检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2007年第8期23卷 1583-1586页

作者：王轶群孙瑜杨瑞钟纪根卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的:观察猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对大鼠早期脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组、低、中、高3个不同剂量PPS给药组,各组动物均气道内滴注LPS1.5 ***-1,30 min后分别经气管滴注100 ***-1... 详细信息

目的:观察猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对大鼠早期脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组、低、中、高3个不同剂量PPS给药组,各组动物均气道内滴注LPS1.5 ***-1,30 min后分别经气管滴注100 ***-1、150 ***-1、200 ***-1PPS(PPS组)或等量生理盐水(对照组)。之后观察6 h,监测大鼠的PaO2和PaCO2,计算各组大鼠存活率。大鼠处死后检测肺系数(LI),肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量,白细胞(WBC)数和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,并观察肺病理组织学改变。结果:与生理盐水组相比,LPS损伤大鼠早期气道内滴入外源性PPS可提高PaO2,降低PaCO2,提高存活率,减轻肺水肿及肺毛细血管膜的通透性,PPS150组、PPS200组的治疗效果优于PPS100组。结论:PPS早期给药对LPS气道内滴注致ALI具有明显的治疗作用。

关键词：急性肺损伤脂多糖类猪肺表面活性剂大鼠

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热应激对大鼠肝组织及人前列腺癌PC-3细胞RhoB表达的影响

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第二军医大学学报 2007年第4期28卷 381-384页

作者：刘亚萍李忆东王晓慧杨瑞卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和West... 详细信息

目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和Western印迹分析测定RhoB mRNA和蛋白水平,并以正常大鼠肝脏组织作对照(n=6)。制备人前列腺癌PC-3细胞热应激模型,热应激后0．5、1、2、4、8 h取细胞检测RhoB的表达,并以未处理细胞作对照。结果:烫伤后4 h,大鼠肝组织RhoB mRNA表达量最高,为正常对照的3．2倍(P<0．01),8 h开始下降;而RhoB蛋白表达量在烫伤后8 h最高(P<0．01)。PC-3细胞RhoB mRNA在热应激后2 h时开始上调;4 h时达到最大值,约为对照的2．8倍(P<0．01);热应激后8 h RhoB蛋白表达量最高(P<0．01)。结论:在体内、体外实验中热应激均能上调小G蛋白RhoB mRNA和蛋白的表达。

关键词：热应激烫伤小G蛋白 RhoB 肝前列腺肿瘤

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噬菌体展示耐药突变HIV-1蛋白酶敏感切割位点六肽随机文库的构建

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中国药理学通报 2007年第3期23卷 403-406页

作者：卢海妹周波潘卫贾建安王锦红温宗梅何俊陈露邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学基础医学部微生物学教研室上海200433

目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行... 详细信息

目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANT-AB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒-1 蛋白酶耐药突变噬菌体展示文库

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胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法

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安徽医科大学学报 2007年第6期42卷 695-697页

作者：徐凌殷建华朱秀唐毕锋曹广文邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 第二军医大学流行病教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院普通外科上海200433

目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果... 详细信息

目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果RT-LAMP能特异性快速的扩增目的基因。结论RT-LAMP能因其特异,快速,高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测,对临床早期诊断提供标准。

关键词：胃肿瘤肿瘤转移

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噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库的构建

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安徽医科大学学报 2007年第2期42卷 128-132页

作者：何俊周霞陈璐陈秋莉王锦红蒋少华陈铭卢海妹潘卫邓松华安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 山西省临床检验中心太原030001 第二军医大学微生物教研室上海200433

目的构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础。方法应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域。用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z... 详细信息

目的构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础。方法应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域。用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z结构域的第10、13、27、28、31和32位氨基酸进行随机突变的定点随机突变体库。并在突变体片段两端引入KpnⅠ位点,3′端引入3个氨基酸大小随机连接肽的序列。经KpnⅠ酶切后随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S。克隆产物转化大肠杆菌TG1,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示定点随机突变组合文库。结果该定点随机突变组合文库的转化子数目为6.4×106个,滴度为1.4×1015TU/L;文库中含0.72以上的阳性克隆,其中有2个单结构域的阳性克隆占0.15;15个样品的序列分析显示各突变位点和随机连接肽的氨基酸序列呈随机性分布。结论成功构建了噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,该库库容量在一级结构上具有良好的随机性和多样性,可满足体外分子进化研究的要求。

关键词：细菌噬菌体/遗传学基因文库免疫球蛋白结合分子定点随机突变随机连接肽组合文库体外分子进化

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糖皮质激素抑制内毒素诱导的内源性硫化氢合成酶胱硫醚-γ-裂解酶表达的作用

糖皮质激素抑制内毒素诱导的内源性硫化氢合成酶胱硫醚-γ-裂解酶...

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中国生理学会2007年消化内分泌生殖学术研讨会

作者：刘书娟朱晓燕刘宇健倪鑫上海市第二军医大学基础部生理学教研室上海市第二军医大学基础部病理生理学教研室

目的:探讨细菌内毒素脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）和地塞米松（DEX）对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞内源性硫化氢合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（Cystathionine-gamma-lyase,CSE）表达的调节作用,证实糖皮质激素的抗炎抗休克作用是否部... 详细信息

目的:探讨细菌内毒素脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）和地塞米松（DEX）对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞内源性硫化氢合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（Cystathionine-gamma-lyase,CSE）表达的调节作用,证实糖皮质激素的抗炎抗休克作用是否部分通过抑制HS生成而完成。

关键词： CSE 启动子内毒素 RAW 报告基因分析小鼠巨噬细胞合成酶糖皮质激素内源性硫化氢

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不同时间给予猪肺表面活性物质对大鼠油酸型急性肺损伤疗效的影响

不同时间给予猪肺表面活性物质对大鼠油酸型急性肺损伤疗效的影响

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第八届全国烧伤外科学年会

作者：孙瑜夏照帆黄静霞钟纪根卢建第二军医大学附属长海医院烧伤科第二军医大学基础部病理生理学教研室

目的探讨不同时间给予猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对油酸致大鼠急性肺损伤 (acute lung injury,ALI)疗效的影响。方法 SD 大鼠48只,随机分为假手术组、油酸模型组、30min PPS 治疗组和2h PPS 治疗组。假手术组仅行手术操作,其余各组大... 详细信息

目的探讨不同时间给予猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对油酸致大鼠急性肺损伤 (acute lung injury,ALI)疗效的影响。方法 SD 大鼠48只,随机分为假手术组、油酸模型组、30min PPS 治疗组和2h PPS 治疗组。假手术组仅行手术操作,其余各组大鼠静脉注入油酸诱发急性肺损伤, 30min PPS 治疗组和2h PPS 治疗组分别于油酸注入后30min 和2h 经气道均滴入100mg/Kg 和150mg/kg 两个剂量的 PPS,实验过程中计数大鼠呼吸频率,测定动脉血气指标。4小时后处死,计算大鼠存活率,观察肺大体外观及病理组织学改变,并检测肺系数、肺泡支气管灌洗液(BALF)中总蛋白含量和血浆中 TNF-a 的浓度。结果与油酸模型组比较,30min 治疗组给予 PPS100、150mg/Kg 和2h 治疗组给予 PPS150mg/Kg 都能够显著降低大鼠的呼吸频率,提高动脉血 PaO2,降低肺毛细血管通透性、肺出血、肺水肿、血浆中 TNF-a 浓度以及大鼠死亡率(P<0.05),而2h 治疗组给予 PPS100mg/Kg 的治疗作用不明显。结论早期气道内滴入≥100 mg/Kg 的 PPS 能明显改善油酸型 ALI 大鼠的呼吸功能、减轻肺损伤,晚期较大剂量的 PPS(150 mg/Kg)才有治疗作用。

关键词：急性肺损伤模型组 PPS 猪肺表面活性物质

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μ型阿片受体和催产素受体二聚化的研究

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青岛大学医学院学报 2007年第5期43卷 408-409,412页

作者：高胜利郭菲菲崔瑞耀路长林由振东青岛大学医学院研究生教育管理办公室山东青岛266021 青岛大学医学院病理生理学教研室第二军医大学神经生物学教研室

目的探讨μ型阿片受体(MOR)和催产素受体(OTR)可否形成异源性受体二聚体。方法采用免疫共沉淀(IP)和荧光共振能量转移(FRET)方法,检测在MOR和OTR质粒共转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和大鼠脑组织中是否存在MOR和OTR异源二聚体。结果IP方法... 详细信息

目的探讨μ型阿片受体(MOR)和催产素受体(OTR)可否形成异源性受体二聚体。方法采用免疫共沉淀(IP)和荧光共振能量转移(FRET)方法,检测在MOR和OTR质粒共转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和大鼠脑组织中是否存在MOR和OTR异源二聚体。结果IP方法检测显示,在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中可见MOR和OTR蛋白条带。MOR和OTR共转染CHO细胞FRET方法检测信号为阳性(FRET率均值为2.01)。结论在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中存在异源性MOR和OTR二聚体。

关键词：受体,阿片样,μ 受体,催产素受体,G-蛋白耦联

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地塞米松抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖的分子机制:RhoB信号通路的作用

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中华医学杂志 2006年第20期86卷 1400-1404页

作者：陈玉霞李宗斌刁飞王燕卢建第二军医大学病理生理学教研室上海200433

目的观察地塞米松(Dex)对人卵巢癌细胞HO-8910增殖的影响,探讨小G蛋白RhoB信号通路在其中的作用。方法四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和软琼脂实验检测细胞的增殖;RT-PCR法检测RhoB mRNA的表达;Western印迹检测RhoB及其上下游信号分子磷酸... 详细信息

目的观察地塞米松(Dex)对人卵巢癌细胞HO-8910增殖的影响,探讨小G蛋白RhoB信号通路在其中的作用。方法四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和软琼脂实验检测细胞的增殖;RT-PCR法检测RhoB mRNA的表达;Western印迹检测RhoB及其上下游信号分子磷酸化Akt(p-Akt)、p21cip1/waf1和p27蛋白质的表达;报告基因技术检测p21cip1/waf1基因的转录。结果Dex可以明显抑制HO-8910细胞锚依赖性和非依赖性方式的增殖,100nM Dex处理细胞6d,抑制率为31%。100nM Dex处理细胞可以明显上调RhoB mRNA和蛋白质的表达(为对照的2.5倍);同时伴有p-Akt蛋白质表达的降低(24h时约为对照的50%)、p27蛋白质表达的增加(36h时比对照增加了3.3倍)以及p21cip1/waf1转录和蛋白质表达增多(24h时约为对照的1.7倍)。RhoB过表达可以降低细胞的生长速度,并能增强Dex的增殖抑制作用(100nMDex处理6d,抑制率为44%);而RhoB表达阻断后可逆转Dex的这一效应(抑制率约为13%)。结论Dex抑制HO-8910细胞增殖的机制可能与抑制PI3K/p-Akt信号,从而上调RhoB蛋白质,使RhoB下游信号分子p21cip1/waf1和p27蛋白质表达增加有关。

关键词：地塞米松 RhoB GTP结合蛋白质磷酸化酶激酶原癌基因蛋白质p21(ras) 基因产物,rex

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药物治疗浓度的雌激素对卵巢癌3AO细胞生长的影响(英文)

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Acta Genetica Sinica 2006年第9期33卷 782-792页

作者：李宗斌陈玉霞赵洁莹卢建上海第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

在过去的20年里,人们对于雌激素在不同组织、器官中发挥不同功能的分子机制进行了深入的研究,并取得了非常快的进展。最近的研究表明,雌激素能够抑制包括卵巢癌在内的多种肿瘤细胞的生长。卵巢是女性雌激素的主要来源,多种卵巢细胞表达... 详细信息

在过去的20年里,人们对于雌激素在不同组织、器官中发挥不同功能的分子机制进行了深入的研究,并取得了非常快的进展。最近的研究表明,雌激素能够抑制包括卵巢癌在内的多种肿瘤细胞的生长。卵巢是女性雌激素的主要来源,多种卵巢细胞表达雌激素受体,其中包括90%以上的卵巢癌起源的卵巢表面上皮细胞。雌激素诱导卵巢癌细胞凋亡的研究非常有实验及临床价值,雌激素调控的凋亡相关的特异性基因的发现对于揭示卵巢癌的发生发展以及针对卵巢癌特异性治疗的研究将会提供巨大的帮助。以人卵巢癌3AO细胞为模型,探讨了药物治疗浓度的雌激素对卵巢癌细胞的凋亡诱导作用以及其可能机制。首先用MTT检测方法观察了雌二醇及其受体拮抗剂ICI182780对3AO细胞生长的影响。研究发现,高于0.1μmol/L浓度的雌二醇能够抑制3AO细胞的生长,其中5μmol/L浓度的雌二醇处理3AO细胞72h后,对3AO细胞的抑制率达到70%。雌激素受体的拮抗剂ICI182780不但不能阻断雌激素的效应,它本身也能抑制3AO细胞的生长,并且与雌激素有协同效应,并且经流式细胞术证实雌激素及其受体拮抗剂引起的3AO细胞的死亡为凋亡。雌激素对生长的调控是细胞类型特异性的,其机制可能与细胞内雌激素受体不同亚型的表达有关。细胞内雌激素受体β亚型的表达利于细胞凋亡的发生,细胞内雌激素受体α亚型的表达则会保护细胞免于凋亡的发生。在对雌激素诱导的凋亡发生机制的探讨过程中,我们发现3AO细胞只表达雌激素受体β亚型,而不表达雌激素受体α亚型,并且与α亚型相比,β亚型的表达明显降低,这可以解释为何需要高浓度的雌激素才能够诱导3AO细胞凋亡。我们又观察了大分子BSA标记的雌激素对3AO细胞生长的影响,结果发现这种不能通过细胞膜的雌激素失去了对3AO细胞生长的抑制作用,从而排除了雌激素的膜效应。近来的研究表明,MAPK信号通路在调控细胞的生长过程中发挥了重要的作用,并且参与了雌激素调控细胞生长的过程。接下来我们观察了MAPK信号通路在雌激素诱导3AO细胞生长中的作用。研究发现,p38/MAPK激酶的抑制剂SB203580部分的阻断了雌激素的生长抑制效应,而JNK/MAPK激酶的抑制剂SP600125则能促进雌激素的效应,提示MAPK信号通路参与了雌激素的这种效应。

关键词：雌激素凋亡 MAPK 卵巢癌

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