检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 1999年第4期20卷 212-215页

作者：胡卫江李建秀余宏宇戴德顺王新民孙伟郝光荣王肖鹏胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学教保处实验动物中心

目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ... 详细信息

目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法，研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制。应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变。结果：得到了４只整合有ＨＢＶ基因组的建立者小鼠，并证明ＨＢＶ基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，在肝、肾组织内可特异性表达、复制，并在肝细胞内发现了Ｄａｎｅ颗粒。转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变。结论：获得了ＨＢＶ的转基因小鼠，其病毒基因可以表达，并有病毒颗粒形成。该小鼠对于ＨＢＶ的各个基因产物是免疫耐受的，其基本生物学特性与人类的ＨＢＶ携带者特征相似。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠 Dane颗粒 adr亚型

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实验动物从业人员培训考核评价系统的开发

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实验动物与比较医学 2015年第6期35卷 498-503页

作者：余琛琳孙晓希蔡丽萍汤球李莉第二军医大学训练部实验动物中心上海200433 第二军医大学训练部教保处上海200433

目的开发一款适用于实验动物从业人员培训考核评价的管理软件。方法本系统利用***4．0技术，采用***编码语言和SQLServer数据库，同时将Dreamweaver8．0和VisualStudi02010两种软件结合实现界面和编码，按照实验动物从业人员培训考核的... 详细信息

目的开发一款适用于实验动物从业人员培训考核评价的管理软件。方法本系统利用***4．0技术，采用***编码语言和SQLServer数据库，同时将Dreamweaver8．0和VisualStudi02010两种软件结合实现界面和编码，按照实验动物从业人员培训考核的要求，研究开发实验动物从业人员培训考核评价软件。结果本系统设置了用户类别管理、用户信息管理、考核项目指标和权重参数管理、考核指标项目分数录入管理、考核成绩统计分析管理、联机管理6大模块，界面简洁友好，操作简易灵活。结论本系统适用于实验动物从业人员培训的评价和管理。

关键词：实验动物从业人员培训考核评价系统

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黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞基因表达的影响

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现代生物医学进展 2016年第15期16卷 2847-2851页

作者：丛薇余琛琳林丽芳赵善民杨文静蔡丽萍汤球孙伟徐晨李莉第二军医大学实验动物中心上海200433 第二军医大学训练部教保处上海200433

目的:观察不同浓度黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC II)相关因子m RNA表达的影响,探讨裸鼹鼠抵御肺癌的分子机制。方法:通过酶消化法分离裸鼹鼠肺组织细胞并用免疫黏附法进行纯化得到裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞进行原代培养,40小时后... 详细信息

目的:观察不同浓度黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC II)相关因子m RNA表达的影响,探讨裸鼹鼠抵御肺癌的分子机制。方法:通过酶消化法分离裸鼹鼠肺组织细胞并用免疫黏附法进行纯化得到裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞进行原代培养,40小时后,实验组分别给予不同浓度(0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mg/L)的黄曲霉素处理,溶剂对照组给予DMSO(0.4 m L/L)处理。黄曲霉素作用48小时后收集细胞,用实时定量PCR技术检测裸鼹鼠AECII细胞中的SP-C基因及TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等炎症因子的m RNA表达变化。结果:原代分离的裸鼹鼠AEC II细胞纯度>70%,活性>90%,可用于体外实验。定量PCR结果显示黄曲霉素使裸鼹鼠AEC II细胞SP-C表达水平显著下降,TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等炎症因子的表达水平在黄曲霉低于2 mg/L浓度的条件下没有显著变化。结论:裸鼹鼠AEC II细胞在黄曲霉素导致细胞受损的情况下,仍然保持较低水平的炎症因子表达,这可能是其抵抗肺癌的机制之一。

关键词：肺泡上皮Ⅱ型细胞黄曲霉素裸鼹鼠炎症因子

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氯化钴诱导低氧对裸鼹鼠肝星形细胞增殖及凋亡的影响

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实验动物与比较医学 2016年第1期36卷 66-71页

作者：肖邦李莉余琛琳赵善民林丽芳杨文静丛薇崔淑芳第二军医大学实验动物中心上海200433 第二军医大学教学保障处上海200433

目的比较研究氯化钴（CoCl2）对裸鼹鼠及C57BL/6J小鼠肝星形细胞增殖和凋亡的影响.方法采用活细胞计数试剂盒（CCK8）法和流式细胞术分别检测不同浓度CoCl2对裸鼹鼠和小鼠肝星形细胞增殖活力以及和凋亡水平的影响.采用蛋白印迹测定Co... 详细信息

目的比较研究氯化钴（CoCl2）对裸鼹鼠及C57BL/6J小鼠肝星形细胞增殖和凋亡的影响.方法采用活细胞计数试剂盒（CCK8）法和流式细胞术分别检测不同浓度CoCl2对裸鼹鼠和小鼠肝星形细胞增殖活力以及和凋亡水平的影响.采用蛋白印迹测定CoCl2处理后裸鼹鼠肝星形细胞低氧诱导因子1α（HIF-1α）和凋亡相关蛋白（BCL2、BAX）的表达水平.结果低浓度（50 μtmol/L）CoCl2对C57BL/6j、鼠肝星形细胞增殖活性具有明显的抑制作用,并能显著提高其凋亡率,然而同样剂量的CoCl2能够显著提高裸鼹鼠肝星形细胞的增值活性,对细胞凋亡率亦无明显影响.高剂量CoCl2（＞200 μtmol/L）虽能导致裸鼹鼠肝星形细胞增殖活力的降低,及凋亡率的升高,但裸鼹鼠肝星形细胞的变化幅度明显小于小鼠.同时CoCl2处理后,裸鼹鼠肝星形细胞HIF-1α的表达或累积显著升高（P＜0.05）,BCL2/BAX比率显著上调（P＜0.05）.结论与C57BL/6J小鼠相比,裸鼹鼠肝星形细胞具有更强的抵抗CoCl2引起的化学性低氧损伤的能力.同时HIF-1α可能参与调控裸鼹鼠抵抗化学性低氧环境造成的损伤.

关键词：氯化钴(CoCl2) 裸鼹鼠肝星形细胞凋亡

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实验动物从业人员培训考核评价系统的开发

实验动物从业人员培训考核评价系统的开发

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华东地区第十四届实验动物科学学术交流会

作者：余琛琳孙晓希蔡丽萍汤球李莉第二军医大学训练部实验动物中心上海200433 第二军医大学训练部教保处上海200433

目的开发一款适用于实验动物从业人员培训考核的评价管理软件.方法本系统利用***4.0技术，采用***编码语言和SQLServer数据库，同时将Dreamweaver8.0和Visual Studio2010两种软件结合实现界面和编码，按照实验动物从业人员培训考核的... 详细信息

目的开发一款适用于实验动物从业人员培训考核的评价管理软件.方法本系统利用***4.0技术，采用***编码语言和SQLServer数据库，同时将Dreamweaver8.0和Visual Studio2010两种软件结合实现界面和编码，按照实验动物从业人员培训考核的要求，研究开发实验动物从业人员培训考核评价软件.结果本系统设置了用户类别管理、用户信息管理、考核项目指标和权重参数管理、考核指标项目分数录入管理、考核成绩统计分析管理、联机管理六大模块，界面简洁友好，操作简易灵活.结论本系统适用于实验动物从业人员培训考核的评价和管理.

关键词：实验动物从业人员培训考核评价系统

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Apelin-13侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究

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实验动物科学 2015年第1期32卷 12-16页

作者：周全李熠明张璐汤球第二军医大学教学保障处上海200433 第二军医大学实验动物中心上海200433

目的研究Apelin-13侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法侧脑室埋管后,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,脑缺血2 h后侧脑室注射给药。再灌注24 h后进行Zea-Longa神经功能评分;TTC染色法测定大鼠脑梗死面积... 详细信息

目的研究Apelin-13侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法侧脑室埋管后,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,脑缺血2 h后侧脑室注射给药。再灌注24 h后进行Zea-Longa神经功能评分;TTC染色法测定大鼠脑梗死面积;试剂盒测定大鼠脑组织内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性;Western blot法测大鼠脑组织Bcl-2、Bax和Caspase-3三种蛋白的表达水平。结果 Apelin-13(1.0μg·kg-1)侧脑室给药能改善大脑的神经功能,减少脑缺血面积,降低i NOS活性,增加GSH-PX活性,增加Bcl-2的表达,减少Bax和Caspase-3的表达。结论Apelin-13对缺血再灌注脑组织保护的可能机制包括降低NO水平,加强自由基清除,以及调节凋亡相关蛋白表达。

关键词： Apelin-13 缺血再灌注损伤 Bcl-2蛋白 Bax蛋白 Caspase-3蛋白诱导型一氧化氮合酶谷胱甘肽过氧化物酶

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应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立

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实验动物与比较医学 2016年第1期36卷 76-80页

作者：林丽芳李莉肖邦程继帅杨文静丛薇赵善民汤球崔淑芳第二军医大学实验动物中心上海200433 第二军医大学教学保障处上海200433

目的建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法.方法在特异性引物F链的5＆#39;端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,... 详细信息

目的建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法.方法在特异性引物F链的5＆#39;端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,同时以传统的荧光引物PCR为对照.结果琼脂糖电泳结果显示,通用荧光引物PCR产生的目的片段清晰,引物特异性强,目的片段多态性与传统PCR产生的多态性一致,且片段大小均比传统PCR产生的目的片段大15 bp左右,与预期一致.毛细管电泳结果也显示,通用引物PCR结果检测的等位基因数与传统荧光引物PCR方法产生的数量完全一致,无杂带,扩增效率高,具有较强的可操作性.结论使用通用荧光引物分步PCR法结果可应用于裸鼹鼠基因组大量微卫星位点的筛选.

关键词：裸鼹鼠微卫星位点筛选通用荧光引物

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裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究

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实验动物与比较医学 2016年第1期36卷 72-75页

作者：程继帅李莉肖邦赵善民林丽芳丛薇汤球孙伟余琛琳杨文静崔淑芳第二军医大学实验动物中心上海200433 第二军医大学教学保障处上海200433

目的建立一种裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养的方法,并通过与小鼠骨髓巨噬细胞进行比较研究其吞噬功能.方法分离裸鼹鼠骨髓细胞,在含60 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）完全培养基的诱导下,体外贴壁培养6～7 d,采用倒置显微镜观察细... 详细信息

目的建立一种裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养的方法,并通过与小鼠骨髓巨噬细胞进行比较研究其吞噬功能.方法分离裸鼹鼠骨髓细胞,在含60 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）完全培养基的诱导下,体外贴壁培养6～7 d,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态.裸鼹鼠骨髓细胞诱导结束后,采用流式细胞术检测贴壁细胞表面抗原CD11b和F4/80的阳性率,鉴定骨髓巨噬细胞的纯度;采用异硫氰酸荧光素（FITC）-dextran根据荧光强度比较裸鼹鼠和ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能.结果通过本方法获得的贴壁细胞具有典型的巨噬细胞的形态特征,且细胞表面抗原CD1 1b和F4/80的阳性率均高于80％;裸鼹鼠与ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬率分别为99.87％士0.13％和88.79％＆#177;0.90％.结论本文建立的方法是一种简单实用的体外分离培养裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的方法,且能够获得高纯度、高活性的巨噬细胞.裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能高于小鼠骨髓巨噬细胞.

关键词：裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养功能

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氯化钴诱导低氧对裸鼹鼠肝星形细胞增殖及凋亡的影响

氯化钴诱导低氧对裸鼹鼠肝星形细胞增殖及凋亡的影响

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：肖邦李莉余琛琳赵善民林丽芳杨文静丛薇崔淑芳第二军医大学实验动物中心第二军医大学教学保障处

目的比较研究氯化钴（CoCl）对裸鼹鼠及C57BL/6j小鼠肝星形细胞增殖和凋亡的影响。方法采用活细胞计数试剂盒（CCK8）法和流式细胞术分别检测不同浓度CoCl对裸鼹鼠和小鼠肝星形细胞增殖活力以及和凋亡水平的影响。采用蛋白印迹测定CoCl... 详细信息

目的比较研究氯化钴（CoCl）对裸鼹鼠及C57BL/6j小鼠肝星形细胞增殖和凋亡的影响。方法采用活细胞计数试剂盒（CCK8）法和流式细胞术分别检测不同浓度CoCl对裸鼹鼠和小鼠肝星形细胞增殖活力以及和凋亡水平的影响。采用蛋白印迹测定CoCl处理后裸鼹鼠肝星形细胞低氧诱导因子1α（HIF-1α）和凋亡相关蛋白（BCL、BAX）的表达水平。结果低浓度（50μmol/L）CoCl对C57BL/6j小鼠肝星形细胞增殖活性具有明显的抑制作用,并能显著提高其凋亡率,然而同样剂量的CoCl能够显著提高裸鼹鼠肝星形细胞的增值活性,对细胞凋亡率亦无明显影响。高剂量CoCl（>200μmol/L）虽能导致裸鼹鼠肝星形细胞增殖活力的降低,及凋亡率的升高,但裸鼹鼠肝星形细胞的变化幅度明显小于小鼠。同时CoCl处理后,裸鼹鼠肝星形细胞HIF-1α的表达或累积显著升高（P<0.05）,BCL/BAX比率显著上调（P<0.05）。结论与C57BL/6j小鼠相比,裸鼹鼠肝星形细胞具有更强的抵抗CoCl引起的化学性低氧损伤的能力。同时HIF-1α可能参与调控裸鼹鼠抵抗化学性低氧环境造成的损伤。

关键词：氯化钴裸鼹鼠肝星形细胞凋亡

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应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立

应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：林丽芳李莉肖邦程继帅杨文静丛薇赵善民汤球崔淑芳第二军医大学实验动物中心第二军医大学教学保障处

目的建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。方法在特异性引物F链的5'端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,同... 详细信息

目的建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。方法在特异性引物F链的5'端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,同时以传统的荧光引物PCR为对照。结果琼脂糖电泳结果显示,通用荧光引物PCR产生的目的片段清晰,引物特异性强,目的片段多态性与传统PCR产生的多态性一致,且片段大小均比传统PCR产生的目的片段大15 bp左右,与预期一致。毛细管电泳结果也显示,通用引物PCR结果检测的等位基因数与传统荧光引物PCR方法产生的数量完全一致,无杂带,扩增效率高,具有较强的可操作性。结论使用通用荧光引物分步PCR法结果可应用于裸鼹鼠基因组大量微卫星位点的筛选。

关键词：裸鼹鼠微卫星位点筛选通用荧光引物 PCR

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