二军医大学微生物学教研室上海200433

埃博拉病毒（Ebola virus，EBOV）是引起人类和其他灵长类动物埃博拉出血热（Ebola haemorrhagic fever，EHF）的病原体，其致死率可高达90％。自2014年2月至今，一些西非国家陆续暴发EHF疫情并呈播散趋势，在全球范围内引起恐慌。现将E... 详细信息

埃博拉病毒（Ebola virus，EBOV）是引起人类和其他灵长类动物埃博拉出血热（Ebola haemorrhagic fever，EHF）的病原体，其致死率可高达90％。自2014年2月至今，一些西非国家陆续暴发EHF疫情并呈播散趋势，在全球范围内引起恐慌。现将EBOV的起源、病毒的分子生物学特性、检测技术和疫苗研究进展作简要概述。

关键词：埃博拉病毒疫苗研发检测技术分子生物学特性埃博拉出血热灵长类动物 fever 病原体

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1b、2a亚型HCV感染者血清包膜蛋白抗体反应与中和的特征

1b、2a亚型HCV感染者血清包膜蛋白抗体反应与中和的特征

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中华医学会2015年医学病毒学大会

作者：唐紫薇冯悦王文博夏雪山彭浩然刘敏戚中田赵平第二军医大学微生物学教研室上海 200433 昆明理工大学生命科学与技术学院昆明 650500 西安交通大学第一医院感染科西安 710061

研究背景：HCV 被分为7 个不同的基因型以及一百多个亚型。不同基因型的HCV 不仅在地理分布，并且在自然感染的疾病进展、预后以及药物疗效等方面均有明显不同。中国大陆主要流行的基因型为1b 亚型，随后为2a 亚型。

关键词： HCV 包膜蛋白抗体中和

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HCV疫苗临床试验的研究进展

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中国生物制品学杂志 2014年第7期27卷 964-967页

作者：高婷婷秦照玲戚中田第二军医大学微生物学教研室全军生物侦检与防护重点实验室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染可引起慢性肝炎,最终导致肝衰竭、肝硬化和肝癌。目前尚无有效的HCV疫苗,其治疗仍以标准化方案聚乙二醇干扰素联合利巴韦林为主。其疗程长,费用高,副作用大,且不能从根本上解决慢性尤其是难治... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染可引起慢性肝炎,最终导致肝衰竭、肝硬化和肝癌。目前尚无有效的HCV疫苗,其治疗仍以标准化方案聚乙二醇干扰素联合利巴韦林为主。其疗程长,费用高,副作用大,且不能从根本上解决慢性尤其是难治性丙肝的治疗难题,因此,HCV疫苗的研究迫在眉睫。本文就HCV疫苗临床试验的研究进展作一综述。

关键词：丙型肝炎病毒疫苗临床试验

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丙型肝炎病毒构象性表位与乙型肝炎病毒S基因嵌合表达质粒的构建及其表达

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中国病毒病杂志 2014年第1期4卷 20-25页

作者：徐扬高婷婷秦照玲鞠鹤鹏赵平戚中田上海第二军医大学微生物学教研室上海市生物防护重点实验室上海200433

目的构建丙型肝炎病毒(HCV)构象性表位AR3与乙型肝炎病毒S抗原(HBs)嵌合的真核表达质粒,并在293T细胞中表达鉴定。方法采用重叠拼接PCR法,将HCV AR3表位的基因插入pSVB-24H质粒中,构建pSVB-24H-AR3重组质粒;再用PCR法扩增出全长的AR3-S... 详细信息

目的构建丙型肝炎病毒(HCV)构象性表位AR3与乙型肝炎病毒S抗原(HBs)嵌合的真核表达质粒,并在293T细胞中表达鉴定。方法采用重叠拼接PCR法,将HCV AR3表位的基因插入pSVB-24H质粒中,构建pSVB-24H-AR3重组质粒;再用PCR法扩增出全长的AR3-S嵌合基因,将其克隆到pCMV-HA载体中,构建pCMV-HA-AR3-S真核表达质粒。脂质体和PEI转染法导入293T细胞,Western blot和ELISA法分别检测重组蛋白的表达及分泌情况。结果 PCR法分别扩增出pSVB-24H部分载体、HCV AR3及HBs部分基因共3条基因片段;利用两步重叠拼接PCR,扩增得到1 118bp的三片段拼接产物,双酶切鉴定重组质粒pSVB-24H-AR3位置正确,测序分析表明插入序列及开放读码框正确,但细胞表达产物难以被抗-HBs识别;将完整的1 128bp的AR3-S基因插入带HA标签的表达载体中,酶切鉴定和测序分析表明重组质粒pCMV-HA-AR3-S构建正确,Western blot结果显示重组AR3-S蛋白可与HA抗体特异性反应;ELISA结果也显示细胞内能检测到较高水平的AR3-S重组蛋白。结论成功构建pSVB-24H-AR3和pCMV-HA-AR3-S嵌合表达质粒并在细胞中表达,为后续开展基于HBs的病毒样HCV颗粒疫苗研究提供了实验依据。

关键词：丙型肝炎病毒构象性表位乙型肝炎病毒 S抗原嵌合基因

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BDSF抑制临床白假丝酵母菌丝生长的效果分析

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微生物与感染 2015年第4期10卷 247-251页

作者：徐振华廖勇李梦廖万清翁丽星汪联辉复旦大学生命科学学院微生物学和微生物工程系上海200433 北京军区总医院皮肤科北京100700 第二军医大学长征医院上海市医学真菌分子生物学重点实验室/全军真菌与真菌病重点实验室上海200003 南京邮电大学地理与生物信息学院南京210046 南京邮电大学信息材料与纳米技术研究院南京210046

随着现代医学的发展,抗真菌药物广泛应用,白假丝酵母(又称白念珠菌)耐药现象日益严重。由酵母相转变为菌丝相是白念珠菌致病的一个必要过程,抑制菌丝形成可控制其感染。细菌群体感应信号分子BDSF(顺十二碳-2-烯酸)可抑制这一形态的转变... 详细信息

随着现代医学的发展,抗真菌药物广泛应用,白假丝酵母(又称白念珠菌)耐药现象日益严重。由酵母相转变为菌丝相是白念珠菌致病的一个必要过程,抑制菌丝形成可控制其感染。细菌群体感应信号分子BDSF(顺十二碳-2-烯酸)可抑制这一形态的转变,从而抑制白念珠菌的致病力。本研究检测BDSF对60株白念珠菌临床菌株的抑菌丝效果,同时测定这60株临床菌株对氟康唑的敏感度。结果显示,60株临床菌株中8株(13.3%)对氟康唑耐药,最低抑菌浓度(MIC)≥64μg/ml,而BDSF对耐与不耐氟康唑的临床菌株均能高效抑制菌丝生长。结果表明,BDSF可作为临床治疗白念珠菌感染的新型候选药物,值得进一步研究。

关键词：白假丝酵母 BDSF 氟康唑

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慢性HCV感染者血清中的包膜蛋白抗体主要针对于包膜E2蛋白中的构象表位

慢性HCV感染者血清中的包膜蛋白抗体主要针对于包膜E2蛋白中的构...

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中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：王文博彭浩然唐紫薇戚中田赵平第二军医大学微生物学教研室

丙型肝炎病毒(HCV)感染是威胁人类健康的重要因素,美欧新上市的蛋白酶抑制剂、RNA聚合酶抑制剂等直接抗病毒(DAA)药物的疗效相比标准疗法有了显著提高,但价格昂贵,且在相当长时间内难以在发展中国家上市。与药物研究相反,HCV疫苗研究多... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)感染是威胁人类健康的重要因素,美欧新上市的蛋白酶抑制剂、RNA聚合酶抑制剂等直接抗病毒(DAA)药物的疗效相比标准疗法有了显著提高,但价格昂贵,且在相当长时间内难以在发展中国家上市。与药物研究相反,HCV疫苗研究多年来一直未有重要进展,对HCV诱导中和抗体的认识仍有待深入挖掘。包膜蛋白是介导HCV细胞侵入的关键蛋白,理论上也

关键词： HCV 感染者包膜蛋白构象表位

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埃博拉病毒感染的实验室检测方法

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微生物与感染 2014年第4期9卷 202-209页

作者：高伟赵平任浩戚中田第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433

2014年初,西非埃博拉病毒感染暴发,且流行呈播散趋势,引起全球高度重视。由埃博拉病毒引起的埃博拉病毒病具有潜伏时间短、发病急、传染性强和致死率高的特点,目前尚无预防疫苗和特异治疗药物。早诊断并隔离治疗可降低病毒的传播风险,... 详细信息

2014年初,西非埃博拉病毒感染暴发,且流行呈播散趋势,引起全球高度重视。由埃博拉病毒引起的埃博拉病毒病具有潜伏时间短、发病急、传染性强和致死率高的特点,目前尚无预防疫苗和特异治疗药物。早诊断并隔离治疗可降低病毒的传播风险,这对准确、快速和敏感的实验室检测方法的需求增加。现将有关埃博拉病毒感染实验室检测方法作简要综述。

关键词：埃博拉病毒检测聚合酶链反应酶联免疫吸附试验胶体金技术

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