检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2000年第4期21卷 369-371页

作者：任雨笙崔芳陈强贾国良王增禄张英起吴宗贵第二军医大学长征医院心血管内科上海200003 第四军医大学西京医院第四军医大学口腔医学院第四军医大学生物技术中心西安710032

目的：测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸组成和等电点。方法：用酸水解及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的方法测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸含量、组成成分和等电点。结果：酸水解法测定的猪血小板衍生生长因子含有１７种不同的氨基酸，... 详细信息

目的：测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸组成和等电点。方法：用酸水解及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的方法测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸含量、组成成分和等电点。结果：酸水解法测定的猪血小板衍生生长因子含有１７种不同的氨基酸，其中含有相对较多的碱性氨基酸，其等电点为９．８～１０．３。结论：猪血小板衍生生长因子是一种强阳离子多肽，含有相对较多的碱性氨基酸，与其等电点为９．８～１０．３是一致的。

关键词：血小板衍生生长因子氨基酸组成等电点

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重组恶性疟原虫DNA质粒免疫小鼠及抗原表达的调控

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生物工程学报 2000年第1期16卷 13-16页

作者：谢文凯陈启宇汪群斌潘卫庆颜日辉陆德如中国科学院上海植物生理研究所上海200032 上海复星高科技集团有限公司上海200042 第二军医大学寄生虫学教研室上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

将恶性疟原虫MSP131基因序列,引入四环素(Tc)控制的真核表达载体pTRE,获得重组质粒pTRE31。将MSP131的原核表达载体pDS56T1转化大肠杆菌表达MSP131,亲和纯化后作检测用抗原。pTRE31与辅助质粒pTetoff(tTA)肌肉注射4周龄BALB/c小鼠,观察... 详细信息

将恶性疟原虫MSP131基因序列,引入四环素(Tc)控制的真核表达载体pTRE,获得重组质粒pTRE31。将MSP131的原核表达载体pDS56T1转化大肠杆菌表达MSP131,亲和纯化后作检测用抗原。pTRE31与辅助质粒pTetoff(tTA)肌肉注射4周龄BALB/c小鼠,观察DNA介导免疫情况。结果显示,四环素饲喂的小鼠4周时血清抗体阳转率为71%(1/14),而不饲喂四环素组可达100%(14/14),表明用pTRE31/pTetoff重组质粒组合直接注射小鼠有效地引发了针对疟原虫MSP131抗原的体液免疫反应,且可受控于四环素。不饲喂四环素组小鼠在12周后仍能维持抗体阳性,倍比稀释ELISA显示血清抗体滴度在4周、8周和12周内持续上升。饲喂四环素组小鼠4周后停止饲喂Tc,第8周和第12周检测仍有部分(60%)小鼠血清抗体阳转,而继续饲喂Tc的小鼠未有抗体阳转,暗示重组质粒DNA在小鼠体内可持续存在至少4周并仍具备表达功能。

关键词：恶性疟原虫 DNA疫苗四环素 Tet-off调控系统

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重组恶性疟原虫DNA质粒免疫小鼠制备单克隆抗体

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微生物学报 2000年第4期40卷 389-393页

作者：谢文凯钟平潘卫庆陈启宇汪群斌陆德如中国科学院上海植物生理研究所上海200032 卫生部上海生物制品研究所上海200052 第二军医大学寄生虫学教研室上海200433 上海复星高科技(集团)有限公司上海200042 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

用恶性疟原虫MSP1 31基因片段的重组质粒DNA直接免疫BALB/c小鼠 ,诱导产生体液 ,免疫后取脾细胞与SP2 /0小鼠骨髓瘤细胞在PEG1 450作用下进行融合 ,获得了 2株能分泌抗恶性疟原虫MSP1 31单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株 9H9和 8A2。用... 详细信息

用恶性疟原虫MSP1 31基因片段的重组质粒DNA直接免疫BALB/c小鼠 ,诱导产生体液 ,免疫后取脾细胞与SP2 /0小鼠骨髓瘤细胞在PEG1 450作用下进行融合 ,获得了 2株能分泌抗恶性疟原虫MSP1 31单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株 9H9和 8A2。用酶联免疫吸附试验检测 ,小鼠腹水抗体滴度最高为 1∶1 0 0 0 0。经免疫球蛋白类型和亚类鉴定 ,2株杂交瘤细胞株均为IgG1 。蛋白免疫印迹试验表明 ,此单克隆抗体与MSP1 31蛋白抗原有特异免疫反应 ,证明通过质粒DNA直接免疫小鼠可制备特异性单克隆抗体。

关键词：严重疟原虫 DNA疫苗单克隆抗体制备载体DNA

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组蛋白乙酰化/脱乙酰化与细胞周期的关系

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国外医学（遗传学分册） 2000年第5期23卷 233-236页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学军队卫生教研室第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究上海200433

组蛋白乙酰化和脱乙酰化与细胞周期有密切的关系。本文介绍了组蛋白乙酰化 /脱乙酰化的变化与细胞周期进程的关系 ,HAT/ HDAC对 CDKI表达的影响以及 HAT/

关键词：组蛋白乙酰化组蛋白脱乙酰化细胞周期

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组蛋白脱乙酰化酶-1保守氨基酸中组氨酸定点突变的建立

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生物技术通讯 2000年第2期11卷 86-89页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学海军卫生教研室上海200433 第二军医大学长海医院感染科上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

为了研究组蛋白脱乙酰化酶 1(HDAC1)保守氨基酸中组氨酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守组氨酸定点突变的突变子。在克隆野生型HDAC1cDNA的基础上 ,利用Al teredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的 3个组氨酸位点... 详细信息

为了研究组蛋白脱乙酰化酶 1(HDAC1)保守氨基酸中组氨酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守组氨酸定点突变的突变子。在克隆野生型HDAC1cDNA的基础上 ,利用Al teredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的 3个组氨酸位点进行突变 ,并用全自动测序鉴定。结果分别获得了HDAC1的H14 0F、H178F、H179F的定点突变子 ,为进一步研究HDAC1保守氨基酸中组氨酸定点突变对其功能的影响打下了基础。

关键词：组蛋白脱乙酰化组蛋白脱乙酰化酶-1 体外定点突变

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HDAC2 cDNA的克隆及在酵母细胞中的表达

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癌变．畸变．突变 2000年第3期12卷 129-132页

目的 :本研究的目的为获得HDAC2的cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因。方法 :利用RT -PCR方法 ,从人HeLa细胞中扩增出一约 1 5Kb的DNA片段 ,全自动测序后 ,重组入pLexA载体 ,构建成 pLexA -HDAC2 ,用醋酸锂法转化酵母菌EGY48(p8op -l... 详细信息

目的 :本研究的目的为获得HDAC2的cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因。方法 :利用RT -PCR方法 ,从人HeLa细胞中扩增出一约 1 5Kb的DNA片段 ,全自动测序后 ,重组入pLexA载体 ,构建成 pLexA -HDAC2 ,用醋酸锂法转化酵母菌EGY48(p8op -lacZ)。结果 :结果显示 ,获得的 1 .5Kb的DNA片段碱基序列与文献报道的HDAC2的cDNA一致。pLex A -HDAC2转化EGY48(p8op -LacZ) 3天后 ,长出 1mm大小的白色菌落。结论 :上述结果表明 pLexA -HDAC2可在EGY48(p8op -LacZ)稳定表达 ,无毒性 ,也没有自身激活LacZ的功能 ,可作为酵母双杂交系统中的靶基因。

关键词：酵母双杂交系统 HDAC2 cDNA 表达

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3个HDAC1的保守氨基酸定点突变的获得

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癌变．畸变．突变 2000年第2期12卷 68-72页

:目的 :为了研究HDAC1保守氨基酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守氨基酸定点突变的突变子。方法 :在克隆HDAC1cDNA的基础上 ,利用AlteredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的三个氨基酸位点进行突变 ,经DNA测序鉴定... 详细信息

:目的 :为了研究HDAC1保守氨基酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守氨基酸定点突变的突变子。方法 :在克隆HDAC1cDNA的基础上 ,利用AlteredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的三个氨基酸位点进行突变 ,经DNA测序鉴定。结果与结论 :结果分别获得了HDAC1的C15 1A ,Y188F ,S197A的定点突变子 ,为进一步研究HDAC1保守氨基酸的定点突变对其功能的影响打下了基础。

关键词：组蛋白脱乙酰化定点突变氨基酸 HDAC1

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组蛋白乙酰化/脱乙酰化与肿瘤的关系

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中国肿瘤 2000年第10期9卷 466-468页

作者：陈坚张晓琴傅继梁第二军医大学军队卫生教研室上海200433 第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所

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猪血小板衍化生长因子的提取和纯化

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第四军医大学学报 2000年第10期21卷 1192-1194页

作者：张永和任雨笙张英起易声禹章翔第四军医大学西京医院全军神经外科研究所陕西西安710033 第二军医大学长征医院心血管内科第四军医大学生物技术中心

目的　建立一种简单、经济的血小板衍化生长因子(PDGF)的纯化方法 .方法　血小板衍化生长因子 (PDGF)具有耐酸性 (p H 2 .5 ) ,耐热 (10 0℃ )以及耐受 2 % SDS的特性 .采用酸醇提取、热处理、离子交换层析、分子筛等蛋白分离和纯化技... 详细信息

目的　建立一种简单、经济的血小板衍化生长因子(PDGF)的纯化方法 .方法　血小板衍化生长因子 (PDGF)具有耐酸性 (p H 2 .5 ) ,耐热 (10 0℃ )以及耐受 2 % SDS的特性 .采用酸醇提取、热处理、离子交换层析、分子筛等蛋白分离和纯化技术从猪血小板中提取和纯化 PDGF.结果　猪血小板衍化生长因子 (p PDGF)纯化倍数达 75 82倍 ,活性回收率为3% .结论　本方法简单、经济 ,纯化的猪血小板衍化生长因子(p PDGF)

关键词：血小板衍化生长因子纯化离子交换层析提取猪血

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人内皮生长抑制素基因克隆表达及其抑瘤作用

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第4期32卷 333-336页

作者：何志勇陈哲宇邱存平李彪张惟杰吴祥甫第二军医大学神经生物教研室上海200433中国科学院上海生物化学研究所!上海200031中国科学院上海生物化学研究所!上海200031上海交通大学生命科学技术学院!上海200240中国科学院上海生中国科学院上海生物化学研究所!上海200031 中国科学院上海生物化学研究所!上海200031

内皮生长抑制素 (endostatin)是最近报道具有抑制肿瘤生长和转移的蛋白质 ,为此 ,从正常人肝细胞株L0 2中抽提总RNA ,以RT PCR法获得了人内皮生长抑制素编码序列。序列分析表明 ,内皮生长抑制素cDNA开放阅读框架全长 5 5 5bp ,此基因 (G... 详细信息

内皮生长抑制素 (endostatin)是最近报道具有抑制肿瘤生长和转移的蛋白质 ,为此 ,从正常人肝细胞株L0 2中抽提总RNA ,以RT PCR法获得了人内皮生长抑制素编码序列。序列分析表明 ,内皮生长抑制素cDNA开放阅读框架全长 5 5 5bp ,此基因 (GenBank登录号为AF1840 6 0 ) ,共编码 184个氨基酸残基 ,其中基因序列有 5个碱基与文献报道不同 ,蛋白质序列中有 3个氨基酸残基与文献报道不同 ,说明存在人种间差异。将人内皮生长抑制素cDNA插入含T7启动子的质粒pET 2 8a(+)构建表达质粒pET ENDO ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,筛选表达菌株BL ENDO。表达菌株 1mmol/LIPTG诱导表达 3～ 5h后 ,产生大量的重组人内皮生长抑制素 ,并形成包含体。SDS PAGE分析表明 ,表达的重组蛋白占菌株可溶性蛋白质的 2 5 %以上。经纯化和复性后的内皮生长抑制素在小鼠体内具有明显的抑制肿瘤生长和转移的作用。

关键词：内皮生长抑制素大肠杆菌克隆表达抑瘤作用

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