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RAF-1与辐射增敏

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生命的化学 2005年第4期25卷 318-320页

作者：崔建国蔡建明第二军医大学海医系放射医学教研室上海200433

RAF-1在调控细胞增殖和凋亡的信号转导途径中起着关键作用。近期研究发现,阻断RAF-1或其介导的信号通路中其他信号分子位点,可以显著提高部分辐射抵抗肿瘤的辐射敏感性。

关键词：肿瘤治疗辐射增敏 RAF-1 信号传递

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大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养

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细胞生物学杂志 2005年第1期27卷 84-88页

作者：许熊飞李润平李泉刘文武练庆林刘昀孙学军蒋春雷第二军医大学海医系航海医学教研室上海200433

为了建立大鼠脑微血管内皮细胞体外培养模型,探索纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法并进行形态学观察.采用2～3周龄的SD大鼠,解剖得到大脑皮质,两次酶消化及牛血清白蛋白或葡聚糖和Pefcoll梯度离心获得较纯的脑微血... 详细信息

为了建立大鼠脑微血管内皮细胞体外培养模型,探索纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法并进行形态学观察.采用2～3周龄的SD大鼠,解剖得到大脑皮质,两次酶消化及牛血清白蛋白或葡聚糖和Pefcoll梯度离心获得较纯的脑微血管段后,接种于涂布基质的培养皿进行原代培养;培养的细胞采用相差显微镜形态学观察、透射电镜观察及Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测鉴定.结果发现,培养12 h即可见细胞从贴壁的脑微血管段周围长出,细胞呈短梭形,区域性单层生长,5～7天内皮细胞融合,内皮细胞纯度达90%以上;内皮细胞的贴壁和生长有赖于所涂布的基质,纤连蛋白/Ⅳ型胶原优于鼠尾胶和明胶;Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测内皮细胞表达阳性,透射电镜观察可见相邻内皮细胞间存在紧密连接结构.提示该方法能成功进行纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养,可用于脑微血管内皮的生理、生化及药理学研究,亦可用于构建大鼠血脑屏障模型.

关键词：脑微血管内皮细胞大鼠原代培养 Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测形态学观察培养的细胞基质生长周龄

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大鼠模拟晕船适应过程中血清六种无机元素的变化

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营养学报 2005年第3期27卷 225-227页

作者：刘民航郭俊生李敏赵法伋海军医学研究所上海200433 第二军医大学海医系军队卫生教研室上海200433

目的:观察大鼠模拟晕船适应过程中血清钾、钠、钙、镁4种常量元素及微量元素铁和锌的变化。方法:动物随机分为正常对照组与模拟晕船组,模拟晕船组大鼠用模拟晕船装置变速刺激1h,1/d,利用异食癖观察其晕船表现。重复刺激1、3、7、21d后... 详细信息

目的:观察大鼠模拟晕船适应过程中血清钾、钠、钙、镁4种常量元素及微量元素铁和锌的变化。方法:动物随机分为正常对照组与模拟晕船组,模拟晕船组大鼠用模拟晕船装置变速刺激1h,1/d,利用异食癖观察其晕船表现。重复刺激1、3、7、21d后分批处死。另有部分大鼠模拟晕船21d后停止刺激,休息14d后再次模拟晕船3d,处死,分别取血清,采用原子吸收光谱法检测体内钾、钠、钙、镁及微量元素铁、锌的变化。结果:钾、钠、钙、镁等元素,晕船后在正常范围内波动,大多呈降低并随机体的适应逐步恢复。其中钾含量降低,具有统计学意义。微量元素铁在晕船后D1即明显降低,锌在D3出现降低,此后恢复正常。结论:晕船刺激造成机体应激,引起血清钾、铁、锌降低;重复刺激引起机体适应,上述元素含量逐步恢复正常。

关键词：晕船适应无机盐铁锌

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支链氨基酸对大鼠TPH mRNA表达的影响

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中国公共卫生 2005年第4期21卷 409-410页

作者：欧阳儒颖季红光蔡懿灵阮芳铭王海明第二军医大学海医系军队卫生学教研室上海200433

目的　探讨补充支链氨基酸 (branched -chainaminoacids,BCAA)对睡眠剥夺 (sleepdeprivation ,SD)大鼠脑干色氨酸羟化酶 (Tryptophanhydroxylase ,TPH)mRNA表达的影响。方法　采用小站台水环境 (flower- pot)睡眠剥夺模型对大鼠进行睡... 详细信息

目的　探讨补充支链氨基酸 (branched -chainaminoacids,BCAA)对睡眠剥夺 (sleepdeprivation ,SD)大鼠脑干色氨酸羟化酶 (Tryptophanhydroxylase ,TPH)mRNA表达的影响。方法　采用小站台水环境 (flower- pot)睡眠剥夺模型对大鼠进行睡眠剥夺。将 5 6只雄性成年Sprague-Dawley大鼠按体重随机分为C(对照组 ,自由睡眠 )、2 4hSD(剥夺睡眠 2 4h)、2 4hSDB(睡眠剥夺 2 4h ,进食添加 3%BCAA的饲料 )、4 8hSD、4 8hSDB、72hSD和 72hSDB组 ,每组 8只。睡眠剥夺结束后 ,断头取脑 ,冰上分离出脑干 ,半定量RT -PCR法检测TPH mBNA的表达。结果　 2 4和 4 8h睡眠剥夺未明显改变大鼠脑干TPH mRNA的表达 ,与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 . 0 5 ) ;而 72h睡眠剥夺后TPHmRNA表达量大幅度增加 ,与其它各组相比差异有统计学意义 (P <0 . 0 1)。补充BCAA与未补充BCAA组比较 ,大鼠脑干TPHmRNA的表达水平末见明显变化。结论　一定时间的睡眠剥夺可以引起大鼠脑干TPH mRNA的表达上调 ,但补充一定剂量的支链氨基酸并不能改变睡眠剥夺大鼠脑干TPHmRNA的表达。

关键词：睡眠剥夺支链氨基酸 TPH mRNA

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维生素C对镍诱导的肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

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营养学报 2005年第6期27卷 464-466,470页

作者：张敬张军石红军郭俊生第二军医大学海医系军队卫生教研室同济大学医学院生物教研室上海200092

目的:研究维生素C(VC)拮抗Ni2O3的细胞氧化损伤的作用及对大鼠肺泡巨噬细胞iNOS诱导表达的影响。方法:采用体外细胞培养法测定在VC(25,50,100μmol/L)作用下,体外染镍肺泡巨噬细胞的死亡率及活力。同时观察细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(... 详细信息

目的:研究维生素C(VC)拮抗Ni2O3的细胞氧化损伤的作用及对大鼠肺泡巨噬细胞iNOS诱导表达的影响。方法:采用体外细胞培养法测定在VC(25,50,100μmol/L)作用下,体外染镍肺泡巨噬细胞的死亡率及活力。同时观察细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)和活性氧(ROS)的产生;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、诱导型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,iNOS)活力的变化以及应用RT-PCR法测定iNOSmRNA的表达。结果:在体外染镍肺泡巨噬细胞中加入不同浓度的VC后可降低该细胞的死亡率并提高细胞的活力,可减少MDA、NO和活性氧的产生,降低NOS的活性,提高SOD、GSH-Px、CAT的活性,iNOSmRNA表达也较镍组降低。结论:镍可致细胞脂质过氧化,VC可通过提高抗氧化酶的活性,抑制iNOSmRNA的表达,减少活性氧及NO的产生,拮抗镍对肺泡巨噬细胞的氧化损伤。

关键词：镍维生素C 一氧化氮谷胱甘肽过氧化物酶活性氧

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硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用

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第三军医大学学报 2005年第18期27卷 1820-1822页

作者：曾惠刘勇朱明学张黎明董兆君第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038 第二军医大学海医系上海200433

目的观察硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用。方法用密度梯度离心法分离大鼠脾淋巴细胞,与硫芥共同进行体外培养。用琼脂糖DNA凝胶电泳观察细胞凋亡的发生;用W estern b lot观察Cyt-c释放。用MTT法检测线粒体功能状态,以罗丹明12... 详细信息

目的观察硫芥对大鼠脾脏淋巴细胞线粒体的损伤作用。方法用密度梯度离心法分离大鼠脾淋巴细胞,与硫芥共同进行体外培养。用琼脂糖DNA凝胶电泳观察细胞凋亡的发生;用W estern b lot观察Cyt-c释放。用MTT法检测线粒体功能状态,以罗丹明123标记的荧光探针检测线粒体跨膜电位。结果100μmol/L硫芥作用4 h线粒体功能就有降低,线粒体跨膜电位降低,二者间呈直线相关。硫芥中毒早期即可引起淋巴细胞线粒体细胞色素C释放和细胞凋亡(DNA ladder)。结论硫芥可引起大鼠脾淋巴细胞线粒体明显损伤,线粒体参与了硫芥的细胞毒性作用过程。

关键词：硫芥淋巴细胞 Cyt-c 线粒体功能跨膜电位 DNA ladder

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低剂量硫芥诱导大鼠脾脏氧化应激状态的改变

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第三军医大学学报 2005年第14期27卷 1421-1423页

作者：曾惠刘勇朱明学张黎明董兆君第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室重庆400038 第二军医大学海医系上海200433

目的探讨低剂量硫芥诱导大鼠脾脏氧化应激状态的改变及其意义。方法皮下注射硫芥,梯度离心法分离大鼠脾线粒体。用紫外分光光度法检测ROS、SOD、MDA及细胞色素含量;荧光分光法检测细胞内GSH含量;HE染色法观察脾脏病理损伤。结果低剂量... 详细信息

目的探讨低剂量硫芥诱导大鼠脾脏氧化应激状态的改变及其意义。方法皮下注射硫芥,梯度离心法分离大鼠脾线粒体。用紫外分光光度法检测ROS、SOD、MDA及细胞色素含量;荧光分光法检测细胞内GSH含量;HE染色法观察脾脏病理损伤。结果低剂量硫芥作用下,脾脏出现水肿;组织和线粒体内ROS、SOD、MDA、GSH、GSSG含量出现不同程度的改变;线粒体电子传递链成分(细胞色素)含量出现不同程度的丢失。结论氧化应激状态的改变是低剂量硫芥诱导机体免疫器官(脾)损伤的毒作用机制之一。

关键词：硫芥脾脏氧化应激

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脑电图在小鼠氧惊厥研究中的应用

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中华航海医学与高气压医学杂志 2005年第3期12卷 136-138页

作者：于涛杨冬梅陶恒沂徐伟刚黄俊龙蒋春雷第二军医大学海医系航海医学教研室上海200433

目的观察小鼠氧惊厥及惊厥后脑电图的改变。方法小鼠头部预先埋置电极,进行舱内高压氧(HBO)暴露,动态观察记录氧惊厥小鼠脑电改变以及暴露后脑电恢复情况。结果小鼠埋置电极3～5d后脑电改变恢复正常,舱内HBO暴露致氧惊厥时脑电图发生类... 详细信息

目的观察小鼠氧惊厥及惊厥后脑电图的改变。方法小鼠头部预先埋置电极,进行舱内高压氧(HBO)暴露,动态观察记录氧惊厥小鼠脑电改变以及暴露后脑电恢复情况。结果小鼠埋置电极3～5d后脑电改变恢复正常,舱内HBO暴露致氧惊厥时脑电图发生类似癫痫大发作时的痫波变化,并在氧暴露撤离后7d左右脑电图改变恢复正常。结论脑电图记录在小鼠氧惊厥研究中是一种可行、客观和稳定的方法。

关键词：脑电图氧惊厥小鼠脑电图改变高压氧(HBO) 脑电改变暴露后恢复情况观察记录发作时

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高压氧对离体小鼠腹腔巨噬细胞抗原提呈功能的影响

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中华航海医学与高气压医学杂志 2005年第4期12卷 240-242页

作者：吴海生陶恒沂徐伟刚蒋春雷郭明珠第二军医大学海医系潜水医学教研室上海200433

目的探讨高压氧(HBO)暴露对离体小鼠腹腔巨噬细胞(PM)抗原提呈功能的影响。方法巨噬细胞分为:常压空气对照组(NA)、HBO组Ⅰ(HBO-Ⅰ)、HBO组Ⅱ(HBO-Ⅱ)以及HBO组Ⅲ(HBO-Ⅲ)。各组按相应方案暴露,相应时间点观察巨噬细胞吞噬功能、Fc受... 详细信息

目的探讨高压氧(HBO)暴露对离体小鼠腹腔巨噬细胞(PM)抗原提呈功能的影响。方法巨噬细胞分为:常压空气对照组(NA)、HBO组Ⅰ(HBO-Ⅰ)、HBO组Ⅱ(HBO-Ⅱ)以及HBO组Ⅲ(HBO-Ⅲ)。各组按相应方案暴露,相应时间点观察巨噬细胞吞噬功能、Fc受体功能、NO分泌量、TNF-α分泌量、淋巴细胞DNA合成状况以及Ia抗原表达的变化。结果经400 kPa 4 h HBO暴露,所测巨噬细胞的各指标均明显下降(P<0.05);经400 kPa 6 h HBO暴露,所测巨噬细胞的各指标亦明显下降(P<0.05和P<0.01),且较400 kPa 4 h HBO暴露变化更为明显。巨噬细胞经200 kPa 4 h HBO处理后,各指标变化不明显。结论一定压力和时程的HBO暴露能显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞功能,体现了氧对免疫细胞的直接作用。HBO抑制巨噬细胞抗原提呈功能可能通过抑制其Ia抗原表达来实现。

关键词：高压氧巨噬细胞抗原提呈功能

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急性硫化氢中毒事故的特点与对策

急性硫化氢中毒事故的特点与对策

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中国毒理学会第四届全国学术会议

作者：张黎明贺茜樊军文第二军医大学海医系防化医学教研室第二军医大学长海医院第二军医大学海医系防化医学教研室

目的总结急性硫化氢中毒事故特点,提出预防对策。方法检索硫化氢急性中毒事故报道和相关文献资料,综合分析近年的急性硫化氢中毒事故实例。结果近年急性硫化氢中毒事故呈现出:重大事故多发,事故原因多样,中毒患者病死率高,参与抢救

关键词：硫化氢急性中毒对策

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