检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2002年第3期82卷 198-202页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如蒋立平第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所上海200433

目的　在毕赤酵母表达系统中获得大量构象正确的 3D7/MSP1 4 2重组蛋白进行疫苗有效性试验。方法　采用不对称PCR法拼接合成了 3D7/msp1 4 2基因 (12 0 2bp) ,用电穿孔法将合成基因导入毕赤酵母并进行诱导表达 ,用免疫印迹法检测表达产... 详细信息

目的　在毕赤酵母表达系统中获得大量构象正确的 3D7/MSP1 4 2重组蛋白进行疫苗有效性试验。方法　采用不对称PCR法拼接合成了 3D7/msp1 4 2基因 (12 0 2bp) ,用电穿孔法将合成基因导入毕赤酵母并进行诱导表达 ,用免疫印迹法检测表达产物。结果　按毕赤酵母密码子使用频率重新设计并全合成了 3D7/msp1 4 2基因序列 ,该合成基因在毕赤酵母系统 (Pichiapastoris)中得到高水平分泌表达 ,产生全长重组蛋白。识别构象表位的特异性单克隆抗体能与该重组蛋白反应。结论　重新设计的基因能在毕赤酵母中高水平分泌表达 ,并产生构象正确的重组蛋白。

关键词：毕赤酵母疟原虫基因合成裂殖子表面蛋白1

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RACE的研究及其在植物基因克隆上的应用

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复旦学报（自然科学版） 2002年第6期41卷 704-709页

作者：唐克轩开国银张磊潘征赵凌侠孙小芬郑金贵复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433 第二军医大学药学院上海200433 福建农林大学生物技术中心福州350002

cDNA的末端快速扩增(RACE)是获得全长cDNA的有效手段之一.综述了RACE技术的原理、局限性、方法改进和新型RACE技术以及RACE在植物基因克隆上的相对优势、应用现状和未来的发展前景.

关键词： RACE 植物基因克隆

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加速器质谱技术检测细胞中DNA加合物的方法体系的建立及其应用

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科学技术与工程 2002年第2期2卷 54-56页

作者：游冬青邹鲁峰陈杞韩玲杨平蔡建明孙红芳王海芳刘元方第二军医大学放射医学教研室第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433 北京大学技术物理系北京100871

本研究采用加速器质谱技术对体外培养细胞进行化学致癌物——苯并芘及杀灭菊酯的DNA加合物的C的标记示踪研究,建立了DNA加合物的剂量效应关系,并初步探讨了化学致癌物与细胞作用时间与DNA加合物形成关系,建立的该细胞模型可为细胞水平... 详细信息

本研究采用加速器质谱技术对体外培养细胞进行化学致癌物——苯并芘及杀灭菊酯的DNA加合物的C的标记示踪研究,建立了DNA加合物的剂量效应关系,并初步探讨了化学致癌物与细胞作用时间与DNA加合物形成关系,建立的该细胞模型可为细胞水平的化学致癌的机理的探讨提供有力的手段。

关键词：加速器质谱技术检测 DNA加合物化学致癌物体外培养细胞苯并芘杀灭菌酯

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皮质酮快速激活PC12细胞中p38丝列原激活的蛋白激酶(英文)

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生理学报 2001年第6期53卷 414-418页

作者：李晓煜邱俭肖林朱剑琴陈宜张第二军医大学生理学教研室第二军医大学神经科学研究所第二军医大学神经科学研究所南京210093 上海200433 南京大学生物科学与技术系

实验旨在研究糖皮质激素快速、非基因组作用的细胞内信号传导机制。Western分析研究结果表明 ,皮质酮可快速激活PC12细胞中p38丝列原激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK) ,时间、浓度曲线均为钟形 ,最大激活为 10 -9... 详细信息

实验旨在研究糖皮质激素快速、非基因组作用的细胞内信号传导机制。Western分析研究结果表明 ,皮质酮可快速激活PC12细胞中p38丝列原激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK) ,时间、浓度曲线均为钟形 ,最大激活为 10 -9mol/L和 15min。糖皮质激素受体阻断剂RU38486不能阻断此作用 ,而小牛血清白蛋白耦联的皮质酮也能快速激活p38。受体酪氨酸激酶阻断剂genistein对此作用无影响 ,表明此快速作用不涉及受体酪氨酸激酶活性。此作用能被蛋白激酶C (proteinkinaseC ,PKC)激动剂PMA模拟 ,而被PKC阻断剂G 6 976所阻断。结果表明 ,皮质酮可能通过推测的膜受体以PKC依赖的方式快速激活p38MAPK。

关键词：皮质酮非基因组作用 p38 蛋白激酶C PC12

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组蛋白乙酰化/脱乙酰化与DNA甲基化的关系

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生理科学进展 2001年第4期32卷 362-364页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学军队卫生教研室上海200433 第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

组蛋白乙酰化和脱乙酰化与DNA甲基化有密切的关系。本文介绍了DNA甲基化对组蛋白乙酰化 /脱乙酰化影响 ,组蛋白乙酰化 /脱乙酰化对DNA甲基化的影响 ,以及组蛋白乙酰化

关键词：组蛋白脱乙酰化组蛋白乙酰化 DNA甲基化

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天鹅型记忆接骨器治疗肱骨骨折和骨不连的三维有限元分析

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第二军医大学学报 2001年第10期22卷 943-945页

作者：许硕贵张春才苏佳灿刘晓华吴亦农吴建国薛召军丁祖泉第二军医大学长海医院骨科上海200433 中国科学院上海物理技术研究所同济大学生命科学与生物工程学院

目的 :研究天鹅型记忆接骨器 (SMC)治疗骨折和骨不连及其产生的动态记忆应力促进骨愈合的生物力学基础。方法 :利用计算机仿真三维有限元技术 ,对 SMC固定肱骨的生物力学行为进行模拟 ,接骨器有限元模型共划分了 3 487个单元 ,节点数为... 详细信息

目的 :研究天鹅型记忆接骨器 (SMC)治疗骨折和骨不连及其产生的动态记忆应力促进骨愈合的生物力学基础。方法 :利用计算机仿真三维有限元技术 ,对 SMC固定肱骨的生物力学行为进行模拟 ,接骨器有限元模型共划分了 3 487个单元 ,节点数为 5 397,单元采用 2 0节点四面体三维砖块单元 ;肱骨有限元模型共划分 5 783个单元 ,节点数为 986 3,单元采用 10节点四面体三维单元。结果 :接骨器固定肱骨后其内表面受拉力 ,外表面受压力 ,变形最大的加压部第一结构主应力最大值分别为 2 2 4.5 MPa和 - 34MPa,远小于其极限应力与疲劳极限 ;其维持轴向的动态记忆持骨力为 12 5 .0 5 N,纵向动态记忆加压力 196 N;被固定肱骨应力分布均匀 ,各节点所受应力主要为正应力。结论 :SMC有良好的耐疲劳与重复使用性 ,其固定后产生的动态记忆加压应力场 ,有利于固定肱骨的稳定并促进骨愈合。

关键词：天鹅型记忆接骨器三维有限元分析动态记忆应力肱骨骨折

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抑癌基因PTEN/MMAC1的cDNA克隆及其表达质粒的构建

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生物技术通讯 2001年第1期12卷 1-4页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学海医系军队卫生教研室上海200433 第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

为了获得PTEN/MMAC1的cDNA并构建其酵母双杂交系统中的诱饵质粒和逆转录病毒表达质粒。利用RT PCR方法 ,从 2 93细胞中扩增出一约 1.2kb的DNA片段 ,与pGEMTEasy连接 ,作全自动测序确证 ,重组入pLexA载体 ,构建成pLexA PTEN/MMAC1,并用... 详细信息

为了获得PTEN/MMAC1的cDNA并构建其酵母双杂交系统中的诱饵质粒和逆转录病毒表达质粒。利用RT PCR方法 ,从 2 93细胞中扩增出一约 1.2kb的DNA片段 ,与pGEMTEasy连接 ,作全自动测序确证 ,重组入pLexA载体 ,构建成pLexA PTEN/MMAC1,并用醋酸锂法转化酵母菌EGY48(p8op LacZ) ,在选择性培养基上观察pLexA PTEN/MMAC1在EGY48(p8op LacZ)中的表达情况 ;同时 ,PTEN/MMAC1的cDNA也重组入pLXSN构建pLXSN PTEN/MMAC1。结果PCR获得 1.2kb的DNA序列与文献报道的PTEN/MMAC1的cDNA一致 ,转化的酵母菌在选择性培养基上培养 3d后 ,长出约 1mm大小的白色菌落 ;pLXSN PTEN/MMAC1可酶切出 1.2kb的PTEN/MMAC1片段。结果表明获得了PTEN/MMAC1的cDNA ,pLexA PTEN/MMAC1可作为酵母双杂交系统中的诱饵质粒 ,而pLXSN PTEN/MMAC1的构建为进一步研究其抑癌作用打下了基础。

关键词：抑癌基因 PTEN MMAC1 酵母双杂交系统

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组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系

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生物化学与生物物理进展 2000年第6期27卷 609-612页

作者：陈坚张晓琴傅继梁上海第二军医大学军队卫生教研室上海200433 上海第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在... 详细信息

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶基因转录组蛋白脱乙酰化

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从氯喹抗性产生看疟原虫的诱导变异

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第6期18卷 363-365页

作者：严继舟宋关鸿李明第一军医大学生物技术研究室广州510515 第二军医大学病原生物学教研室上海200433

疟原虫对氯喹抗性的产生机制,一直存在争论,主要有两种观点[1,2],一种认为疟原虫抗药虫株天然存在.氯喹长期大量的应用起着选择(筛选)作用,将敏感个体或群体杀灭,遗留先天性抗药虫株.另一种观点则认为疟原虫获得氯喹抗药性是对后天环境... 详细信息

疟原虫对氯喹抗性的产生机制,一直存在争论,主要有两种观点[1,2],一种认为疟原虫抗药虫株天然存在.氯喹长期大量的应用起着选择(筛选)作用,将敏感个体或群体杀灭,遗留先天性抗药虫株.另一种观点则认为疟原虫获得氯喹抗药性是对后天环境变化的适应.长期维持氯喹刺激,会诱导疟原虫产生抗药性.究竟哪一种观点正确呢?本文提出探讨.

关键词：疟原虫诱导变异氯喹抗药性疟疾治疗

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恶性疟裂殖子表面蛋白1合成基因在毕赤酵母中的表达

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生物工程学报 2000年第6期16卷 723-726页

作者：张冬梅潘卫庆陆德如医学生物技术和分子遗传研究所上海200433 第二军医大学病原生物学教研室

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1是当今疟疾疫苗主要的候选抗原。由于天然MSP1基因AT含量异常高(为 74% ) ,使得克隆全长天然基因无法实现。本文已全合成了msp1基因 (4940bp) ,解决了该天然基因在异源系统中不稳定的问题。为制备大量msp1重... 详细信息

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1是当今疟疾疫苗主要的候选抗原。由于天然MSP1基因AT含量异常高(为 74% ) ,使得克隆全长天然基因无法实现。本文已全合成了msp1基因 (4940bp) ,解决了该天然基因在异源系统中不稳定的问题。为制备大量msp1重组蛋白进行疫苗有效性试验 ,本研究建立了msp1基因在毕赤酵母中的表达 ,将合成的msp1基因克隆到毕赤酵母胞内表达载体 pPIC3 5 ,构建了重组质粒 pPIC3 5 /msp1,用电击转化毕赤酵母得到重组转化子 ,经PCR证实msp1基因已整合于毕赤酵母染色体中。含有重组表达质粒的毕赤酵母菌经甲醇诱导后表达出全长msp1重组蛋白。表达产物能与识别MSP1分子二硫键依赖构象表位的特异性单抗发生很强的反应 ,表明msp1重组蛋白至少在该表位构象上与天然蛋白一致。从毕赤酵母中分离得到大量msp1为开展该蛋白的结构与功能 ,特别是测定其疟疾保护性免疫提供可能。

关键词：毕赤酵母恶性疟原虫疟疾疫苗表面蛋白1

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