检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2025年第1期25卷 19-25页

作者：李俊辉王璐谷雨叶菁袁媛空军军医大学基础医学院病理学教研室陕西西安710032 空军军医大学第二附属医院耳鼻喉科陕西西安710038

目的:构建带有6×His标签的大肠杆菌(L)-2-羟基戊二酸脱氢酶(L2HGDH)的原核表达载体,并进行重组蛋白的原核表达和纯化,以及酶活性鉴定。方法:以GenBank中大肠埃希菌K12菌株(Escherichia coli strain K12)的L2HGDH编码基因为模板,将... 详细信息

目的:构建带有6×His标签的大肠杆菌(L)-2-羟基戊二酸脱氢酶(L2HGDH)的原核表达载体,并进行重组蛋白的原核表达和纯化,以及酶活性鉴定。方法:以GenBank中大肠埃希菌K12菌株(Escherichia coli strain K12)的L2HGDH编码基因为模板,将其克隆到pET-28a(+)载体质粒中,在BL21(DE3)菌中进行诱导表达,进一步采用Ni-NTA系统纯化L2HGDH蛋白,利用SDS-PAGE及Western印迹检测蛋白纯化效果。纯化的L2HGDH催化(L)-2-羟基戊二酸(L-2HG)生成α-酮戊二酸(α-KG),时还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)为NADH,利用NADH在340 nm处有最大吸光度值,分析获得的大肠杆菌L2HGDH的酶活性,以及温度和pH值等对其酶活性的影响。结果:成功构建pET-28a(+)-L2HGDH原核表达质粒,并在BL21(DE3)中获得可溶性重组蛋白,获得L2HGDH蛋白纯度大于90%,且具有较高的(L)-2-羟基戊二酸脱氢酶生物学活性。结论:成功原核表达并纯化L2HGDH重组蛋白,重组蛋白具有良好的生物学活性,为研究L2HGDH的功能奠定了基础。

关键词： (L)-2-羟基戊二酸脱氢酶原核表达蛋白纯化酶活性

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m6A修饰在肝纤维化中的研究进展

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生命科学 2023年第4期35卷 472-479页

作者：谢苏杰杨悦赖渤文尹昊瓒杨富海军军医大学基础医学院医学遗传学教研室

N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）作为真核生物中最丰富的RNA内部修饰，影响RNA的加工，调节mRNA翻译效率，并与多种表观遗传学机制发生交互作用，进而在多种生理过程中调控基因的表达。肝纤维化是细胞外基质（extracellular matr... 详细信息

N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）作为真核生物中最丰富的RNA内部修饰，影响RNA的加工，调节mRNA翻译效率，并与多种表观遗传学机制发生交互作用，进而在多种生理过程中调控基因的表达。肝纤维化是细胞外基质（extracellular matrix,ECM）蛋白（主要是Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白）积累形成的纤维瘢痕取代正常组织的过程，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应。m6A修饰直接参与肝细胞损伤、炎症细胞募集和肝星状细胞激活等肝纤维化过程，并通过降低HBV蛋白的表达、与微RNA （microRNA）和肠道菌群相互作用等途径间接影响肝纤维化的发生发展。由于肝脏的再生能力较强，当慢性炎症或肝损伤的主要病因去除后，早期已经发生纤维化的肝脏可逆转为正常肝脏。m6A修饰在肝纤维化中的双重作用可为平衡机体纤维化过程提供思路。该文综述了m6A修饰在肝纤维化中的功能和作用机制，以期为相关疾病的诊疗提供新的思路。

关键词： m6A 肝纤维化 RNA修饰

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mitoNEET介导内皮细胞铁死亡促发糖尿病血管损伤

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心脏杂志 2025年 31-38页

作者：李凯峰殷铭泽张拓李霞宁婧鑫李泽杜娟李小强邢文娟张海锋空军军医大学基础医学院基础医学教学实验中心空军军医大学基础医学院学员五大队西安外事学院医学院护理系西北大学生命科学学院延安大学医学院病理学与病理生理学教研室空军军医大学药学院药理学教研室空军军医大学航空航天医学系飞行人员疗养与康复教研室

目的探讨mitoNEET介导的线粒体途径铁死亡致糖尿病血管损伤的机制。方法通过对比糖尿病小鼠（db/db）与对照组小鼠（WT）的内皮依赖性舒张功能、血管组织形态、活性氧（ROS）生成、电镜下线粒体形态等，明确糖尿病血管损伤特征；进一... 详细信息

目的探讨mitoNEET介导的线粒体途径铁死亡致糖尿病血管损伤的机制。方法通过对比糖尿病小鼠（db/db）与对照组小鼠（WT）的内皮依赖性舒张功能、血管组织形态、活性氧（ROS）生成、电镜下线粒体形态等，明确糖尿病血管损伤特征；进一步给予db/db小鼠铁死亡抑制剂（Fer-1）、线粒体抗氧化剂（mitoTEMPO）、铁螯合剂（DFO）等药物干预，观察干预线粒体途径铁死亡对db/db小鼠血管损伤的影响，并研究其分子机制。结果 db/db小鼠降主动脉内皮依赖性血管舒张功能受损（P<0.01），血清内皮素1(ET-1)水平升高（P<0.01）；降主动脉组织结构紊乱，ROS生成增加（P<0.01），线粒体结构受损。铁死亡抑制剂Fer-1可显著改善db/db小鼠内皮依赖性血管舒张功能（P<0.05），且降低血清ET-1水平（P<0.05）；给予Fer-1、mitoTEMPO及DFO后，降主动脉组织结构排列更为整齐，纤维化程度减轻，组织ROS生成减少（P<0.01），线粒体结构部分恢复。mitoNEET是线粒体外膜转运铁的关键分子，在高糖高脂损伤的内皮细胞中蛋白（P<0.01）高表达，且铁死亡关键因子GPX4的蛋白表达降低（P<0.05），线粒体膜电位降低；而给予Fer-1、mitoTEMPO及DFO干预后，细胞mitoNEET表达降低（P<0.05）,GPX4表达升高（P<0.05），内皮细胞铁死亡被抑制，线粒体膜电位升高（P<0.05）。结论线粒体途径铁死亡是促发糖尿病血管损伤的重要原因之一；铁死亡抑制剂可通过抑制铁死亡减轻糖尿病血管损伤；mitoNEET介导了高糖高脂诱导的内皮细胞铁死亡。这些结果为预防糖尿病血管损伤提供了新的思路和靶点。

关键词： mitoNEET 线粒体铁转运铁死亡糖尿病血管损伤

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线粒体融合在阿霉素诱导心脏毒性中的作用

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基础医学与临床 2025年第1期45卷 126-129页

作者：王钰淇王心雨罗皓文逯照鑫赵艺玮常盼西安医学院第二临床医学院麻醉系陕西西安710038 空军军医大学基础部生理与病理生理教研室陕西西安710000

阿霉素是一种广泛使用的抗肿瘤药物。靶向线粒体融合蛋白/丝裂素1/2(MFN1/2)及核转录因子红系2相关因子2(NRF2)可通过PKCε/Stat3/MFN2、SIRT1/MFN2、AMPK/NRF2等信号通路,上调线粒体融合蛋白表达,促进线粒体融合,维持动力学平衡进而保... 详细信息

阿霉素是一种广泛使用的抗肿瘤药物。靶向线粒体融合蛋白/丝裂素1/2(MFN1/2)及核转录因子红系2相关因子2(NRF2)可通过PKCε/Stat3/MFN2、SIRT1/MFN2、AMPK/NRF2等信号通路,上调线粒体融合蛋白表达,促进线粒体融合,维持动力学平衡进而保障线粒体功能,起到减少心肌细胞凋亡,减轻心脏毒性的作用。了解阿霉素性心脏毒性中线粒体融合的调节作用和机制将为疾病的防治提供新策略。

关键词：阿霉素线粒体融合心脏毒性丝裂素1/2(MFN1/2) 核转录因子红系2相关因子2(NRF2)

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中央杏仁核生长抑素阳性神经元参与小鼠急性痒和慢性痒的形态学研究

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神经解剖学杂志 2023年第3期39卷 255-261页

作者：梁怡饶茜荆雪金鑫米志宽延安大学医学院病理生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学基础医学院学员3大队9队西安710032

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性... 详细信息

目的:观察急性痒和慢性痒小鼠中央杏仁核(CeA)内生长抑素(SST)阳性神经元的激活情况,为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:在小鼠颈背部皮内注射组胺(His)或氯喹(CQ)建立急性痒模型;应用二苯基环丙烯酮(DCP)建立接触性皮炎慢性痒模型。进一步结合免疫荧光染色技术分别观察急性和慢性痒小鼠CeA内SST阳性神经元的激活情况。结果:对照组小鼠30 min内抓挠次数为(16.33±5.13)次;His组小鼠30 min内抓挠次数为(110.66±22.00)次;CQ组小鼠30 min内抓挠次数为(120.33±19.50)次。急性痒模型组小鼠抓挠次数显著高于对照组(P<0.05);DCP模型组小鼠搔抓次数明显高于对照组搔抓次数(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示在急性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.1±0.99)%;His组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(20.23±1.76)%;CQ组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(19.90±2.58)%;在慢性痒状态下,对照组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(3.73±2.05)%;DCP组CeA内SST/FOS双标神经元占SST阳性神经元的(23.93±4.02)%。结论:急性和慢性痒状态下,小鼠CeA内SST阳性神经元激活,为CeA内SST阳性神经元参与痒觉的信息传递提供了形态学依据。

关键词：中央杏仁核生长抑素急性痒慢性痒小鼠

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基于CRISPR/Cas的分子诊断技术在病毒检测中的应用

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检验医学与临床 2024年第20期21卷 3100-3104页

作者：尹佳祺折小娟和林洁(综述) 季乐乐(审校) 空军军医大学学员六大队24中队陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032 空军军医大学国家级基础医学实验教学示范中心陕西西安710032

2019年,新型冠状病毒感染疫情的爆发对快速、特异、灵敏、简便且廉价的诊断技术提出了迫切需求,分子诊断技术成为备受关注的热点。但目前常用的聚合酶链反应分子诊断技术存在诸多局限性。近年来,新兴的规律间隔成簇短回文重复序列及其... 详细信息

2019年,新型冠状病毒感染疫情的爆发对快速、特异、灵敏、简便且廉价的诊断技术提出了迫切需求,分子诊断技术成为备受关注的热点。但目前常用的聚合酶链反应分子诊断技术存在诸多局限性。近年来,新兴的规律间隔成簇短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)系统作为新型基因编辑工具为解决上述需求提供了可能。本研究综述了CRISPR/Cas系统的作用机制,并以不同Cas蛋白类型为线索,重点综述了多种CRISPR分子诊断技术及平台的原理及应用,同时关注其在病毒检测领域中的研究进展,并对CRISPR分子诊断技术的发展现状进行了总结。尽管CRISPR分子诊断技术目前处于起步阶段,存在污染、脱靶效应及序列依赖等局限性,该技术在分子诊断领域仍表现出革命性的发展潜力。

关键词： CRISPR 分子诊断 Ⅱ类Cas蛋白病毒检测小分子检测

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我国淋巴造血系统病理学近十年的回顾与展望

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中华病理学杂志 2025年第4期54卷 334-341页

作者：张智弘郭凌川张文燕王哲南京医科大学第一附属医院病理科南京210029 苏州大学附属第一医院病理科苏州215006 四川大学华西医院病理科成都610041 空军军医大学基础医学院病理学教研室暨西京医院病理科西安710032

近十年来,我国淋巴造血系统病理学领域取得了显著进展。国内专家在《中华病理学杂志》及国际权威期刊上发表了近百篇高质量文章,这些成果深化了淋巴造血系统病理的基础理论研究、提升了临床病理诊断水平,为国际淋巴造血系统疾病的病理... 详细信息

近十年来,我国淋巴造血系统病理学领域取得了显著进展。国内专家在《中华病理学杂志》及国际权威期刊上发表了近百篇高质量文章,这些成果深化了淋巴造血系统病理的基础理论研究、提升了临床病理诊断水平,为国际淋巴造血系统疾病的病理诊断与研究提供了宝贵的中国数据。此外,国内淋巴造血系统病理诊疗及培训体系全面优化,与临床的互动与融合更为紧密,培养了大批淋巴造血系统专科病理人才,推动整个病理学科的创新和发展。

关键词：淋巴造血系统疾病病理学,临床回顾与展望

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敲低TFAM通过上调ROS/ADAM17促进可溶型MICA生成抑制NK细胞杀伤人肝癌细胞的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第3期37卷 257-264页

作者：吴丹何元方周幸春邢金良刘晓斌延安大学医学院免疫教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院教学实验中心陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFA... 详细信息

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调促进肝癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中TFAM的表达,分析肝癌组织中TFAM表达水平与肝癌患者临床参数及预后的相关性。利用慢病毒载体构建TFAM稳定干涉及过表达的肝癌细胞株,与NKL细胞共培养,ELISA检测培养上清中可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)水平及NK细胞活化相关细胞因子的变化;流式细胞术检测肝癌细胞膜MICA的水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测共培养的NKL细胞杀伤活性。调控共培养上清中sMICA的含量后,ELISA及LDH试验检测细胞因子及NKL细胞杀伤功能是否受到影响。调控TFAM干涉或过表达肝癌细胞内的活性氧(ROS)水平和解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)表达,ELISA检测sMICA变化。结果与癌旁组织相比,TFAM在肝癌组织中显著低表达,且TFAM低表达肝癌患者其总生存期和无病生存期均显著低于TFAM高表达肝癌患者。敲低肝癌细胞TFAM后,细胞膜型MICA水平显著降低,而培养上清中的sMICA显著增加,细胞内ROS水平及ADAM17的表达均显著增强;肝癌细胞过表达TFAM后则相反。将TFAM稳定干涉的肝癌细胞与NKL细胞共培养后可显著降低NKL细胞活化细胞因子的分泌及杀伤功能,反之,与TFAM过表达的肝癌细胞与NKL细胞共培养后其活化相关细胞因子的表达及杀伤功能均显著增强。在肝癌细胞与NKL细胞共培养上清中加入MICA中和抗体,可显著恢复肝癌细胞TFAM干涉所导致的NKL细胞活性抑制及杀伤功能减弱;在共培养上清中加入重组MICA后,TFAM过表达所致的NK细胞活化及杀伤功能增强被显著抑制。敲低TFAM引起sMICA生成增加,但中和ROS或者敲低ADAM17后,可显著抑制sMICA生成;TFAM过表达导致sMICA生成减少,加入过氧化氢(H2O2)或者过表达ADAM17后,可显著增加sMICA生成。结论敲低TFAM上调ROS/ADAM17通路促进sMICA生成,抑制NK细胞的杀伤力。

关键词：肝细胞癌线粒体转录因子A(TFAM) 活性氧(ROS) 解整合素金属蛋白酶17(ADAM17) 可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA) 自然杀伤(NK)细胞

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课程思政融入临床医学专业心力衰竭教学的应用实践研究

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心脏杂志 2024年第1期36卷 112-115页

作者：肖天杨海黄启超郭旭刘小辉杨子岩空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院教学科研处陕西西安710032 空军军医大学第986医院心理科陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032

目的以病理生理学中心力衰竭教学内容为切入点,探讨课程思政的有效融入方式并对教学效果进行评价。方法以空军军医大学临床医学专业2018级和2019级各50名五年制本科生为研究对象,采取问卷调查的形式,比较开展课程思政和未开展课程思... 详细信息

目的以病理生理学中心力衰竭教学内容为切入点,探讨课程思政的有效融入方式并对教学效果进行评价。方法以空军军医大学临床医学专业2018级和2019级各50名五年制本科生为研究对象,采取问卷调查的形式,比较开展课程思政和未开展课程思政年级的学员学习情况,研究课程思政在教学过程中的运用情况和效果。结果在病理生理学的心力衰竭章节融入课程思政后,试验组的最终考核成绩和心力衰竭知识点的得分情况均高于对照组(P<0.05);对心力衰竭章节教学的满意度方面,试验组在提升知识理解掌握、引导创新思维培养、帮助学习兴趣激发以及坚定献身医学使命认识四个维度上高于对照组(P<0.05);在课程思政融入方式上,学员更加推荐以理论联系临床的小故事和军队卫生光荣事迹为融入点;教员普遍认为融入课程思政后,学员的学习积极性提升,课堂配合程度提高,学习态度更加端正,知识掌握更加融会贯通,师生交流沟通也更为通畅。结论将课程思政理念和方法融入心力衰竭教学后,学员的学习积极性、课堂配合度及思维创新性等明显提升,提升了学员学习效率和教员教学水平,展现了课程思政在医学课堂中的教学优势。

关键词：课程思政心力衰竭应用实践

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跑步对CUS抑郁模型小鼠内侧前额叶皮质内PV+中间神经元的影响

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陆军军医大学学报 2023年第3期45卷 209-218页

作者：秦露唐静梁芯綦英强罗艳敏肖倩黄杜娟周梅周宇宁唐勇重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016

目的探讨跑步对慢性不可预知性(chronic unpredictable stress, CUS)抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响和内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex, mPFC)内GABA能中间神经元、PV+中间神经元和GAD67+/PV+细胞比例的影响。方法选取4~6... 详细信息

目的探讨跑步对慢性不可预知性(chronic unpredictable stress, CUS)抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响和内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex, mPFC)内GABA能中间神经元、PV+中间神经元和GAD67+/PV+细胞比例的影响。方法选取4~6周龄的雄性C57BL/6小鼠,CUS建模成功后,利用糖水偏好实验结果将其以分层随机法分为对照组、CUS模型对照组和CUS模型+跑步组。运用糖水偏好实验、强迫游泳实验和悬尾实验评估各组小鼠的行为学水平。采用qRT-PCR检测小鼠mPFC中GAD1、GAD2、PV和CCK的mRNA表达水平。采用免疫组织化学和现代体视学相结合的方法对小鼠mPFC内GABA能中间神经元和PV+中间神经元数量进行精确三维定量,并分析PV+/GAD67+细胞比例。结果与CUS模型对照组小鼠相比,CUS模型+跑步组小鼠和对照组的糖水偏好百分比显著增加(P<0.05),强迫游泳不动时间显著降低(P<0.05),悬尾不动时间显著降低(P<0.05);对照组、CUS模型对照组和CUS模型+跑步组小鼠mPFC内GAD1、GAD2和CCK的mRNA表达水平以及GABA能中间神经元数量差异无统计学意义(P> 0.05);CUS模型对照组小鼠mPFC中PV的mRNA表达水平、PV+中间神经元数量和PV+/GAD67+细胞比例均显著低于CUS模型+跑步组和对照组(P<0.05)。结论跑步可能通过调节PV+中间神经元的数量和基因表达从而发挥抗抑郁效应。

关键词： CUS抑郁模型小鼠跑步 mPFC 体视学 GABA能中间神经元 PV+中间神经元

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